血清白細(xì)胞介素21水平與大皰性類天皰瘡無(wú)相關(guān)性

李思哲 閆天萌 李麗 晉紅中 左亞剛

100730北京，中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院 北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 北京協(xié)和醫(yī)院皮膚科 協(xié)和醫(yī)學(xué)轉(zhuǎn)化中心

大皰性類天皰瘡（BP）是自身免疫性大皰性皮膚病，病理上表現(xiàn)為表皮下水皰形成，常有嗜酸性粒細(xì)胞（EOS）浸潤(rùn)?；颊咄庵苎狤OS計(jì)數(shù)、抗BP180抗體滴度與病情相關(guān)［1?2］。白細(xì)胞介素（IL）21是一種重要免疫調(diào)節(jié)因子，由多種細(xì)胞分泌，在固有免疫及適應(yīng)性免疫中均發(fā)揮重要作用，尤其在幫助初始B細(xì)胞分化為漿細(xì)胞并分泌抗體中作用更明顯［1］。許多研究發(fā)現(xiàn)，其在系統(tǒng)性紅斑狼瘡、炎癥性腸病等自身免疫性疾病患者外周血中明顯升高，IL?21與BP相關(guān)性研究報(bào)道較少。我們用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測(cè)BP患者血清IL?21與抗BP180抗體、EOS的關(guān)系。

圖1 大皰性類天皰瘡患者血清IL-21與抗BP180抗體、嗜酸性粒細(xì)胞絕對(duì)值、大皰性類天皰瘡疾病面積指數(shù)（BPDAI）的相關(guān)性

一、對(duì)象與方法

1.對(duì)象：2016年3月至2017年4月在北京協(xié)和醫(yī)院皮膚科門診收集初診并且最終診斷為BP的50～80歲患者，排除患有腫瘤、其他自身免疫性疾病或急性感染的患者。共收集BP患者31例，年齡50～80（68.39±9.160）歲，男11例，女20例；健康對(duì)照組31例，年齡50～ 80（64.55± 7.536）歲，男14例，女17例。兩組年齡、性別差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05）。31例BP患者組織病理均表現(xiàn)為表皮下水皰形成，皰液中有EOS浸潤(rùn)，直接免疫熒光（基底膜帶線狀I(lǐng)gG、IgM或C3沉積）、間接免疫熒光（血清中出現(xiàn)抗基底膜帶抗體）、抗BP180抗體指標(biāo)中任意2項(xiàng)陽(yáng)性。本研究經(jīng)北京協(xié)和醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，受試者均簽署知情同意書。

2.試劑、儀器及方法：IL?21 ELISA試劑盒（英國(guó)Abcam公司），抗BP180抗體檢測(cè)試劑盒（日本MBL公司），Varioskan Flash多功能酶標(biāo)儀（美國(guó)賽默飛世爾科技公司）。

收集BP患者及健康對(duì)照靜脈血4Ml，分離血清置-80℃冰箱保存待測(cè)。用ELISA檢測(cè)血清IL?21及抗BP180抗體水平，按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行，酶標(biāo)儀讀取450 nm吸光度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算IL?21及抗BP180抗體含量。31例BP患者中，27例行全血細(xì)胞計(jì)數(shù)，其中男13例，女14例。根據(jù)皮膚、黏膜各區(qū)域皮損類型、數(shù)目及患者主觀瘙癢程度，詳細(xì)記錄13例患者BP疾病面積指數(shù)（BPDAI）分值。

3.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析。兩組計(jì)數(shù)資料比較用卡方檢驗(yàn)。計(jì)量資料以M（P25～P75）表示，組間比較采用Mann?whitney檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用Spearman檢驗(yàn)，相關(guān)系數(shù)＞0.7為較強(qiáng)相關(guān)，0.4～0.7為中度相關(guān)，0.1～0.3為弱相關(guān)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

二、結(jié)果

1.患者組與對(duì)照組IL?21水平：患者組31例血清IL?21水平為255.28（156.19～ 361.59）ng/L，對(duì)照組31例為150.47（72.4～268.73）ng/L，兩組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.14）。

2.BP患者外周血IL?21水平與抗BP180抗體相關(guān)性：31例BP患者血清IL?21水平與抗BP180抗體［82.98（26.82～132.92）U/ml］無(wú)顯著相關(guān)性（rs＝0.18，P=0.332）。見圖1。

3.BP患者外周血IL?21水平與EOS相關(guān)性：27例有EOS計(jì)數(shù)的BP患者中，血清IL?21水平［256.72（150.81～884.10）ng/L］與全血EOS絕對(duì)值［0.53（0.17～ 1.04）× 109/L］無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)相關(guān)性（rs＝0.104，P=0.606），見圖1。

4.BP患者外周血IL?21與BPDAI相關(guān)性：13例評(píng)估BPDAI的患者中，血清IL?21水平［223.30（200.68 ～ 981.63）ng/L］與BPDAI［96（69 ～ 141）］無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)相關(guān)性（rs＝-0.233，P=0.464）。見圖1。

三、討論

Li等［3］研究發(fā)現(xiàn)，BP患者血清IL?21明顯升高，且與抗BP180?NC16A抗體滴度正相關(guān)，并得出了Tfh與IL?21在BP患者抗體產(chǎn)生中發(fā)揮重要作用的結(jié)論。而本研究結(jié)果顯示，BP患者組與健康對(duì)照組血清中IL?21含量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，IL?21與抗BP180抗體和血EOS絕對(duì)值及BPDAI均無(wú)顯著相關(guān)性。以上結(jié)果與Li等的研究結(jié)論不一致，推測(cè)原因可能有以下幾個(gè)方面：①目前對(duì)于IL?21與BP關(guān)系研究較少，無(wú)其他研究佐證本研究與Li等研究之間的矛盾；②Tfh細(xì)胞可分為Tfh?Th1、Tfh?Th2、Tfh?Th17亞群，其中IL?21主要由Tfh?Th2和Tfh?Th17分泌，而不是Tfh?Th1細(xì)胞，而在BP患者中，可能主要為Tfh?Th1，因此較少產(chǎn)生IL?21；③體內(nèi)免疫反應(yīng)中IL?21的作用是多樣的，既能促進(jìn)多種免疫反應(yīng)，也能抑制眾多免疫過程，IL?21在BP中發(fā)揮的作用有待進(jìn)一步研究；④本研究樣本例數(shù)較少，大部分病例來(lái)自于既往就診患者，收集樣本時(shí)多已經(jīng)過系統(tǒng)治療，不同治療方案間是否對(duì)IL?21的產(chǎn)生有影響尚不得而知，后續(xù)可進(jìn)行更深入研究。