TCT聯(lián)合HC2檢測在宮頸癌及癌前病變篩查中的應(yīng)用

張丹丹，王 強(qiáng)，王 巖，姚 華

（南通市第二人民醫(yī)院婦產(chǎn)科，江蘇226002）

宮頸癌是全世界女性最常見的惡性腫瘤之一，約占婦女全部惡性腫瘤15%[1]，每年約有5萬人死于宮頸癌[2]。宮頸癌發(fā)生是多因素作用的結(jié)果，研究表明高危型人乳頭瘤病毒（high-risk human papilloma virus，HR-HPV）持續(xù)感染是宮頸癌前病變及宮頸癌發(fā)生、發(fā)展的必要條件[3-4]。宮頸癌的癌前病變期較為漫長，并且可逆，若能早發(fā)現(xiàn)、早治療，可有效降低宮頸癌的發(fā)生率。近年來，薄層液基細(xì)胞學(xué)檢測（thinprep cytologic test，TCT）及人乳頭狀瘤病毒（human papillomavirus，HPV）檢測技術(shù)的廣泛應(yīng)用大大提高了宮頸病變的檢出率。第二代雜交捕獲技術(shù)（hybrid captureⅡ，HC2）是目前美國食品藥品監(jiān)督管理局（FDA）唯一批準(zhǔn)可在臨床應(yīng)用的人乳頭瘤病毒檢查。本研究選取2015年1月—12月我院婦科門診TCT檢查提示非典型鱗狀上皮細(xì)胞（ASCUS）或以上的353例患者，行聯(lián)合HC2篩查及陰道鏡檢查，對兩種檢測方法進(jìn)行比較分析，進(jìn)一步認(rèn)識其在宮頸癌篩查中的臨床意義，分析結(jié)果如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 353例TCT檢查提示ASCUS或以上患者，年齡21～73歲，進(jìn)一步行HC2-DNA檢測、陰道鏡檢查及陰道鏡宮頸組織活檢。以病理診斷為標(biāo)準(zhǔn)，對宮頸癌及癌前病變的篩查方法進(jìn)行分析及評價。

1.2 方法

1.2.1 液基細(xì)胞學(xué)檢測：由婦產(chǎn)科醫(yī)生采用液基細(xì)胞學(xué)專用細(xì)胞刷置入宮頸管外口鱗柱交接部位，順時針旋轉(zhuǎn)5～6周，將刷取的宮頸脫落細(xì)胞置于液基細(xì)胞學(xué)涂片標(biāo)本存儲液中，搖勻后送病理學(xué)檢查，采用細(xì)胞病理學(xué)（TBS）報(bào)告系統(tǒng)和評估標(biāo)準(zhǔn)報(bào)告結(jié)果。細(xì)胞學(xué)采用TBS分級診斷標(biāo)準(zhǔn)閱片，包括以下類型：（1）無上皮內(nèi)病變或惡性病變（NILM）；（2）不典型鱗狀上皮細(xì)胞（ASCUS）；（3）不除外高度鱗狀上皮內(nèi)病變的不典型鱗狀上皮細(xì)胞（ASC-H）；（4）低度鱗狀上皮內(nèi)病變（LSIL）；（5）高度鱗狀上皮內(nèi)病變（HSIL）；（6）鱗狀細(xì)胞癌（SCC）；（7）非典型腺細(xì)胞（AGCUS）；（8）原位腺癌（AIS）；（9）腺癌（AC）。細(xì)胞學(xué)異常（陽性者）包括ASCUS及以上病變。

1.2.2 HC2-HPV檢測：由婦產(chǎn)科醫(yī)生將HC2專用刷置入宮頸口，刷緣緊貼宮頸，逆時針旋轉(zhuǎn)3周，然后將細(xì)胞刷置于HC2涂片標(biāo)本存儲液中，送病理學(xué)檢查。根據(jù)美國Digene公司研制的HPV-DNA HC-2檢測方法，對標(biāo)本進(jìn)行13種HC2-HRV亞型（16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68）檢測。結(jié)果判定：熒光讀數(shù)與陰性測定值比值（RLU/CO）≥1.0為陽性，比值（RLU/CO）＜1.0為陰性。

1.2.3 陰道鏡下病理活檢：使用Olympus公司陰道鏡數(shù)字成像系統(tǒng)，采用3%冰醋酸試驗(yàn)，綠色鏡觀察血管形態(tài)。碘溶液涂宮頸，檢查是否著色，用活檢鉗于可疑區(qū)取組織，若鏡下未發(fā)現(xiàn)可疑病變部位，則常規(guī)在移行帶3、6、9、12點(diǎn)做活檢及宮頸管搔刮術(shù)，標(biāo)本送組織病理學(xué)檢查。病理學(xué)診斷分為：急慢性炎性改變、宮頸上皮內(nèi)瘤病變Ⅰ級（CINⅠ）、宮頸上皮內(nèi)瘤病變Ⅱ級（CINⅡ）、宮頸上皮內(nèi)瘤病變Ⅲ級（CINⅢ）、宮頸癌。組織病理學(xué)診斷CINⅠ級及以上病變?yōu)殛栃?。以組織病理學(xué)檢查結(jié)果作為確診標(biāo)準(zhǔn)。宮頸病變的病理結(jié)果報(bào)告歸為兩類：（1）CINⅡ－：包括正常、炎癥、尖銳濕疣、宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變（cervical inreaepithelial neoplasias，CINⅠ）；（2）CINⅡ+：包括CINⅡ、CINⅢ、宮頸癌。

1.3 觀察指標(biāo) 比較TCT檢測結(jié)果（慢性炎癥、ASCUS、LSIL、HSIL、SCC、AGCUS、AIS、AC）、病理學(xué)檢查結(jié)果（宮頸炎、CIN1、CIN2、CIN3、宮頸癌）及HC2-DNA檢測結(jié)果，分析TCT聯(lián)合HC2-DNA診斷陽性率。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理分析，計(jì)數(shù)資料組間比較采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 TCT檢測與病理學(xué)結(jié)果比較 病理學(xué)檢查CINⅡ－234例（66.3%），CINⅡ+119例（33.7%），ASCUS組274例中CINⅡ－196例（71.5%），CINⅡ+78例（28.5%）；LSIL組 53例中 CINⅡ－35例（66.0%），CINⅡ+18例（34.0%）；ASC-H組4例中CINⅡ－2例（50.0%），CINⅡ+2例（50.0%）；HSIL組22例中 CINⅡ－1例（4.5%），CINⅡ+21例（95.5%），可見隨著TCT診斷病變級別的升高，CINⅡ+檢出率增高。ASCUS組CINⅡ+檢出率與LSIL組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.647，P=0.421）。HSIL 組 CINⅡ+檢出率高于ASCUS組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=41.053，P＜0.01）。HSIL組CINⅡ+檢出率高于LSIL組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=23.552，P＜0.01）。見表 1。

表1 TCT診斷與組織病理學(xué)結(jié)果比較 例（%）

2.2 HPV檢測結(jié)果與病理學(xué)結(jié)果比較 353例患者中共檢出HPV陽性307例，陰性46例。CINⅡ－組234例中HPV感染190例（81.2%），CINⅡ+組119例中HPV感染117例（98.3%），CINⅡ+組HPV感染率明顯高于CINⅡ－組。HPV陽性組中CINⅡ+117例，檢測率為38.1%，HPV陰性組中CINⅡ+2例，檢出率為4.3%，兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=20.407，P＜0.01）。見 表 2。

表2 HPV檢測與組織病理學(xué)結(jié)果比較 例（%）

2.3 不同級別細(xì)胞學(xué)異常與HPV感染及宮頸病變關(guān)系 307例患者TCT細(xì)胞學(xué)異常合并HPV感染，其中ASCUS患者中HPV陽性232例（75.6%），LSIL中HPV陽性51例（16.6%），ASC-H中HPV陽性3例（1.0%），HSIL中HPV陽性21例（6.8%）。HPV陽性ASCUS患者中，CINⅡ+病變78例（33.6%），HPV陰性ASCUS患者中，CINⅡ+病變率為0，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=19.740，P＜0.05），提示 HPV 陽性 AS CUS 患者 CINⅡ+發(fā)生率更高。LSIL、ASC-H、HSIL各組HPV陽性與陰性組比較，CINⅡ+發(fā)生率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。HPV陰性LSIL患者中未發(fā)現(xiàn)CINⅡ+。見表3。

表3 不同級別細(xì)胞學(xué)異常與HPV感染及宮頸病變關(guān)系 例（%）

3 討 論

宮頸癌有明確的癌前期病變階段，從宮頸上皮內(nèi)瘤變發(fā)展到宮頸癌需要數(shù)年或數(shù)十年時間[5]，對癌前病變早發(fā)現(xiàn)、早治療能有效預(yù)防宮頸癌的發(fā)生。目前認(rèn)為陰道鏡組織病理學(xué)活檢是診斷宮頸癌的金標(biāo)準(zhǔn)，但系有創(chuàng)性，不適用于臨床篩查。細(xì)胞學(xué)檢查以往采用巴氏涂片，檢出率低[6]，易發(fā)生漏診。TCT檢測已是宮頸癌篩查的常用方法，可以早期診斷宮頸病變。本研究以353例TCT檢查異常者為研究對象，其中病理檢查陽性者186例，病理符合率為52.7%；TCT 診斷 ASCUS、LSIL、ASC-H、HSIL 中，病理檢查CINⅡ+的符合率分別為 28.5%、34.0%、50.0%、95.5%，雖然TCT篩查存在一定的假陽性率及假陰性率，但隨著TCT檢查細(xì)胞學(xué)級別的升高，宮頸高度及以上病變的篩查診斷符合率明顯提高，本結(jié)果與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[7-8]。

有研究發(fā)現(xiàn)，隨著宮頸病變程度的加重，HPV感染率隨之明顯升高，宮頸癌患者HPV感染率幾乎高達(dá)100%[9]。目前較多研究證實(shí)，HPV持續(xù)性感染是宮頸癌病變的高危因子之一。HC2-HPV-DNA檢測敏感度高，操作簡單，陰性預(yù)測性顯著[10]。Zhao等[11]認(rèn)為HC2是目前篩查宮頸HPV感染的最佳檢測方法，尤其對高危型HPV的敏感性高達(dá)99.9%。本文對353例TCT檢查陽性患者行HC2-HPVDNA 檢測，顯示 ASCUS、LSIL、ASC-H、HSIL 患者中HPV感染率分別為84.7%、96.2%、75.0%、95.5%，與相關(guān)報(bào)道的結(jié)果稍有差異，可能與樣本量有關(guān)。在宮頸CINⅡ+病變中，HPV感染率為98.3%，高于CINⅡ-病變的81.2%，HPV陽性組中宮頸CINⅡ+病變的檢出率明顯高于陰性組?？梢?，隨著病理級別的升高，HPV感染率也隨之升高，與相關(guān)研究結(jié)論相一致。有研究表明[12-13]，細(xì)胞學(xué)聯(lián)合HPV檢測與其中單獨(dú)一種方法相比，對宮頸疾病篩查的敏感度更高，漏診率更低。本研究發(fā)現(xiàn)，ASCUS患者中，HPV陽性組CINⅡ+發(fā)生率明顯高于HPV陰性組（33.6%vs 0），提示HPV陽性ASCUS患者CINⅡ+發(fā)生率更高。而對于其他細(xì)胞學(xué)類型，需要擴(kuò)大樣本量進(jìn)行探討。

總之，TCT檢查對早期篩查宮頸癌病變具有重要價值，聯(lián)合HPV檢查則更可靠。