精子形態(tài)影響復發(fā)性流產(chǎn)夫婦夫精人工授精臨床妊娠率的臨床研究

蘇生 梁寶珠 黃顯文 李彩娟 余健偉

IUI是一種輔助生殖技術(shù),通過非性交方式將精子送入到女性生殖道使女子受孕。宮腔內(nèi)人工授精(intrauterine insemination,IUI)是用人工方法將精子注入女性子宮腔,其妊娠成功率更高,是目前公認的、經(jīng)濟有效、限制條件少的輔助生育手段［1］。顧名思義,夫精宮內(nèi)IUI是用丈夫精子對其配偶進行IUI的方法,現(xiàn)廣泛應用于男性生育能力不足、免疫因素、性交或射精障礙和部分不明原因［2］。目前國內(nèi)對不孕不育、反復自然流產(chǎn)的病因?qū)W研究主要集中在女性因素,而作為提供胚胎基因半數(shù)的男性因素研究較少［3］。精子形態(tài)作為評價男性生育能力的重要指標,在IUI中也是預測妊娠成功率的重要參數(shù)［4］。為探究精子形態(tài)對復發(fā)性流產(chǎn)夫婦夫精宮腔內(nèi)IUI妊娠率的影響,本研究以2016年4月～2017年10月在本院進行夫精宮內(nèi)IUI的191個周期作為觀察對象,現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 以2016年4月～2017年10月在本院就診,進行夫精宮內(nèi)IUI 192個周期的有復發(fā)性流產(chǎn)病史的夫婦作為研究對象,根據(jù)丈夫精子形態(tài)分為精子形態(tài)正常率＜1%的A組(56個周期)、正常率≥1%～3%的B組(50個周期)、正常率≥3%～4%的C組(46個周期)以及正常率≥4%的D組(40個周期)。A組患者年齡26～43歲,平均年齡(35.71±5.26)歲,配偶平均年齡(33.83±5.06),不孕年限(4.84±1.22)年。B組患者年齡26～43歲,平均年齡(35.71±5.26)歲,配偶平均年齡(33.66±5.02),不孕年限(4.87±1.23)年。C組患者年齡26～44歲,平均年齡(35.72±5.29)歲,配偶平均年齡(33.71±5.10),不孕年限(4.83±1.24)年。D組患者年齡26～45歲,平均年齡(35.76±5.27)歲,配偶平均年齡(33.69±5.05),不孕年限(4.83±1.27)年。四組患者年齡、配偶年齡等一般資料比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05),具有可比性。且本研究內(nèi)容均經(jīng)過患者的同意并簽署知情同意書。

1.2 納入及排除標準［5］在本院進行夫精宮內(nèi)IUI的191個周期均有1年以上不孕不育史和復發(fā)性流產(chǎn)史,對其進行相應檢查,排除排卵異常等女性相關(guān)因素,排除男性生殖內(nèi)分泌異常、體細胞染色體異常、免疫感染等除形態(tài)外所有因素。

1.3 分組指標 用精子形態(tài)正常率對夫精IUI周期進行分組,精子形態(tài)檢測根據(jù)世界衛(wèi)生組織第5版的精液質(zhì)量分析標準采用Diff-Quik快速染色法進行染色,自然干燥后,10×目鏡100×油鏡,計數(shù)200條以上精子進行形態(tài)評價,0.5 ml液化精液與10 ml生理鹽水混勻,離心15 min(800 g離心力)棄上清,留取約0.5 ml的沉淀物,混勻。取一小滴精液(5～20 μl)于潔凈載玻片上,用第二張載玻片的邊緣在清潔載玻片表面拖拉精液,制成適當厚度,涂片。涂片于空氣自然干燥后,10×目鏡100×油鏡檢查,并計算正常精子形態(tài)百分率［6］。臨床上認為≥4%為正常,≥3%～4%為輕度異常,≥1%～3%為中重度異常,＜1%為極重度異常。＜1%的極重度異常者建議行試管嬰助孕,因IUI具有創(chuàng)傷少優(yōu)點,簽署知情同意書后仍可運行。

1.4 夫精宮內(nèi)IUI方法

1.4.1 母體準備 IUI時間選擇經(jīng)監(jiān)測排卵女方月經(jīng)周期的第12～18天,若子宮內(nèi)膜＞0.8 cm、卵泡直徑＞1.8 cm、尿促黃體生成素(LH)陽性則可進行IUI；若尿LH陰性,應該注射人絨毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,HCG)2000～10000 U或注射丙氨瑞林0.3 mg后36 h內(nèi)進行IUI。

1.4.2 精子準備 男方禁欲2～7 d,手淫法取精置于無菌取精杯中,立刻放入37℃恒溫箱保存,液化后進行密度梯度離心3 min(5000 r/min)去除精漿。制備后精子,前向運動精子(PR)精子≥1000萬條,否則取消周期。

1.4.3 IUI 待授精母體取膀胱結(jié)石位,常規(guī)消毒后,用陰道窺器使宮頸暴露,對陰道進行消毒,用生理鹽水擦拭宮頸外口和宮頸,取0.5～1.0 ml制備好的精子,緩慢注入宮腔,仰臥休息30 min,術(shù)后常規(guī)黃體支持治療,術(shù)后15 d左右測尿HCG。

1.5 觀察指標及判定標準 IUI后15 d測尿或血HCG觀察妊娠成功情況,HCG陽性視為IUI成功妊娠［7］。

1.6 統(tǒng)計學方法 采用SPSS22.0統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。計量資料以均數(shù)±標準差(±s)表示,采用t檢驗；計數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗;對四組IUI夫婦精子形體正常率與妊娠率進行單因素方差分析與Logistic回歸分析。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 四組妊娠情況比較 A組、B組、C組和D組的妊娠成功率分別為3.57%、8.00%、15.22%和25.00%；精子正常率≥4%的妊娠成功率高于精子正常率＜1%、≥1%～3%、≥3%～4%,差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。見表1。

表1 四組妊娠情況比較(%)

2.2 Logistic回歸分析 Logistic回歸分析結(jié)果顯示,精子形態(tài)正常率是(OR=0.51,95%CI=0.30,0.79)是影響夫精宮內(nèi)IUI妊娠成功率的影響因素,其中精子正常率≥4%是IUI妊娠成功的保護因素,＜1%是IUI妊娠成功的危害因素。

3 討論

2010年WHO頒布的第5版《人類精液實驗室檢驗手冊》在嚴格的精子形態(tài)學分類標準的情況下,已證實精子形態(tài)正常率與生育能力之間存在密切的聯(lián)系,并規(guī)定精子形態(tài)正常率＜1%生育能力不佳,＞4%為正常精子,具有較好的生育能力［8,9］。這對判斷男性生育能力的預后有重要意義。本研究結(jié)果也顯示,A組、B組、C組和D組的妊娠成功率分別為3.57%、8.00%、15.22%和25.00%；精子正常率≥4%的妊娠成功率高于精子正常率＜1%、≥1%～3%、≥3%～4%,差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。Logistic回歸分析結(jié)果顯示,精子形態(tài)正常率是(OR=0.51,95%CI=0.30,0.79)是影響夫精宮內(nèi)IUI妊娠成功率的影響因素,其中精子正常率≥4%是IUI妊娠成功的保護因素,＜1%是IUI妊娠成功的危害因素。這與以往權(quán)威報道相一致［10］。

綜上所述,精子形態(tài)可作為復發(fā)性流產(chǎn)夫婦夫精宮內(nèi)IUI妊娠成功率的預測指標,同時,為提高妊娠成功率,選取適宜方法手段以改善精子形態(tài)尤為重要,需進一步研究探討。