高效液相色譜法測(cè)定蔬菜中氨基甲酸酯類農(nóng)藥

◎ 衛(wèi) 昊

（鹽城市大豐區(qū)綜合檢驗(yàn)檢測(cè)中心，江蘇 鹽城 224100）

HPLC法具有較高靈敏度和較好重現(xiàn)性，廣泛應(yīng)用于氨基甲酸酯類農(nóng)藥檢測(cè)中[1]。本文在蔬菜中氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留測(cè)定時(shí)，選用HPLC法，靈敏度高、準(zhǔn)確性好。

1 材料與方法

1.1 試樣

蔬菜樣品，隨機(jī)選自于某市場(chǎng)。

1.2 儀器

E 2695型高效液相色譜儀配熒光檢測(cè)器、Waters Symmetry C18（4.6 mm×250 mm，5.0 μm）色譜柱；N-E-VAPTM112型氮吹濃縮儀；12位SPE固相萃取儀；ST 16R型高速離心機(jī)；KQ-250B型超聲波清洗器；CARB/NH2（500 mg/6 mL）固相萃取小柱。

硼砂、氫氧化鈉、巰基乙醇、鄰苯二甲醛（均為分析純）；甲醇、乙腈、丙酮、二氯甲烷（均為色譜純）；濃度均為100 μg/mL的克百威、三羥基克百威、涕滅威砜等氨基甲酸酯。

1.3 儀器條件

選 用 Waters Symmetry C18（4.6 mm×250 mm，5.0 μm）為色譜柱；柱溫42 ℃，進(jìn)樣體積20 μL，發(fā)射波長(zhǎng)465 nm，激發(fā)波長(zhǎng)330 nm。選取水-甲醇為流動(dòng)相，流速為1.0 mL/min。

1.4 配制柱后衍生試劑

衍生試劑1：用水稀釋1.00 g NaOH至500 mL，過(guò)濾、脫氣、備用。

衍生試劑2：用10 mL甲醇溶解0.1 g鄰苯二甲醛，將上述混合物轉(zhuǎn)至水溶液中（內(nèi)涵硼砂19.1 g）。補(bǔ)充溶劑至1.0 L容量，過(guò)濾、脫氣。將25 μL的β-巰基乙醇加入溶液中，輕搖、混合，備用。柱后衍生反應(yīng)器溫度80 ℃，兩種衍生試劑流速0.3 mL/min。

1.5 樣品測(cè)定

將10.0 g蔬菜樣品粉碎放入50 mL離心管中，添加乙腈25 mL、搖勻，持續(xù)20 min超聲萃取、離心分層[2]。40 ℃水浴中將15 mL上清液氮?dú)獯抵两?，加入丙? mL，待凈化。將經(jīng)5 mL丙酮/二氯甲烷（體積比1∶1）淋洗后的固相萃取小柱固定至固相萃取儀上，二氯甲烷液面與小柱吸附層表面相近時(shí)轉(zhuǎn)移樣品液至萃取柱，樣液另選比色管（10 mL）接收，液面接近小柱吸附層表面時(shí)采用10 mL丙酮/二氯甲烷（體積比1∶1）對(duì)小柱分別淋洗3次，氮?dú)獯抵两?，用甲醇定容?.0 mL，以0.22 μm有機(jī)膜過(guò)濾，待測(cè)。

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線及檢出限

配制濃度為0.05、0.50、1.00、2.00 μg/mL和5.00 μg/mL的氨基甲酸酯標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，根據(jù)保留時(shí)間、外標(biāo)峰面積（y）、濃度（x）完成標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制，以3倍信噪比計(jì)算方法檢出限。3種農(nóng)藥質(zhì)量濃度、峰面積在0.05～5.00 μg/mL的濃度范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)0.992～0.998，方法檢出限0.002～ 0.005 mg/kg。

2.2 方法回收率、精密度

不含氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留的10.00 g白菜樣品內(nèi)加入50 μL相應(yīng)濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液，渦旋混勻，完成濃度為0.10、0.50、2.00 μg/mL氨基甲酸酯模擬樣品配制。記錄氨基甲酸酯峰面積值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算濃度，得到方法精密度[3]。經(jīng)預(yù)處理后的模擬樣品，得到的氨基甲酸酯色譜峰面積對(duì)比相應(yīng)濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣色譜峰面積，得到回收率。見(jiàn)表1。

表1 方法回收率及精密度表

2.3 樣品測(cè)定

以上述方法測(cè)定2種市售蔬菜，黃瓜和土豆，見(jiàn)表2。可看出2種市售蔬菜氨基甲酸酯類農(nóng)藥含量均比檢出限小。

表2 實(shí)際樣品測(cè)定結(jié)果表

3 結(jié)論

在蔬菜氨基甲酸酯類農(nóng)藥的測(cè)定中采用HPLC法，加標(biāo)回收率79%～91%，RSD為0.8%～4.9%，方法檢出限0.002～0.005 mg/kg，方法靈敏度高、準(zhǔn)確性好，與農(nóng)藥殘留檢測(cè)要求相適應(yīng)，適用于蔬菜氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留測(cè)定。