細(xì)胞自體體外再生技術(shù)治療穩(wěn)定期白癜風(fēng)患者15例療效觀察

劉 斌 劉中海 梁京峰 陳慧姮 梁曉冬 鄧 婕 葉瑞賢 張錫寶

白癜風(fēng)是一種皮膚科的常見病，病因及發(fā)病機(jī)制有多種學(xué)說，但確切病因不明。白癜風(fēng)的臨床表現(xiàn)主要為后天性色素脫失性白斑，多見于40歲以前的中青年人。皮損好發(fā)于指背、腕、前臂、面、頸、生殖器及周圍，其形態(tài)大小不一。由于白癜風(fēng)的病因尚未明確,因此多數(shù)治療都是缺乏針對病因的對癥治療，盡管治療方法很多，但療效差異大。由于療效的不確定性，致使患者依從性差，疾病負(fù)擔(dān)十分沉重，嚴(yán)重影響患者的情感、情緒及生活質(zhì)量。

細(xì)胞自體體外再生技術(shù)(以下簡稱ReCell?技術(shù))在1992年由澳大利亞皮膚科專家Dr. Fiona Wood首創(chuàng)并用于臨床，其具有無需培養(yǎng)即可獲得自體皮膚細(xì)胞懸浮液的特點(diǎn)，被納入皮膚創(chuàng)傷、燒傷、瘢痕修復(fù)、色素異常等皮膚病變的臨床常規(guī)治療[1,2]。本研究利用ReCell?技術(shù)對15例穩(wěn)定期白癜風(fēng)患者進(jìn)行治療，觀察其臨床療效，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

1.1.1 病例選擇 選取廣州市新世紀(jì)白癜風(fēng)防治研究院診斷明確的穩(wěn)定期白癜風(fēng)患者15例，男8例，女7例，年齡8～46歲，小于14歲兒童患者5例，患者平均年齡23.3歲。發(fā)病時(shí)間1～20年，平均5.5年。發(fā)病部位：面頸部5例，軀干7例，手足背3例。

1.1.2 納入標(biāo)準(zhǔn) ①患者病情符合穩(wěn)定期白癜風(fēng)標(biāo)準(zhǔn)：半年未見新發(fā)皮損，皮損范圍無明顯擴(kuò)大，邊緣清楚；②患者曾接受較長期的外用藥物及系統(tǒng)治療，但效果不顯著；③患者同意選擇該治療手段并于治療前簽署知情同意書。

1.1.3 排除標(biāo)準(zhǔn) ①瘢痕體質(zhì)者；②凝血功能異常者；③患有其他嚴(yán)重系統(tǒng)性疾病者；④妊娠者；⑤低依從性者。

1.2 治療方法

1.2.1 自體表皮細(xì)胞懸液制備 將供皮區(qū)(周圍健康的皮膚、耳后或大腿前方)消毒完畢，應(yīng)用滾軸取皮刀，在供區(qū)刮取厚度為0.15～0.2 mm的刃厚皮片，將取下的刃厚皮片放入ReCell?試劑盒(澳大利亞Avita公司)中的溫控容器內(nèi)，在37℃恒溫下酶解15～20 min后將表皮分解，加適量中和試劑浸泡后，使刃厚皮片形成細(xì)胞懸液。將獲取的懸液緩慢注入過濾器純化，最終獲得可用于治療的表皮細(xì)胞懸液。供皮皮片面積應(yīng)根據(jù)治療所需面積而定，一般為1 cm2供皮區(qū)對應(yīng)20～40 cm2受皮區(qū)治療面積。

1.2.2 手術(shù)操作 常規(guī)消毒后，治療區(qū)域注射0.25%利多卡因局部麻醉藥(含1∶100 000腎上腺素)。應(yīng)用微型動(dòng)力系統(tǒng)(皮膚磨削機(jī))在白癜風(fēng)治療區(qū)域行磨削術(shù)，磨頭轉(zhuǎn)速30 000 r/min。磨削深度至出現(xiàn)點(diǎn)狀出血為止。用生理鹽水將創(chuàng)面沖洗干凈后，蘸干創(chuàng)面，噴灑制備完的細(xì)胞懸液，內(nèi)層應(yīng)用Urgotul敷料(法國URGO medical公司)覆蓋，外層用AlgodermTM敷料(美國Johnson公司)覆蓋，加用紗布繃帶固定。

1.2.3 術(shù)后護(hù)理 術(shù)后在施用細(xì)胞懸液后, 使用非粘附, 非吸收性微孔傷口敷料(如：Telfa、油紗、平紗)作為外層敷料覆蓋傷口，保護(hù)創(chuàng)面促進(jìn)創(chuàng)面的良好修復(fù)。該層敷料的作用除對傷口提供保護(hù)之外還可吸收滲出物，具有適度吸水性, 可隨時(shí)替換。將手術(shù)區(qū)域適度加壓包扎，控制包扎部位的活動(dòng)，保持治療區(qū)域局部清潔干燥。5～7天后打開敷料，裸露治療創(chuàng)面并保持清潔干燥，避免繼發(fā)感染影響療效。在滲出物量大時(shí),外部敷料和加壓繃帶需要更換,但是傷口接觸層敷料需要保持原位5～7天,或根據(jù)臨床指征決定。在更換二級敷料時(shí)務(wù)必小心保護(hù)傷口接觸層敷料。傷口接觸層敷料隨著新表皮的形成會松動(dòng)并有所提升,但不應(yīng)從原粘著處取下。囑患者應(yīng)采取必要的預(yù)防措施, 防止治療區(qū)域傷口未愈合前沾水，5～7天內(nèi)不要破壞傷口接觸層敷料。術(shù)后大部分患者無明顯疼痛及其他不適癥狀，一般無需使用鎮(zhèn)痛藥物，個(gè)別對疼痛敏感的患者可適度使用鎮(zhèn)靜藥物，并作必要的心理輔導(dǎo)。

2 結(jié)果

本組15例患者，術(shù)后5～7 d打開傷口接觸層敷料時(shí)所有創(chuàng)面均已愈合，未出現(xiàn)感染。隨訪6～9個(gè)月(平均7.5個(gè)月)，5例面頸部白癜風(fēng)患者治療區(qū)域均出現(xiàn)不同程度色素恢復(fù)，其中4例治療區(qū)域色素恢復(fù)面積超過90%，1例治療區(qū)域色素恢復(fù)面積超過60%。7例軀干部白癜風(fēng)患者4例治療區(qū)域色素恢復(fù)面積超過90%；2例色素恢復(fù)面積超過60%。1例治療后無明顯改善。3例手足背側(cè)白癜風(fēng)患者，2例治療區(qū)域色素恢復(fù)面積均超過90%(圖1～4)。同時(shí)采用《白癜風(fēng)臨床分型及療效標(biāo)準(zhǔn)》[3]對治療術(shù)后3個(gè)月、6個(gè)月、9個(gè)月進(jìn)行療效評估：痊愈：白斑全部消退，恢復(fù)正常膚色；顯效：白斑部分消退或縮小，恢復(fù)正常膚色的面積≥50%皮損面積；好轉(zhuǎn)：白斑部分消退或縮??；無效：白斑無色素再生或范圍擴(kuò)大。其中，隨訪3個(gè)月，有11例患者皮損色素恢復(fù)為顯效，有效率為73.33%；隨訪6個(gè)月，有12例患者皮損色素恢復(fù)為顯效，有效率為80%；隨訪9個(gè)月，有13例患者皮損色素恢復(fù)為顯效，有效率為86.67%，1例患者治療無效。見表1。

表1 ReCell?術(shù)后患者隨訪結(jié)果 例

圖1 1a：患者1左側(cè)軀干部皮損；1b：術(shù)后3個(gè)月；1c：術(shù)后9個(gè)月，接受治療的大部分區(qū)域色素恢復(fù)面積90%以上

圖2 2a：患者1前胸部皮損；2b：術(shù)后3個(gè)月；2c：術(shù)后6個(gè)月，治療的大部分區(qū)域色素恢復(fù)面積60%以上

圖3 3a：患者1左側(cè)額部皮損；3b：術(shù)后3個(gè)月；3c：術(shù)后9個(gè)月，治療的大部分區(qū)域色素恢復(fù)面積90%以上

圖4 4a：患者1雙手背側(cè)皮損；4b：術(shù)后6個(gè)月，大部分區(qū)域色素恢復(fù)面積90%以上

3 討論

白癜風(fēng)是皮膚科常見病，病因復(fù)雜，治療方法很多，如局部光療，光化學(xué)療法(長波紫外線，PUVA，窄譜中波紫外線，準(zhǔn)分子激光等)，外用糖皮質(zhì)激素及中藥制劑，火針、梅花針等中醫(yī)理療，各種方法的適應(yīng)證、有效性和不良反應(yīng)存在很大的個(gè)體差異[4-6]。常用的系統(tǒng)性及外用糖皮質(zhì)激素，光療等相關(guān)方法的有效率報(bào)道各不相同，不能保證所有患者均取得滿意療效[5]。且長期使用的不良反應(yīng)嚴(yán)重阻礙了醫(yī)患雙方的治療信心；近年使用的準(zhǔn)分子光療及光化學(xué)療法雖然在一定程度提高了治愈率，但患者治療的耗時(shí)及醫(yī)療費(fèi)用明顯增加了患者的疾病負(fù)擔(dān)。從耗時(shí)及患者的綜合疾病負(fù)擔(dān)考慮，對治療愿望迫切，美容效果要求高的患者，ReCell?技術(shù)是一種較為理想的選擇[7-9]。本研究納入治療的15例患者，在治療后9個(gè)月的隨訪終點(diǎn)，皮損色素恢復(fù)達(dá)到顯效的13例(86.67%)，無效1例。ReCell?技術(shù)用于治療穩(wěn)定期白癜風(fēng)具有以下優(yōu)點(diǎn)：操作簡單，臨床醫(yī)師在手術(shù)室內(nèi)即可完成所有操作，不需細(xì)胞培養(yǎng)，僅需半小時(shí)左右即可；黑素細(xì)胞為原代細(xì)胞，其功能較傳代細(xì)胞更為理想。在白癜風(fēng)的治療領(lǐng)域，Mulekar等[9]對比了MKT技術(shù)和ReCell?技術(shù)的療效，發(fā)現(xiàn)二者并無差異。Cervelli等[10]專門研究了ReCell?技術(shù)用于較為難治的手部白癜風(fēng)患者的治療取得了比其他方法更好的療效。綜合已有的報(bào)道及本文研究顯示的臨床效果，證實(shí)ReCell?技術(shù)在選擇適當(dāng)適應(yīng)癥，對于穩(wěn)定期白癜風(fēng)患者是一種更為有效的治療技術(shù)。

4 小結(jié)

本研究對15例患者的治療結(jié)果顯示細(xì)胞自體體外再生(ReCell?)技術(shù)治療白癜風(fēng)可獲得較為理想的臨床療效，且操作簡單，所有患者術(shù)后隨訪未見出現(xiàn)感染與疤痕。因此該技術(shù)用于臨床治療穩(wěn)定期白癜風(fēng)是安全有效的。對治愈期望值高，有急切地美容需求，希望短期見效的患者尤其適用。