國產(chǎn)和進(jìn)口ELISA試劑HIV初篩結(jié)果與確證結(jié)果對比分析

李敏，韓曉燕，朱建民

(渭南市中心血站，陜西 渭南714000)

近年來HIV感染人數(shù)呈逐年上升趨勢，艾滋病的傳播已由高危人群向一般人群擴(kuò)散[1]，WHO研究結(jié)果表明全球約有十分之一的HIV感染者由血液傳播感染[2]。HIV感染已是一個(gè)全球性的公共問題和社會問題。目前隨著我國對艾滋病宣傳力度的不斷加大，越來越多的人群對艾滋病的傳播途徑及高危行為等更為了解，部分有高危行為者想利用無償獻(xiàn)血這一方式來確認(rèn)是否感染上HIV[3]，因此減少HIV輸血傳播是控制HIV擴(kuò)散的重要途徑之一。本研究通過對渭南市138253例無償獻(xiàn)血者的HIV抗原、抗體國產(chǎn)和進(jìn)口兩種試劑的初篩結(jié)果進(jìn)行分析，闡明國產(chǎn)和進(jìn)口試劑與確證結(jié)果之間的關(guān)系，為核酸開展后ELISA方法檢測HIV該采取何種策略以便最大程度的保證臨床用血安全提供有力的證據(jù)，現(xiàn)將檢測結(jié)果報(bào)告如下：

1 材料與方法

1．1 材料來源 2013年1月至2016年12月渭南市無償獻(xiàn)血者138253例，年齡18～55周歲，健康情況均符合《獻(xiàn)血者健康檢查要求》GB/18467。

1．2 儀器與試劑

1．2．1 檢測試劑 國產(chǎn)試劑生產(chǎn)廠家為北京萬泰，進(jìn)口試劑生產(chǎn)廠家為美國伯樂，兩者均為第四代人類免疫缺陷病毒抗體診斷試劑盒。

1．2．2 室內(nèi)質(zhì)控 國產(chǎn)和進(jìn)口試劑采用的質(zhì)控品濃度分別為：0．5NCU/ml和4NCU/ml所用質(zhì)控品均來自康徹斯坦。

1．2．3 儀器 TECAN EVO/150全自動加樣儀（瑞士帝肯公司），F(xiàn)AME24/20全自動酶免分析儀 （瑞士哈美頓公司）。

1．3 檢測方法 采用ELISA方法對無償獻(xiàn)血者血液標(biāo)本由不同人員用國產(chǎn)和進(jìn)口2種試劑進(jìn)行抗－HIV檢測，并嚴(yán)格按照試劑盒說明書和標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程文件實(shí)行，所用試劑及質(zhì)控品均為中國食品藥品生物鑒定所批批檢合格，并在有效期內(nèi)使用。單試劑有反應(yīng)性標(biāo)本用原試劑做雙孔復(fù)查；復(fù)查結(jié)果至少一孔有反應(yīng)性和雙試劑有反應(yīng)性標(biāo)本均判讀為抗－HIV初篩有反應(yīng)性，并送渭南市疾控中心（CDC）進(jìn)行確認(rèn)。

1．4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 19．0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計(jì)數(shù)資料采用 χ2檢驗(yàn)，P＜0．05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2．1 國產(chǎn)和進(jìn)口試劑HIV初篩結(jié)果及確證情況。國產(chǎn)試劑與進(jìn)口試劑的確證陽性率比較差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義：χ2=3．54，P＞0．05。

2．2 HIV初篩雙試劑有反應(yīng)性標(biāo)本的確證情況。

2．3 42例CDC確證陽性標(biāo)本的2種試劑檢測結(jié)果分布。

2．4 100例初篩有反應(yīng)性標(biāo)本S/CO值分布及確證情況。

3 討論

由表1可知，國產(chǎn)和進(jìn)口試劑的抗－HIV初篩有反應(yīng)性率分別為0．056%和0．044%，差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=2．11，P＞0．05），國產(chǎn)和進(jìn)口試劑抗－HIV初篩有反應(yīng)性標(biāo)本的確證陽性率分別為0．028%和0．029%，即兩種試劑的假陽性率分別為0．027%和 0．014%，差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=3．54，P＞0．05。 ），這和何江才[4]、李菳玲[5]、蔣麗娟[6]等人的結(jié)果分析一致。隨著國產(chǎn)試劑制備水平的提高，從靈敏度和特異性等方面比較，國產(chǎn)第四代HIV試劑與進(jìn)口試劑具有較高的一致性[7]，有些甚至超過進(jìn)口試劑[8]。雖然目前國產(chǎn)和進(jìn)口HIV檢測試劑都是提高了敏感度和特異性的第四代試劑，但依然存在著較高的假陽性，分析原因可能有：（一）：EDTA－K2抗凝劑的濃度對血液標(biāo)本抗－HIV檢測有影響[9]，可引起假陽性結(jié)果；（二）ELISA檢測的影響因素比較多，人體中的一些RF因子，補(bǔ)體等，都有可能會產(chǎn)生假陽性；（三）初篩試劑采用的是ELISA方法，而確證實(shí)驗(yàn)采用的是WB法，其檢測原理不同，結(jié)果存在差異。

表2中，37例國產(chǎn)和進(jìn)口雙試劑抗－HIV有反應(yīng)性標(biāo)本的確證結(jié)果均為陽性，雙試劑有反應(yīng)性的確證陽性率為100%，說明2種試劑聯(lián)合檢測可提高初篩與確證結(jié)果的符合率，有助于提高對HIV感染判斷的準(zhǔn)確度。

表3的數(shù)據(jù)顯示，國產(chǎn)和進(jìn)口試劑均存在不同程度的漏檢，所以雙試劑檢測可以一定程度的減少血清學(xué)方法的漏檢情況。

表1 國產(chǎn)和進(jìn)口試劑HIV初篩及確證結(jié)果

表2 37例雙試劑有反應(yīng)性標(biāo)本的確證結(jié)果

表3 42例確證陽性標(biāo)本的HIV兩種試劑檢測結(jié)果分布

表4 100例初篩有反應(yīng)性標(biāo)本S/CO值及確證結(jié)果

表4不同的S/CO分組中，國產(chǎn)試劑有反應(yīng)性標(biāo)本的陽性確證率之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （χ2=64．28，P＜0．01），進(jìn)口試劑有反應(yīng)性標(biāo)本的陽性確證率之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=39．59，P＜0．01），說明 S/CO值越高，預(yù)示著HIV抗體確認(rèn)陽性的可能性較大。這與周普輝[10]，楊育紅[11]，李向國[12]等人的結(jié)果分析相似。在1≤S/CO＜2組中，國產(chǎn)試劑的陽性確證率為零，說明在該分組中國產(chǎn)試劑有較高的假陽性率，可能原因?yàn)閲a(chǎn)試劑為了減少漏檢，提高該試劑的靈敏度，產(chǎn)生較高的假陽性；S/CO≥10分組中國產(chǎn)和進(jìn)口試劑有反應(yīng)性標(biāo)本經(jīng)確證均為陽性，說明在S/CO≥10時(shí)國產(chǎn)和進(jìn)口試劑的陽性符合率相同。

本站自2015年底實(shí)現(xiàn)核酸檢測全覆蓋，雖然核酸檢測有縮短窗口期的特點(diǎn)，但是抗原抗體具備在外周血中持續(xù)存在時(shí)間較長的特點(diǎn)，ELISA對變異及亞型的檢出概率與NAT對突變及基因型在檢測概率上相互補(bǔ)充，ELISA檢測對確保用血安全仍有相當(dāng)重要的意義[13]，所以說在新型檢測技術(shù)普及的同時(shí)，仍需高度重視ELISA檢測?；诒狙芯恐袊a(chǎn)和進(jìn)口試劑的特異性和靈敏度沒有顯著性差異，且雙試劑檢測可提高確證陽性的符合率這一情況，筆者認(rèn)為若是采用兩遍ELISA檢測一遍核酸檢測的模式，可考慮用靈敏度和特異性均較好或有互補(bǔ)性的兩種不同生產(chǎn)廠家的國產(chǎn)試劑，這樣既可以節(jié)約成本，又可以防止漏檢。

目前ELISA檢測不能避免的假陽性情況，筆者認(rèn)為可以建立相應(yīng)策略：⑴加強(qiáng)獻(xiàn)血前咨詢和篩查工作，提高工作人員排查高危獻(xiàn)血者的能力[14]；⑵充分利用室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)評的監(jiān)督作用，根據(jù)它們的檢測情況及時(shí)優(yōu)化實(shí)驗(yàn)流程，做好關(guān)鍵控制點(diǎn)的監(jiān)測工作；⑶加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室人員責(zé)任心的同時(shí)，可選用靈敏度與特異性指標(biāo)均較好的ELISA試劑來篩查HIV抗體，在盡可能檢出所有陽性標(biāo)本的同時(shí)也要盡量減少因假陽性而導(dǎo)致的血源流失[15]?？傊械呐鶠橐粋€(gè)目標(biāo)－避免HIV感染者“窗口期”漏檢，降低輸血傳播HIV的殘余風(fēng)險(xiǎn)，最大程度的保證臨床用血安全。