陳年六堡茶對(duì)高脂血癥小鼠的調(diào)脂護(hù)肝作用研究

吳文亮，劉仲華，林勇，黃建安，左高隆，滕翠琴，龍志榮，邱瑞瑾，曹中環(huán)

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陳年六堡茶對(duì)高脂血癥小鼠的調(diào)脂護(hù)肝作用研究

吳文亮1,2,3,4，劉仲華1,2,3*，林勇1,2,3*，黃建安1,2,3，左高隆1,2，滕翠琴5，龍志榮6，邱瑞瑾5，曹中環(huán)5

1. 湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)茶學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖南 長(zhǎng)沙 410128；2. 國(guó)家植物功能成分利用工程技術(shù)研究中心，湖南 長(zhǎng)沙 410128；3. 植物功能成分利用協(xié)同創(chuàng)新中心，湖南 長(zhǎng)沙 410128；4. 湖南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院茶葉研究所，湖南 長(zhǎng)沙 410125；5. 梧州市六堡茶研究院，廣西 梧州 543003；6. 梧州市茶產(chǎn)業(yè)發(fā)展辦公室，廣西 梧州 543003

為了探討陳年六堡茶的調(diào)脂保肝功效，比較分析了不同年代六堡茶的主要化學(xué)物質(zhì)的差異，再以高脂高糖飲食建立高脂血癥小鼠模型，并用選定的陳年六堡茶水提物灌胃小鼠，觀察小鼠相關(guān)生理生化指標(biāo)及組織形態(tài)的變化。結(jié)果表明，陳化15年茶樣被選為陳年六堡茶的代表，用于后續(xù)試驗(yàn)。與模型組相比，陳年六堡茶尤其中高劑量條件下能有效減輕高脂血癥小鼠體重、肝重和降低肝系數(shù)，顯著提高高密度脂蛋白-膽固醇（HDL-C）含量，降低血清中總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）和低密度脂蛋白-膽固醇（LDL-C）含量，降低谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）和谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）活力，改善大鼠肝臟氧化應(yīng)激狀態(tài)，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（<0.05或<0.01）。肝臟和脂肪組織病理切片顯示，陳年六堡茶能明顯減少肝細(xì)胞中脂滴的形成和抑制脂肪細(xì)胞膨大，呈劑量依賴關(guān)系。綜上表明，陳年六堡茶在正常劑量條件下能有效改善因高脂高糖飲食所致的小鼠脂質(zhì)代謝紊亂和肝臟損傷。

陳年六堡茶；高脂血癥；脂質(zhì)代謝；肝損傷；改善作用

六堡茶屬黑茶類，是廣西具有地理標(biāo)志及濃郁地方特色的名優(yōu)農(nóng)產(chǎn)品[1-2]，原產(chǎn)于廣西梧州市蒼梧縣六堡鎮(zhèn)，生產(chǎn)歷史悠久，風(fēng)味獨(dú)特，是廣西傳統(tǒng)的出口產(chǎn)品[3-4]。近年來(lái)，隨著黑茶的熱銷，六堡茶因“紅、濃、陳、醇”的獨(dú)特品質(zhì)特征深受消費(fèi)者青睞[5]，品牌價(jià)值不斷提升，目前年產(chǎn)量已超1.2萬(wàn)t，產(chǎn)值達(dá)12.8億元以上。

隨著當(dāng)前百姓生活水平提高，高脂高糖飲食增加，是造成近年來(lái)機(jī)體脂質(zhì)代謝紊亂、非酒精性脂肪肝及肥胖等代謝綜合征高發(fā)的主要原因[6]。國(guó)內(nèi)外大量研究[7-10]表明，茶及其內(nèi)含成分具有調(diào)脂保肝作用，其中綠茶和紅茶相關(guān)報(bào)道最多。素有“越陳越好”的黑茶主要以普洱茶和茯磚茶相關(guān)研究較多[11-13]。近年來(lái)隨著六堡茶品牌價(jià)值的提升，也有了六堡茶調(diào)脂保肝相關(guān)功效研究的報(bào)道[14-16]，但是選用的都是年代較新的茶樣。雖然六堡茶如同其他黑茶（普洱茶、茯磚茶等）一樣都有“越陳越好”的說(shuō)法，但是隨著陳化時(shí)間的增加，它們的主要化學(xué)物質(zhì)含量下降[17-20]。劉澤森等[20]指出六堡茶隨陳化年份的延長(zhǎng)其水浸出物、茶多酚、氨基酸、茶黃素及茶紅素等物質(zhì)呈逐漸下降的趨勢(shì)。目前，已有的文獻(xiàn)對(duì)“越陳越好”的解釋還只是基于感官審評(píng)的綜合評(píng)分上，如“越陳越香”或/和“越陳越醇”[20-21]。考慮到功效由化學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)決定，陳年六堡茶在降脂保肝方面到底有沒(méi)有效果一直沒(méi)有明確的數(shù)據(jù)支持。鑒于此，本研究選取了陳化時(shí)間較長(zhǎng)，并且具代表性的六堡茶樣作為試驗(yàn)材料，基于高脂血癥小鼠模型全面評(píng)估陳年六堡茶的調(diào)脂護(hù)肝作用，以期為陳年六堡茶甚至陳年黑茶的品質(zhì)和功效的研究提供試驗(yàn)依據(jù)，為健康飲茶及六堡茶產(chǎn)業(yè)發(fā)展提供科技支撐。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 茶葉樣品

六堡茶均為廣西壯族自治區(qū)梧州茶廠提供的同一級(jí)別散茶，分別陳化1、5、10、15年，每個(gè)年代茶樣取3個(gè)重復(fù)。

1.1.2 試驗(yàn)動(dòng)物

SPF級(jí)雄性昆明種（KM）小鼠，體質(zhì)量20?g左右，購(gòu)自湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司，生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK(湘)2016-0002。

1.1.3 飼料配方

高脂高糖飼料：參照《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范-輔助降血脂功能評(píng)價(jià)方法》（2012年修訂），配方為基礎(chǔ)飼料63.6%、蔗糖20.0%、豬油15.0%、膽固醇1.2%、膽酸鈉0.2%。

1.2 儀器與試劑

試劑：總膽固醇（Total cholesterol，TC）、甘油三酯（Triglyceride，TG）、低密度脂蛋白膽固醇（Low density lipoprotein cholesterol，LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（High density lipoprotein cholesterol，HDL-C）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（Alanine aminotransferase，ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（Aspartate transaminase，AST）以上試劑購(gòu)自上?？迫A生物工程股份有限公司；谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（Glutathione peroxidase，GSH-Px）、丙二醛（Malondialdehyde，MDA）、超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase，SOD）試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所；血脂康膠囊購(gòu)自北京北大維信生物科技有限公司。

儀器：MIKRO 22R冷凍離心機(jī)（德國(guó)Hettich公司）、TBA-40FR全自動(dòng)生化分析儀（日本東芝公司）、Modulyod-230冷凍干燥機(jī)（美國(guó)Thermo公司）、DM2000生物顯微鏡（德國(guó)Leica公司）、Thermo Scientific Varioskan Flash酶標(biāo)儀（美國(guó)Thermo公司）、UV-2550紫外分光光度計(jì)（日本Shimadzu公司），AEU-210湘儀電子天平（長(zhǎng)沙湘儀天平儀器公司）、F6/10超細(xì)勻漿機(jī)（德國(guó)FLUKO公司）、解剖器械等。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 茶樣干粉制備

取適量六堡茶樣品，按料液比1∶10，浸提3次（沸水），每次浸提時(shí)間為20?min，紗布過(guò)濾，合并浸提液，減壓濃縮至一定體積，于–20℃預(yù)凍12?h，放入冷凍干燥機(jī)干燥24?h，收集茶粉，密封包裝，–20℃保存。

1.3.2 主要成分指標(biāo)測(cè)定

茶葉中主要成分指標(biāo)測(cè)定參照GB/T 8313—2008《茶葉中茶多酚和兒茶素類含量的檢測(cè)方法》、GB/T 8302—2002《茶水浸出物測(cè)定》、GB/T 8314—2002《茶游離氨基酸總量測(cè)定》、GB/T 8312—2002《茶咖啡堿測(cè)定》；可溶性糖測(cè)定參照文獻(xiàn)[4-5,9]：蒽酮比色法；茶色素的測(cè)定參照文獻(xiàn)[22]：系統(tǒng)分析法。

1.3.3 動(dòng)物模型構(gòu)建及分組給藥

參考已有研究建立本試驗(yàn)動(dòng)物模型及分組給藥[8, 12, 23]。KM小鼠經(jīng)適應(yīng)性喂養(yǎng)7?d后，對(duì)體質(zhì)量偏差較大的小鼠進(jìn)行初步剔除后的60只小鼠隨機(jī)分為6組，每組10只，即模型組、正常組、陽(yáng)性組及六堡茶的低、中、高劑量干預(yù)組。正常組給予基礎(chǔ)飼料，其他組給予高脂高糖飼料。采用脂代謝紊亂預(yù)防模型，同時(shí)給藥與喂食，六堡茶的低、中、高劑量處理組每日分別給予灌胃158、316、632?mg·kg-1茶葉水提物。劑量選擇[9, 24-25]：選擇茶葉人體推薦量（成人60?kg每日飲用10?g干茶，即166.7?mg·kg-1）的5、10、20倍為給六堡茶的低、中、高劑量濃度。因此，每只小鼠每日給予茶粉（茶葉水提物凍成干粉）劑量（mg·kg-1）=166.7×倍數(shù)×浸提率。陽(yáng)性藥物組給予每日灌胃137?mg·kg-1血脂康，陽(yáng)性藥成人（60?kg）每日推薦劑量為15?mg·kg-1，換算為小鼠的劑量（小鼠等效劑量相當(dāng)于人的9.1倍），即為137?mg·kg-1。正常對(duì)照組和模型對(duì)照組均給予灌胃等量蒸餾水。每只小鼠按0.01?mL·g-1的容量灌胃，每天灌胃1次，連續(xù)35?d，每周稱體質(zhì)量1次。

1.3.4 樣品的采集及制備[9,12,26]

（1）血清的制備：最后一次給藥后禁食不禁水24?h，麻醉后摘眼球取血，放入離心管中，4℃下靜置一段時(shí)間后，在4℃下3?000?r·min-1離心15?min，離心后取血清待測(cè)各項(xiàng)指標(biāo)。

（2）肝組織勻漿制備：取出肝組織，在冷的生理鹽水中漂洗，除去血液，用濾紙拭干后稱量。稱取約0.2?g肝組織加生理鹽水，用細(xì)胞破碎儀制備10%肝勻漿液。4℃下3?000?r·min-1離心10?min，離心好后用移液器取上清液。分裝貯存于–80℃冰箱備用。

（3）小鼠肝臟和脂肪組織病理切片制備：分別取小鼠同一部位肝臟組織和睪丸周圍脂肪組織，于10%福爾馬林液固定，固定后經(jīng)流水沖洗數(shù)小時(shí)。制備石蠟切片，HE染色，顯微鏡下拍照觀察。

1.3.5 血清與肝勻漿液中指標(biāo)檢測(cè)

血清TC、TG、HDL-C、LDL-C、ALT及AST均采用全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)，肝勻漿中MDA、SOD及GSH-Px含量根據(jù)試劑盒要求進(jìn)行檢測(cè)。

1.3.6數(shù)據(jù)處理與分析

2 結(jié)果與分析

2.1 不同陳化年份茶樣的主要化學(xué)成分測(cè)定結(jié)果

本試驗(yàn)選取了4個(gè)陳化年份（1、5、10、15年）的六堡茶樣品進(jìn)行主要化學(xué)成分分析，結(jié)果如表1所示，4個(gè)不同年份的六堡茶主要化學(xué)成分，隨著陳化年份的推移，其水浸出物、茶多酚、游離氨基酸、茶黃素（TFs）、茶紅素（TRs）和可溶性糖含量呈現(xiàn)減少趨勢(shì)；咖啡堿和茶褐素（TBs）的含量呈現(xiàn)先上升后下降趨勢(shì)，5年份茶樣的咖啡堿和茶褐素含量最高。與陳化1年茶樣相比，5年份茶樣只有茶褐素的含量變化達(dá)到顯著水平（<0.05）；10年份茶樣只有茶多酚、茶紅素和茶褐素的含量變化達(dá)到顯著水平（<0.05）；而15年份茶樣測(cè)定的所有化學(xué)成分含量都急劇下降，除茶褐素外其他成分都達(dá)到顯著水平（<0.05 或<0.01）。此外，六堡茶隨著陳化時(shí)間的增加，(TFs+TRs)/TBs比值呈現(xiàn)不斷減小的趨勢(shì)，表明在陳化過(guò)程中TRs和TFs會(huì)大量的轉(zhuǎn)化為TBs。根據(jù)已有研究指出黑茶調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝的物質(zhì)基礎(chǔ)主要是茶多酚、茶褐素、茶多糖等[27]，同時(shí)鑒于陳化15年的六堡茶樣與年代較近的茶樣在內(nèi)含物質(zhì)成分（調(diào)脂功效的主要物質(zhì)）含量上的顯著差異，為了驗(yàn)證其是否仍然有很好的調(diào)脂護(hù)肝功效，故15年茶樣被選作陳年六堡茶代表用于后續(xù)試驗(yàn)。

2.2 陳年六堡茶對(duì)小鼠體重與肝臟指數(shù)的影響

結(jié)果如表2所示，高脂模型組的終體質(zhì)量、肝質(zhì)量以及肝系數(shù)值都極顯著（<0.01）高于正常組小鼠。然而，六堡茶水提物各劑量組的小鼠終體質(zhì)量、肝質(zhì)量及肝系數(shù)值全面降低且呈劑量依賴關(guān)系，尤其高劑量組所有指標(biāo)變化均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（<0.05或<0.01），說(shuō)明陳年六堡茶水提物能有效控制小鼠體重、肝重增加以及肝系數(shù)的增大。

Table 1 Contents of main chemical compositions in Liupao tea of different storage ages

注：與1年茶樣比較：*<0.05，**<0.01。Note: Compare to tea sample produced for one year: *<0.05, **<0.01.

表2 陳年六堡茶對(duì)小鼠體重、肝重及肝臟指數(shù)的影響（，n=10）

注：與正常組比較：#<0.05，##<0.01；與模型組比較：*<0.05，**<0.01。下表相同。

Note: Compare to normal control:#<0.05,##<0.01. Compare to model control: *<0.05, **<0.01. The same below.

2.3 陳年六堡茶對(duì)小鼠血脂的影響

陳年六堡茶對(duì)小鼠血清血脂水平的影響見(jiàn)表3所示。模型對(duì)照組小鼠TG、TC、LDL-C含量極顯著（<0.01）高于正常對(duì)照組，而HDL-C含量極顯著下降（<0.01），表明本試驗(yàn)采用的高脂高糖飲食方法使小鼠呈現(xiàn)了高脂血癥狀。而與模型組相比，給予低劑量陳年六堡茶對(duì)小鼠血清TG、TC、LDL-C和HDL-C水平有改善作用，但沒(méi)達(dá)到顯著水平（>0.05）；給予中劑量陳年六堡茶小鼠血清TG和LDL-C水平顯著降低（<0.05）；而高劑量組小鼠血清中TG、TC、LDL-C和HDL-C含量均達(dá)到顯著差異（<0.05）且LDL-C和HDL-C含量接近正常組水平。這些結(jié)果表明陳年六堡茶尤其高劑量條件能有效調(diào)節(jié)小鼠的脂質(zhì)代謝平衡。

2.4 陳年六堡茶對(duì)小鼠血清肝功能指標(biāo)的影響

谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）和丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（ALT）是肝功能的主要指標(biāo)，檢測(cè)AST、ALT的活性來(lái)反映肝組織實(shí)質(zhì)受損程度。結(jié)果見(jiàn)表4，與正常對(duì)照組相比，模型對(duì)照組小鼠血清ALT、AST活力均極顯著升高（<0.01）。與模型對(duì)照組相比，給予陳年六堡茶水提物后，低、中、高3個(gè)劑量組的小鼠血清ALT和AST活性均有下降且呈劑量依賴關(guān)系，尤其中劑量條件下AST活性變化達(dá)到顯著水平（<0.05），高劑量條件下ALT和AST活性均顯著下降（<0.05或<0.01）。由此可推斷，陳年六堡茶能改善高脂血癥模型小鼠的肝功能，可減輕肝臟組織受損程度。

表3 陳年六堡茶對(duì)小鼠血脂水平的影響（, n=10）

表4 陳年六堡茶對(duì)小鼠血清中ALT和AST活力的影響（, n=10）

2.5 陳年六堡茶對(duì)小鼠肝勻漿抗氧化指標(biāo)的影響

結(jié)果顯示（表5），與正常對(duì)照組相比，高脂模型組肝勻漿中MDA的含量極顯著升高（<0.01），SOD和GSH-Px活力極顯著下降（<0.01），表明高脂高糖飲食使小鼠肝臟處于較強(qiáng)的氧化應(yīng)激狀態(tài)。與模型對(duì)照組相比，給予陳年六堡茶水提物后，低、中、高3個(gè)劑量組的小鼠肝勻漿MDA、SOD和GSH-Px含量均有改善且呈劑量依賴關(guān)系，尤其中劑量條件下MDA含量顯著下降和SOD活性顯著上升（<0.05），高劑量條件下MDA含量顯著下降和SOD、GSH-Px活性顯著上升（<0.05或<0.01）。這些結(jié)果表明陳年六堡茶可以通過(guò)提高肝細(xì)胞中SOD、GSH-Px活力改善肝臟氧化應(yīng)激狀態(tài)和抵抗機(jī)體脂質(zhì)過(guò)氧化。

表5 陳年六堡茶對(duì)小鼠肝臟抗氧化指標(biāo)的影響（, n=10）

2.6 陳年六堡茶對(duì)小鼠肝組織形態(tài)的影響

圖1可以看出，正常對(duì)照組小鼠肝臟質(zhì)韌，色澤均勻，顏色暗紅；模型對(duì)照組小鼠肝臟體積明顯增大，質(zhì)脆，呈土黃色；而陳年六堡茶各劑量組尤其高劑量組較模型組小鼠肝臟體積有所減小，質(zhì)韌，色澤略偏紅。HE染色顯示（圖2），正常對(duì)照組小鼠肝竇結(jié)構(gòu)清晰，肝細(xì)胞大小較一致，肝細(xì)胞索排列整齊，細(xì)胞核清晰、胞漿均勻。高脂模型組肝組織結(jié)構(gòu)異常，肝細(xì)胞索排列紊亂，肝竇縮小甚至消失，肝細(xì)胞變大有明顯的脂滴蓄積并伴有腫脹現(xiàn)象，細(xì)胞核位于細(xì)胞中央，胞漿呈空泡狀。與模型對(duì)照組相比，灌胃低、中、高3個(gè)劑量陳年六堡茶后，試驗(yàn)小鼠肝細(xì)胞損傷程度有不同程度的改善且呈劑量依賴趨勢(shì)，特別是中、高劑量組小鼠肝細(xì)胞索排列較整齊，細(xì)胞間界限較清晰，炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)減輕，肝細(xì)胞變性及腫脹程度降低，脂滴蓄積明顯減少甚至消失，已基本接近陽(yáng)性對(duì)照組水平（圖2）。這些結(jié)果進(jìn)一步表明陳年六堡茶能明顯抑制高脂飲食引起的肝臟病變的作用，有效減少小鼠肝臟的脂肪堆積及減輕肝損傷情況。

2.7 陳年六堡茶對(duì)小鼠脂肪組織形態(tài)的影響

如圖3所示，與正常對(duì)照組相比，模型對(duì)照組小鼠脂肪細(xì)胞形態(tài)不規(guī)則，細(xì)胞明顯膨大，脂肪細(xì)胞內(nèi)充滿脂滴。與模型對(duì)照組相比，通過(guò)灌胃給予陳年六堡茶水提物后，低、中、高3個(gè)劑量組的小鼠細(xì)胞直徑均有所減小，同一視野范圍內(nèi)脂肪細(xì)胞數(shù)量增加，且隨著灌胃劑量的增大，改善效果越明顯，特別是受試茶樣高劑量組小鼠脂肪細(xì)胞大小基本接近于陽(yáng)性對(duì)照組甚至正常對(duì)照組水平。這些結(jié)果提示陳年六堡茶能抑制脂肪細(xì)胞膨大和減少脂肪細(xì)胞內(nèi)脂肪的累積。

3 討論

已有研究[20]指出：六堡茶在陳化過(guò)程中（1~7年），隨陳化年份的推移其茶多酚、氨基酸、水浸出物、茶黃素（TFs）及茶紅素（TRs）等物質(zhì)呈逐漸下降的趨勢(shì)；茶褐素（TBs）隨著陳化年份的遞增得到積累，呈上升趨勢(shì)；咖啡堿在陳化過(guò)程中呈波動(dòng)性變化，總體變化不大。本研究中，我們選取了陳化時(shí)間跨度更大的幾個(gè)茶樣（1、5、10、15年），試驗(yàn)結(jié)果與上述結(jié)果基本保持一致；但是TBs的含量呈現(xiàn)先上升后下降趨勢(shì)，陳化5年的茶樣TBs含量最高，15年最低。這些結(jié)果表明六堡茶在后發(fā)酵的陳化過(guò)程中，TFs、TRs的量在前期一段陳化時(shí)間內(nèi)茶色素變化總趨勢(shì)下降，而TBs的量得到了積累；當(dāng)后發(fā)酵的陳化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)后TBs也會(huì)發(fā)生進(jìn)一步轉(zhuǎn)化或分解，如生成一些不溶性物質(zhì)[28]，導(dǎo)致TBs含量明顯下降。同時(shí)，我們也發(fā)現(xiàn)了(TFs+TRs)/TBs隨著陳化時(shí)間的增加呈現(xiàn)不斷減小的趨勢(shì)，表明在陳化過(guò)程中TRs和TFs會(huì)大量的轉(zhuǎn)化為TBs，這也與普洱茶在陳化過(guò)程中的變化趨勢(shì)基本一致[17,29]，這個(gè)指標(biāo)可能可用作評(píng)判六堡茶陳化時(shí)間長(zhǎng)短的一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)。

圖1 小鼠肝臟照片

圖2 小鼠肝臟組織病理形態(tài)變化（200×）

圖3 小鼠脂肪組織病理形態(tài)變化（200×）

六堡茶作為黑茶家族中的一員，降脂減肥保肝作用同樣是其最重要的一類功能；已有文獻(xiàn)[14-16]表明了其在調(diào)脂保肝方面的作用，但是一般采用的都是年代比較新的茶樣；而六堡茶隨著陳化時(shí)間的增加，特別是長(zhǎng)時(shí)間陳化，其目前已知主要內(nèi)含物質(zhì)成分都在減少。為探討有“越陳越好”品質(zhì)的六堡茶是否還具有調(diào)脂保肝效果，本研究通過(guò)對(duì)4個(gè)陳化時(shí)間（1、5、10、15年）的茶樣的主要化學(xué)成分含量比較分析，選取了與年代較新的茶樣在內(nèi)含物質(zhì)成分含量上有顯著變化的15年茶樣作為陳年六堡茶的代表，用于后續(xù)動(dòng)物試驗(yàn)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，陳年六堡茶能夠改善高脂血癥小鼠的生理生化指標(biāo)，尤其在中、高劑量條件下也就是小鼠對(duì)應(yīng)人體推薦劑量的等效劑量和2倍等效劑量條件下能達(dá)到顯著水平（<0.05）。肝臟和脂肪組織病理切片顯示，陳年六堡茶能減少肝細(xì)胞中脂滴的形成和抑制脂肪細(xì)胞膨大及脂肪的累積，呈劑量依賴關(guān)系。由于脂肪細(xì)胞大小以及脂肪組織累積的程度表現(xiàn)出與體重獲得正相關(guān)，從而陳年六堡茶的攝入也表現(xiàn)出有效地控制試驗(yàn)小鼠的終體質(zhì)量。綜上表明，陳年六堡茶在正常劑量條件下能有效改善因高脂高糖飲食所致的小鼠脂質(zhì)代謝紊亂和肝臟損傷。

陳智雄等[27]認(rèn)為，年份黑茶的調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝物質(zhì)基礎(chǔ)主要是茶多酚、茶褐素、茶多糖等物質(zhì)以及微生物的代謝產(chǎn)物。已有研究指出，普洱茶中的微生物如土曲霉（）等可產(chǎn)生有降血脂作用的洛伐他汀[30]，茯磚茶的優(yōu)勢(shì)菌種冠突散囊菌（）中也含有洛伐他汀[31]，六堡茶優(yōu)勢(shì)真菌種群是曲霉菌屬（）和散囊菌屬（）[32]，但目前六堡茶微生物代謝產(chǎn)物降血脂方面的研究還未見(jiàn)報(bào)道。根據(jù)普洱茶中的土曲霉和茯磚茶的冠突散囊菌分別是曲霉菌屬和散囊菌屬的一種，六堡茶那些微生物的代謝產(chǎn)物也可能有降脂的作用成分，也就是說(shuō)陳年六堡茶的兒茶素、茶褐素、茶多糖等物質(zhì)以及微生物的代謝產(chǎn)物，甚至還有目前未知的陳化分解的新化合物一起構(gòu)成了調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝物質(zhì)基礎(chǔ)。

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Alleviative Effects of Aged Liupao Tea on Lipid Metabolism and Liver Injury in Hyperlipidemic Mice

WU Wenliang1,2,3,4, LIU Zhonghua1,2,3*, LIN Yong1,2,3*, HUANG Jian′an1,2,3, ZUO Gaolong1,2, TENG Cuiqin5, LONG Zhirong6, QIU Ruijin5, CAO Zhonghuan5

1. Key Lab of Tea Science of Education Ministry, Hunan Agricultural University, Changsha 410128, China; 2. National Research Center of Engineering Technology for Utilization of Botanical Functional Ingredients, Changsha 410128, China; 3. Collaborative Innovation Center of Utilization of Functional Ingredients from Botanicals, Changsha 410128, China; 4. Tea of Institute, Hunan Academy of Agricultural Sciences, Changsha 410125, China; 5. Wuzhou Academy of Liupao Tea, Wuzhou 543003, China; 6. Wuzhou of Office Tea Industry Development, Wuzhou 543003, China

To investigate the alleviative effects of aged Liupao tea on lipid metabolism and liver injury in hyperlipidemic mice, the changes of main chemical substances in Liupao tea of different storage ages were analyzed.The hyperlipidemia model mice were established by feeding a high fat and sugar diet, and Liupao tea groups were given daily oral administration of water extract of selected aged Liupao tea. The changes of related physiological andbiochemical indexes and tissue morphology in mice were observed. The results showed that Liupao tea samples stored for 15 years were selected as the representative of the aged Liupao tea, which was used in subsequent experiments. Compared with the hyperlipidemia model group, aged Liupao tea especially medium or high dose groups could significantly decrease the contents of TC, TG, and LDL-C levels, increase the content of HDL-C, suppressthe activities of ALT and AST in the serum, and moderate liver oxidative stress,. Pathological sections of liver and adipose tissue showed that aged Liupao tea could reduce the formation of lipid droplets in liver cells and inhibit the enlargement of fat cells in a dose dependent manner. In conclusion, aged Liupao tea of normal dose could effectively improve lipid metabolism disorder and liver injury in mice induced by high fat and sugar diet.

aged Liupao tea, hyperlipidemia, lipid metabolism, liver injury, alleviative effect

TS272.5+9

A

1000-369X（2018）04-430-09

2017-12-12

2018-01-30

梧州市科學(xué)研究與技術(shù)開發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目（201501028），2015年梧州市六堡茶產(chǎn)業(yè)化項(xiàng)目，國(guó)家茶葉產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系崗位科學(xué)家項(xiàng)目（CARS-23）、湖南省自然科學(xué)基金項(xiàng)目（2017JJ3106）

吳文亮，男，在讀博士研究生，主要從事茶葉加工及茶葉功能成分化學(xué)研究。*通訊作者：larkin–liu@163.com