氨氮脅迫下饑餓和再投喂對黃顙魚幼魚生長性能、血液健康、抗氧化能力及免疫應(yīng)答的影響

謝雨欣 張木子 黎 明 袁莉霞 李 冰 陳雨詩 王日昕

(寧波大學(xué)海洋學(xué)院，寧波 315211)

集約化養(yǎng)殖模式下，養(yǎng)殖水體中氨氮超標(biāo)已經(jīng)成為一種常態(tài)化的生產(chǎn)問題，養(yǎng)殖企業(yè)往往借助生物濾膜或頻繁換水達(dá)到降低氨氮的目的，然而治理成本較高[1]。絕大多數(shù)養(yǎng)殖魚類對氨氮非常敏感，過量的氨氮脅迫會導(dǎo)致其生長遲緩、鰓組織病變、器官衰竭和免疫抑制，行為表現(xiàn)包括：呼吸過速、過度興奮、昏厥、抽搐甚至死亡[2]。養(yǎng)殖生產(chǎn)過程中，當(dāng)水體中氨氮濃度驟升或出現(xiàn)持續(xù)高濃度時，生產(chǎn)單位通常采用減少日投飼量、投飼頻率或短期停止投飼等手段來降低養(yǎng)殖動物氨中毒現(xiàn)象發(fā)生的風(fēng)險。許多研究發(fā)現(xiàn)，魚類遭遇饑餓脅迫時可以通過消耗身體儲存的物質(zhì)以確保最低生存的需要，而饑餓后再投喂，魚類往往會表現(xiàn)出異于正常生長的生理特征[3-4]，這種異于正常生長的現(xiàn)象稱為補(bǔ)償生長，補(bǔ)償生長分為3種：超補(bǔ)償生長[5]、完全補(bǔ)償生長[6-7]和部分補(bǔ)償生長[8-9]。必須指出的是，針對魚類饑餓狀態(tài)下生理變化以及饑餓后補(bǔ)償生長的研究，通常是在正常生理條件(或正常養(yǎng)殖環(huán)境)中開展[10]，鮮有研究關(guān)注氨氮脅迫下魚類饑餓后再投喂是否存在補(bǔ)償生長的現(xiàn)象。

黃顙魚(Pelteobagrusfulvidraco)為雜食偏肉食性，廣泛分布于我國長江和珠江流域，是我國重要的經(jīng)濟(jì)養(yǎng)殖魚類。據(jù)《2017中國漁業(yè)統(tǒng)計年鑒》發(fā)布的權(quán)威數(shù)據(jù)，截止2016年底，全國黃顙魚總產(chǎn)量超過41萬t，年增幅達(dá)17.32%，業(yè)已成為我國重要淡水養(yǎng)殖種類之一[1]。黃顙魚肉質(zhì)肥美鮮嫩，其肌肉中含有人體所需的多種必需氨基酸，尤其是其沒有肌間刺，深受廣大老百姓的喜愛。然而，黃顙魚高密度的養(yǎng)殖現(xiàn)狀使得水體中氨氮濃度驟升頻繁發(fā)生，尤其是在氣溫較高的夏季[11]。本研究以黃顙魚幼魚為研究對象，評估了氨氮脅迫下饑餓和再投喂對黃顙魚幼魚生長性能、血液健康、抗氧化能力及免疫應(yīng)答的影響，以期為黃顙魚養(yǎng)殖生產(chǎn)中應(yīng)對氨氮脅迫緩釋策略的研發(fā)提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 飼養(yǎng)管理

黃顙魚幼魚購自浙江嘉興，暫養(yǎng)30 d后，挑選體質(zhì)健康、大小均一[(14.36±0.21) g]的黃顙魚幼魚180尾，隨機(jī)分配到6個300 L的塑料桶中，每桶放養(yǎng)30尾。參考黎慶等[12]報道的黃顙魚養(yǎng)殖水體氨氮安全濃度，設(shè)定試驗水體總氨氮濃度為5.74～5.91 mg/L(非離子氨濃度0.10～0.11 mg/L，pH 6.6～7.0)，期望總氨氮濃度通過預(yù)配的氯化銨(NH4Cl)母液(10 g/L)每隔7 h進(jìn)行1次調(diào)整，總氨氮濃度測定采用納氏試劑法[13]，通過計算獲得非離子氨濃度[14]。養(yǎng)殖過程中，試驗飼料為市售黃顙魚商品飼料(粗蛋白質(zhì)含量為41%，粗脂肪含量為4%)，養(yǎng)殖用水為除氯自來水，日換水量為總體積的1/3，水溫24～28 ℃，溶解氧濃度≥6.0 mg/L，pH 7.4±0.2，亞硝酸鹽濃度<0.5 mg/L，保持自然光照。

1.2 試驗設(shè)計及取樣

將6桶試驗魚隨機(jī)分為對照組和試驗組(每組3桶)：對照組采用人工飽食投喂，每天投喂2次；試驗組饑餓14 d后，恢復(fù)飽食投喂28 d。分別于試驗第14天和第42天時采集樣品，采樣前禁食24 h，稱重并記錄存活數(shù)。每次每桶隨機(jī)挑選3尾魚，MS-222麻醉后尾靜脈抽血，4 ℃靜置4 h后，3 000 r/min離心10 min分離血清，-80 ℃保存?zhèn)溆?；抽血后的魚解剖獲取肝臟，-20 ℃保存?zhèn)溆?；每桶另?尾魚，無菌條件下解剖獲取頭腎，測定吞噬指數(shù)和呼吸爆發(fā)。

1.3 血清生化指標(biāo)測定

血清生化指標(biāo)均使用BECKMAN AU5800全自動生化分析儀(Beckman Coulter，美國)進(jìn)行測定，其中血清總蛋白(total protein,TP)、白蛋白(albumin,ALB)、球蛋白(globulin,GLOB)和葡萄糖(glucose,GLU)含量采用寧波天康生物科技有限公司生產(chǎn)的試劑盒測定，總膽固醇(total cholesterol,TC)和甘油三酯(triglycerides,TG)含量采用安徽伊普諾康生物技術(shù)股份有限公司生產(chǎn)的試劑盒測定，尿酸(uric acid,URCA)含量、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(glutamic-pyruvic transaminase,GPT)和堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)活性采用寧波賽克生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的試劑盒測定，谷草轉(zhuǎn)氨酶(glutamic oxalacetic transaminase,GOT)活性采用貝克曼原裝生化試劑測定。

1.4 肝臟抗氧化指標(biāo)測定

取冷凍的肝臟樣品，按重量(g)∶體積(mL)=1∶9放入預(yù)冷的磷酸緩沖液(50 mmol/L，pH 7.4)，冰上勻漿，4 ℃條件下2 000 r/min離心15 min分離上清液備測。肝臟總抗氧化能力(total anti-oxidation capacity，T-AOC)測定參考Miller等[15]報道的方法，每分鐘每毫克組織蛋白質(zhì)使反應(yīng)體系吸光度增加0.01定義為1個T-AOC單位；肝臟超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)活性測定參考Beauchamp等[16]報道的方法，每毫克組織蛋白質(zhì)每分鐘抑制氯化硝基四氮唑藍(lán)(NBT)自氧化速率達(dá)50%時的酶消耗量定義為1個酶活性單位；肝臟過氧化物酶(catalase，CAT)活性測定參考Aebi[17]報道的方法，每毫克組織蛋白質(zhì)每分鐘使反應(yīng)體系吸光度減少0.1的酶消耗量定義為1個酶活性單位；肝臟丙二醛(malondialdehyde，MDA)含量通過硫代巴比妥酸反應(yīng)測定，參考Buege等[18]報道的方法。所有指標(biāo)均采用商業(yè)試劑盒(南京建成生物工程研究所生產(chǎn))測定，操作步驟嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。

1.5 血清溶菌酶活性、總免疫球蛋白(total immunoglobulin，TIg)和總補(bǔ)體(total complement，CH50)含量測定

血清溶菌酶活性測定參考Hultmark等[19]報道的方法，測試分析采用商業(yè)試劑盒(南京建成生物工程研究所生產(chǎn))，操作步驟嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。血清總免疫球蛋白和總補(bǔ)體含量測定參考Wu等[20]報道的方法，測試分析采用商業(yè)試劑盒(上海源葉生物科技有限公司生產(chǎn))，操作步驟嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。

1.6 頭腎巨噬細(xì)胞吞噬指數(shù)和呼吸爆發(fā)測定

無菌條件下獲取試驗魚頭腎，置于L-15(Gibco)培養(yǎng)基[含100 IU/mL青霉素(Sigma)、100 μg/mL鏈霉素(Sigma)、10 IU/mL肝素(Sigma)和2%的小牛血清(HyClone)]中，擠壓通過100 μm的金屬篩網(wǎng)制得細(xì)胞懸液。將懸液于34%/51%的Percoll(Sigma)溶液(把34%的Percoll溶液緩慢的加入到等體積的51%Percoll溶液中即可得到34%/51%的Percoll溶液)中進(jìn)行不連續(xù)梯度密度離心(4 ℃，600 r/min離心5 min)，分離獲得的巨噬細(xì)胞用L-15培養(yǎng)基沖洗數(shù)次，調(diào)整細(xì)胞濃度為1×107CFU/mL。細(xì)胞成活率用0.01%臺盼藍(lán)測定，確保成活率>95%。吞噬指數(shù)測定參考Pulsford等[21]報道的方法，呼吸爆發(fā)測定參考Stolen等[22]報道的方法。

1.7 計算公式

存活率(survival rate,SR,%)=100×存活尾數(shù)/初始尾數(shù)；特定生長率(specific growth rate,SGR,%/d)=100×(ln再投喂終末體質(zhì)量-ln再投喂初始體質(zhì)量)/再投喂天數(shù)；飼料效率(feed efficiency ratio,FER，%)=100×(終末體質(zhì)量-初始體質(zhì)量)/干飼料消耗量。

1.8 統(tǒng)計分析

試驗數(shù)據(jù)采用t檢驗進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤(mean±SE)表示，差異顯著性設(shè)置為P<0.05。所有分析均采用SPSS 18.0.0軟件在Windows操作系統(tǒng)中進(jìn)行。

2 結(jié) 果

2.1 氨氮脅迫下饑餓對黃顙魚幼魚的影響

由表1可知，氨氮脅迫下饑餓14 d后，試驗組黃顙魚幼魚的存活率與對照組無顯著性差異(P>0.05)；試驗組黃顙魚幼魚的體質(zhì)量顯著低于對照組(P<0.05)；試驗組黃顙魚幼魚的血清總蛋白、白蛋白、球蛋白、總膽固醇、甘油三酯含量和堿性磷酸酶活性顯著低于對照組(P<0.05)，而血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶活性和尿酸含量則顯著高于對照組(P<0.05)；試驗組黃顙魚幼魚的肝臟超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量顯著高于對照組(P<0.05)；試驗組黃顙魚幼魚的頭腎巨噬細(xì)胞吞噬指數(shù)和血清溶菌酶活性顯著低于對照組(P<0.05)。

表1 氨氮脅迫下饑餓對黃顙魚幼魚的影響Table 1 Effects of starvation on juvenile yellow catfish under ammonia stress

續(xù)表1項目 Items對照組Control group試驗組Experimental group超氧化物歧化酶 Superoxide dismutase/(U/mg) 57.69±11.11129.79±9.67?過氧化氫酶 Catalase/(U/mg) 59.04±7.8459.63±5.56丙二醛 Malondialdehyde/(nmol/mg)3.27±0.188.65±0.61?免疫應(yīng)答 Immune response呼吸爆發(fā) Respiratory burst/%0.03±0.010.04±0.01吞噬指數(shù) Phagocytic index/% 21.27±2.4212.47±1.29?總補(bǔ)體 Total complement/(mg/mL)79.89±4.8580.60±6.16總免疫球蛋白 Total immunoglobulin/(mg/mL)16.43±1.7215.94±0.51溶菌酶 Lysozyme/(U/mL) 160.50±77.30108.37±24.23?

試驗組數(shù)據(jù)肩標(biāo)*表示與對照組差異顯著(P<0.05)。下表同。
Values in experimental group with * superscript means significant difference compared with control group (P<0.05). The same as below.

2.2 氨氮脅迫下再投喂對黃顙魚幼魚的影響

由表2可知，氨氮脅迫下饑餓14 d再恢復(fù)投喂28d后，試驗組黃顙魚幼魚的存活率和飼料效率與對照組無顯著性差異(P>0.05)；試驗組黃顙魚幼魚的終末體質(zhì)量顯著低于對照組(P<0.05)，但特定生長率顯著高于對照組(P<0.05)。

表2 氨氮脅迫下再投喂對黃顙魚幼魚生長性能的影響Table 2 Effects of refeeding on growth performance of juvenile yellow catfish under ammonia stress

由表3可知，氨氮脅迫下饑餓14 d再恢復(fù)投喂28 d后，試驗組黃顙魚幼魚的血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、堿性磷酸酶活性及尿酸和甘油三酯含量顯著低于對照組(P<0.05)；試驗組黃顙魚幼魚的血清總蛋白、白蛋白、球蛋白、總膽固醇、葡萄糖含量與對照組無顯著性差異(P>0.05)。

表3 氨氮脅迫下再投喂對黃顙魚幼魚血清生化指標(biāo)的影響Table 3 Effects of refeeding on serum biochemical indices of juvenile yellow catfish under ammonia stress

由表4可知，氨氮脅迫下饑餓14 d再恢復(fù)投喂28 d后，試驗組黃顙魚幼魚的肝臟總抗氧化能力和過氧化氫酶活性顯著低于對照組(P<0.05)，而丙二醛含量則顯著高于對照組(P<0.05)；試驗組黃顙魚幼魚的肝臟超氧化物歧化酶活性與對照組無顯著性差異(P>0.05)。

表4 氨氮脅迫下再投喂對黃顙魚幼魚抗氧化指標(biāo)的影響Table 4 Effects of refeeding on antioxidant indices of juvenile yellow catfish under ammonia stress

由表5可知，氨氮脅迫下饑餓14 d再恢復(fù)投喂28 d后，試驗組黃顙魚幼魚的頭腎巨噬細(xì)胞吞噬指數(shù)和血清總免疫球蛋白含量顯著高于對照組(P<0.05)。試驗組黃顙魚幼魚的頭腎巨噬細(xì)胞呼吸爆發(fā)、血清總補(bǔ)體含量和溶菌酶活性與對照組無顯著性差異(P>0.05)。

表5 氨氮脅迫下再投喂對黃顙魚幼魚免疫應(yīng)答的影響Table 5 Effects of refeeding on immune response of juvenile yellow catfish under ammonia stress

3 討 論

3.1 氨氮脅迫下饑餓和再投喂對黃顙魚幼魚生長性能的影響

集約化養(yǎng)殖模式下，由于養(yǎng)殖密度過大、投飼不均等原因，頻繁的饑餓脅迫使得魚類表現(xiàn)出零生長或負(fù)生長的現(xiàn)象。在本研究中，黃顙魚幼魚饑餓14 d后，其生長性能顯著降低，呈現(xiàn)負(fù)增長趨勢，但14 d的饑餓脅迫并未影響其存活率。大部分魚類經(jīng)歷了短期饑餓后再進(jìn)行投喂，能夠恢復(fù)到饑餓前的生理狀態(tài)，甚至存在超補(bǔ)償生長的現(xiàn)象，這在史氏鱘(Acipenserschrenckii)[23]、歐鰉(Husohuso)[24]、虹鱒(Oncorhynchusmykiss)[25]、歐洲鱸魚(Dicentrarchuslabrax)[26]和尼羅羅非魚(Oreochromisniloticus)[27]等50多種經(jīng)濟(jì)魚類上都有過報道。姚峰等[28]研究認(rèn)為，魚類饑餓后恢復(fù)投喂，其特定生長率高于對照組即為部分補(bǔ)償生長現(xiàn)象。在本研究中，氨氮脅迫下的試驗組黃顙魚幼魚恢復(fù)投喂28 d后，盡管終末體質(zhì)量還低于對照組，但特定生長率已顯著高于對照組，即表現(xiàn)出部分補(bǔ)償生長現(xiàn)象。但楊嚴(yán)鷗等[29]發(fā)現(xiàn)，在正常環(huán)境中，瓦氏黃顙魚(Pelteobaggrusvachelli)饑餓后恢復(fù)投喂，生長性能呈現(xiàn)出超補(bǔ)償生長現(xiàn)象，本試驗結(jié)果與之不吻合，推測可能與氨中毒導(dǎo)致的生長抑制有關(guān)[30]。

3.2 氨氮脅迫下饑餓和再投喂對黃顙魚幼魚血清生化指標(biāo)的影響

血清生化指標(biāo)被廣泛用于評價魚類的健康狀況。其中，白蛋白參與損傷組織的修復(fù)及血漿膠體滲透壓的維持，球蛋白參與機(jī)體的特異性免疫。研究發(fā)現(xiàn)，饑餓會引起血清總蛋白、白蛋白和球蛋白含量的降低[31]。本研究發(fā)現(xiàn)，饑餓14 d后，試驗組黃顙魚幼魚的血清中總蛋白、白蛋白和球蛋白含量顯著低于對照組，但之后通過28 d的恢復(fù)性投喂，試驗組黃顙魚幼魚的血清總蛋白、白蛋白和球蛋白含量與對照組無顯著性差異。結(jié)果提示，饑餓會影響組織修復(fù)、滲透壓維持及免疫力，再投喂表現(xiàn)出明顯的生理補(bǔ)償現(xiàn)象。尿酸是嘌呤代謝的終產(chǎn)物，血清尿酸含量直接反映機(jī)體蛋白質(zhì)分解代謝水平。在本研究中，血清尿酸含量在饑餓后顯著升高，恢復(fù)投喂后血清尿酸含量出現(xiàn)降低，甚至顯著低于對照組，表明饑餓后魚體內(nèi)蛋白質(zhì)的合成降低，分解增強(qiáng)，而恢復(fù)攝食能夠降低機(jī)體對能量的需求。饑餓后再投喂，試驗組黃顙魚幼魚的血清甘油三酯、總膽固醇和葡萄糖含量得到不同程度的恢復(fù)，與能量物質(zhì)被運(yùn)至貯脂組織中重新合成脂類有關(guān)[10]。血液中葡萄糖含量的穩(wěn)定對生命活動具有十分重要的作用，饑餓脅迫下，魚類無法從食物中獲取碳水化合物，血液中葡萄糖含量的維持主要由碳源的分解和糖異生作用來實現(xiàn)。本研究發(fā)現(xiàn)，饑餓及恢復(fù)投喂后，黃顙魚幼魚的血清葡萄糖含量在試驗組和對照組之間均無顯著性差異，結(jié)果提示，短期饑餓后再投喂不會影響血液中葡萄糖含量的穩(wěn)定性。血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶在蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和碳水化合物的代謝過程中發(fā)揮重要的作用，而堿性磷酸酶在調(diào)節(jié)水生動物體內(nèi)鈣、磷吸收與維持鈣、磷平衡過程中起著重要作用，是一種重要的代謝調(diào)控酶，當(dāng)組織細(xì)胞受損時，它們將大量涌入血液中。在本研究中，饑餓導(dǎo)致黃顙魚幼魚血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶活性顯著提高，通過28 d的恢復(fù)投喂，試驗組黃顙魚幼魚血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶活性顯著低于對照組。施兆鴻等[32]對條石鯛幼魚(Oplegnathusfascltus)的研究顯示，血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性在饑餓9 d時顯著高于對照組，血清谷草轉(zhuǎn)氨酶活性在饑餓12 d時顯著高于對照組，恢復(fù)投喂后血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶活性與對照組差異不顯著；相反，田娟等[10]報道，尼羅羅非魚血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶和堿性磷酸酶活性在饑餓28 d內(nèi)隨著饑餓時間延長而顯著降低，恢復(fù)投喂21 d后，血清堿性磷酸酶活性恢復(fù)到初始水平，而谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶活性仍顯著低于初始水平；此外，稅春等[33]發(fā)現(xiàn)，菊黃東方鲀(Takifuguflavidus)饑餓15 d內(nèi)血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶和堿性磷酸酶活性無顯著變化，恢復(fù)投喂后與對照組仍無顯著差異。

3.3 氨氮脅迫下饑餓和再投喂對黃顙魚幼魚抗氧化能力的影響

總抗氧化能力反映了抗氧化酶系統(tǒng)和非酶系統(tǒng)應(yīng)對外界脅迫的代謝能力，是衡量機(jī)體抗氧化能力的綜合指標(biāo)，與機(jī)體的健康狀況密切相關(guān)[34]。Yengkokpam等[35]研究表明，自由基的增多會使機(jī)體總抗氧化能力降低。在本研究中，盡管饑餓脅迫下黃顙魚幼魚的肝臟總抗氧化能力并未表現(xiàn)出顯著性差異，但恢復(fù)投喂后，試驗組黃顙魚幼魚的肝臟總抗氧化能力反而低于對照組，這可能與丙二醛持續(xù)積累有關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn)，饑餓14 d后，黃顙魚幼魚肝臟中丙二醛含量表現(xiàn)出過度積累，恢復(fù)投喂后，丙二醛毒性效應(yīng)并沒有得到改善。前人的研究發(fā)現(xiàn)，環(huán)境應(yīng)激會導(dǎo)致魚體內(nèi)產(chǎn)生大量氧自由基(ROS)，自由基過度積累會破壞組織蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)、加劇細(xì)胞膜脂質(zhì)過氧化程度和加速醛酮類物質(zhì)的積累[36]。丙二醛能夠與蛋白質(zhì)和核酸等發(fā)生“交聯(lián)聚合”，使得抗氧化酶活性逐漸喪失。丙二醛含量的變化通常被用來作為反映機(jī)體清除自由基能力和細(xì)胞受損嚴(yán)重程度的重要指標(biāo)[18]。此外，本研究還發(fā)現(xiàn)，饑餓14 d后，試驗組黃顙魚幼魚的肝臟超氧化物歧化酶活性顯著高于對照組，原因可能是低濃度氨氮脅迫下魚類的超氧化物歧化酶活性往往會被激活[37]。超氧化物歧化酶是反映魚類氧化應(yīng)激的主要指標(biāo)之一，超氧化物歧化酶能將超氧陰離子自由基還原為過氧化氫(H2O2)，H2O2進(jìn)一步在谷胱甘肽過氧化物酶和過氧化氫酶的作用下分解成無毒的水(H2O)和氧氣(O2)[35]。在本研究中，通過恢復(fù)投喂，黃顙魚幼魚的肝臟超氧化物歧化酶活性在試驗組與對照組之間無顯著性差異，結(jié)果提示，饑餓后恢復(fù)投喂能夠緩解饑餓脅迫對黃顙魚幼魚抗氧化酶系統(tǒng)造成的損傷。

3.4 氨氮脅迫下饑餓和再投喂對黃顙魚幼魚免疫應(yīng)答的影響

魚類處于生物進(jìn)化的低級階段，非特異性免疫系統(tǒng)作為病原生物入侵時機(jī)體的第1道防線和第2道防線，起著非常重要的作用。其中，溶菌酶是重要的非特異性防御因子之一，能破壞和消除入侵體內(nèi)的異物，并激活補(bǔ)體和吞噬細(xì)胞[38]。本研究發(fā)現(xiàn)，饑餓14 d后，試驗組黃顙魚幼魚的血清溶菌酶活性顯著低于對照組，表明饑餓能夠?qū)γ庖邞?yīng)答造成抑制。樓寶等[39]報道，花鱸(Lateolabraxjaponicus)分別饑餓5、10和15 d后，血清溶菌酶和脾臟溶菌酶活性未發(fā)生顯著變化，10 d饑餓組頭腎溶菌酶活性在恢復(fù)投喂10 d后顯著升高，15 d饑餓組頭腎溶菌酶活性在饑餓結(jié)束時顯著降低，但恢復(fù)投喂5 d后與對照組無顯著差異。Caruso等[40]報道，歐洲鱸魚(Dicentrarchuslabrax)饑餓31 d后，血清和頭腎溶菌酶活性未檢測到顯著變化，而同樣處理的黑鯛(Pagellusbogaraveo)血清溶菌酶活性則顯著下降。溶菌酶活性表現(xiàn)出的差異，可能與魚種、年齡、規(guī)格和檢測手段的不同以及環(huán)境因素等有關(guān)[41]。在本研究中，恢復(fù)投喂28 d后，黃顙魚幼魚的頭腎巨噬細(xì)胞呼吸爆發(fā)、血清總補(bǔ)體含量和溶菌酶活性，試驗組與對照組無顯著性差異，而試驗組黃顙魚幼魚的血清總免疫球蛋白含量和頭腎巨噬細(xì)胞吞噬指數(shù)甚至顯著高于對照組，提示饑餓后再投喂對黃顙魚幼魚的免疫應(yīng)答存在超補(bǔ)償或完全補(bǔ)償現(xiàn)象。

4 結(jié) 論

氨氮脅迫下，饑餓會導(dǎo)致黃顙魚幼魚生長遲緩、血液健康惡化、抗氧化酶活性和免疫應(yīng)答受到抑制；饑餓后再投喂，黃顙魚幼魚表現(xiàn)出部分生長補(bǔ)償，血液健康、抗氧化酶活性和免疫抑制得到不同程度的緩解。