重組豬α干擾素在仔豬腹瀉疾病防控中的應(yīng)用

代洪波，李盛辟，周遠(yuǎn)成，陰文奇

（

1.畜禽生物制品四川省重點實驗室，四川 成都 610200；2.四川省動物生物制品工程技術(shù)研究中心，成都 610200）

仔豬腹瀉性疾病是近幾年危害我國養(yǎng)豬生產(chǎn)最主要的疫病之一，主要由豬流行性腹瀉病毒、豬傳染性胃腸炎病毒等引起，臨床上主要以哺乳仔豬嘔吐、水樣腹瀉以及脫水為特征，死亡率很高[1]。目前，仔豬腹瀉疾病尚無特效治療藥物，疫苗免疫可以構(gòu)筑針對特定病原的免疫屏障，但是一旦部分豬群免疫水平低下形成有效感染和發(fā)病，發(fā)病豬群向環(huán)境中大量排毒，疫苗免疫構(gòu)筑的免疫屏障將難以抵抗大劑量的強毒攻擊。如果發(fā)病豬群的病情得不到有效控制，疫情將在豬場內(nèi)愈演愈烈[2]。

干擾素是一種具有多種功能的活性蛋白質(zhì)，主要由單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞產(chǎn)生，具有廣泛的抗病毒活性，影響細(xì)胞生長以及調(diào)節(jié)機體免疫功能。按照國際標(biāo)準(zhǔn)可將干擾素分為3類，第Ⅰ類以α干擾素和β干擾素為代表，第Ⅱ類以γ干擾素為代表，第Ⅲ類以λ干擾素為代表。豬α干擾素作為Ⅰ型干擾素的主要亞型之一，表現(xiàn)出了良好的抗病毒效應(yīng)，能迅速干擾病毒的復(fù)制，是豬體早期抵御病原入侵的重要防御物質(zhì)[3]。臨床應(yīng)用顯示，豬α干擾素在治療豬藍(lán)耳病、豬瘟、豬流行性腹瀉、豬傳染性胃腸炎等疾病中均有一定效果，腹瀉仔豬注射豬α干擾素后，能縮短病程，提高日增重，加快腸絨毛修復(fù)[4-6]。本試驗選用2個仔豬腹瀉發(fā)病豬場，在限定范圍內(nèi)開展了重組豬α干擾素治療仔豬腹瀉疾病試驗。試驗結(jié)果匯總?cè)缦隆?/p>

1 仔豬腹瀉防控案例一（豬場1）

1.1 發(fā)病豬場概況

四川某規(guī)?；B(yǎng)豬場，存欄經(jīng)產(chǎn)母豬600頭左右，2017年12月暴發(fā)仔豬腹瀉疫情。疫情暴發(fā)初期主要表現(xiàn)為14～18日齡仔豬腹瀉，呈散發(fā)，每棟豬舍（22窩）出現(xiàn)2~3窩仔豬發(fā)病。采集發(fā)病仔豬分別進行豬流行性腹瀉病毒膠體金檢測，結(jié)果為陽性，確診為豬流行性腹瀉病毒感染。此外，該豬場為豬偽狂犬病野毒感染豬場，初產(chǎn)母豬為豬偽狂犬病野毒抗體陰性，但與經(jīng)產(chǎn)母豬之間無嚴(yán)格的隔離措施，2胎母豬偽狂犬病野毒抗體陽性率15%，3胎母豬偽狂犬病野毒抗體陽性率高達(dá)80%；仔豬腹瀉疫情發(fā)生后，采集腹瀉仔豬肺臟與腦組織進行豬偽狂犬病病毒抗原檢測，結(jié)果顯示3/5呈豬偽狂犬病野毒陽性。

該豬場母豬每年普免4次豬偽狂犬病活疫苗（Bartha-K61株），腹瀉疫情暴發(fā)前1個月剛完成豬偽狂犬病疫苗普免；仔豬3日齡滴鼻，1頭份/頭，45日齡肌肉注射，1頭份/頭。腹瀉疫情暴發(fā)后，母豬間隔4周緊急接種2次豬流行性腹瀉滅活疫苗。截至2018年2月底，仔豬腹瀉疫情并未改善，腹瀉疫情有擴大趨勢，仔豬發(fā)病日齡越來越小，由3日齡以上仔豬腹瀉發(fā)展為初生仔豬腹瀉，發(fā)病率從20%左右上升至40%以上，日均死亡50～60頭仔豬。為盡快控制疫情，2018年3月該規(guī)?；B(yǎng)豬場負(fù)責(zé)人決定使用重組豬α干擾素治療仔豬腹瀉。

1.2 試驗方案

共選用36頭母豬開展重組豬α干擾素治療仔豬腹瀉試驗，隨機將母豬分為4個試驗組，每組9頭。所有母豬產(chǎn)前40 d，每頭肌肉注射豬偽狂犬病活疫苗（SA215株）2頭份。第1組：初生仔豬每頭滴鼻接種豬偽狂犬病活疫苗（SA215株）1頭份。第2組：初生仔豬每頭滴鼻接種豬偽狂犬病活疫苗（SA215株）1頭份；母豬產(chǎn)后連續(xù)3 d按200萬U/頭的劑量肌肉注射重組豬IFN-α；仔豬出生后，連續(xù)3 d按50萬U/頭的劑量肌肉注射重組豬IFN-α。第3組：母豬產(chǎn)后連續(xù)3 d按200萬U/頭的劑量肌肉注射重組豬IFN-α；仔豬出生后，連續(xù)3 d按50萬U/頭的劑量肌肉注射重組豬IFN-α。對照組：不進行特殊處理。

表1 試驗豬場1分組信息

1.3 試驗結(jié)果

對照組共產(chǎn)仔豬93頭，1日齡有53頭腹瀉，腹瀉發(fā)病率57%；4日齡28頭仔豬腹瀉，腹瀉發(fā)病率30.1%。試驗1組：共產(chǎn)仔豬93頭，1日齡有68頭腹瀉，腹瀉發(fā)病率73.1%；偽狂犬病疫苗滴鼻接種后，4日齡11頭仔豬腹瀉，腹瀉率11.8%，比對照組低18.3個百分點。試驗2組：共產(chǎn)仔豬90頭，1日齡46頭腹瀉，腹瀉發(fā)病率51.1%；偽狂犬病疫苗滴鼻后，重組豬IFN-α治療3 d，4日齡2頭仔豬腹瀉，腹瀉率2.2%，比對照組低27.9個百分點。試驗3組：共產(chǎn)仔豬95頭，1日齡56頭腹瀉，腹瀉發(fā)病率58.9%；以重組豬IFN-α治療3 d，4日齡6頭仔豬腹瀉，腹瀉發(fā)病率降低至6.3%，比對照組低23.8個百分點。試驗豬場1統(tǒng)計結(jié)果見表2。

表2 試驗豬場1統(tǒng)計結(jié)果 頭

2 仔豬腹瀉防控案例二（豬場2）

2.1 發(fā)病豬場概況

四川某豬場，母豬存欄200頭左右，2018年1月發(fā)生仔豬腹瀉。腹瀉發(fā)病初期，表現(xiàn)為零散發(fā)病，豬場以腹瀉仔豬腸道對所有母豬進行返飼；返飼后疫情不但沒有得到有效控制，反而愈演愈烈，仔豬腹瀉發(fā)病率90%以上，死亡率超過50%。腹瀉疫情暴發(fā)后，所有母豬后海穴注射豬流行性腹瀉滅活疫苗，4 mL/頭，產(chǎn)房母豬實行封閉式管理，及時用干燥劑處理腹瀉糞便。2018年3月開展重組豬IFN-α治療試驗時，豬場腹瀉發(fā)病率由90%左右降低至60%左右，死亡率下降至20%左右。

2.2 試驗方案

選用20頭母豬進行重組豬IFN-α治療試驗，在母豬產(chǎn)仔當(dāng)天，每頭母豬肌肉注射200萬U重組豬IFN-α，連續(xù)注射3 d；試驗組母豬所產(chǎn)仔豬，每頭肌肉注射50萬U重組豬IFN-α，連續(xù)注射3 d。選用同產(chǎn)房飼養(yǎng)的另外20頭母豬作為對照。

2.3 試驗結(jié)果

對照組20頭母豬共產(chǎn)仔豬216頭，初生仔豬腹瀉發(fā)病率48.1%，2日齡腹瀉發(fā)病率為57.9%，4日齡腹瀉發(fā)病率為28.7%。試驗組20頭母豬共產(chǎn)仔豬230頭，初生仔豬122頭發(fā)生腹瀉，腹瀉發(fā)病率53%；母豬與仔豬連續(xù)3 d肌肉注射重組豬IFN-α，4日齡仔豬腹瀉發(fā)病率降低至9.6%；與對照組相比腹瀉發(fā)病率降低19.1個百分點。試驗豬場2統(tǒng)計結(jié)果見表3。

表3 試驗豬場2統(tǒng)計結(jié)果 頭

3 討論

疫苗免疫被認(rèn)為是預(yù)防仔豬腹瀉性疾病最有效的途徑之一，隨著豬流行性腹瀉病毒變異毒株的出現(xiàn)，滅活疫苗的免疫效果不斷受到質(zhì)疑。在某些早期豬流行性腹瀉疫情的防控案例中分析總結(jié)發(fā)現(xiàn)，仔豬腹瀉疾病的防控具有其特殊性，腹瀉病毒主要在腸道內(nèi)增殖，感染豬群通過糞便向環(huán)境中大量排毒，僅僅依靠疫苗接種產(chǎn)生的免疫保護，難以抵抗高強度的野毒攻擊。豬場一旦發(fā)生仔豬腹瀉疫情，需要盡快封鎖發(fā)病豬群，及時撲滅疫情，切斷傳染源，才是對其他豬群最好的保護[2]。在沒有特效藥物的情況下，只有通過加強飼養(yǎng)管理，做好日常消毒，降低環(huán)境中的病原微生物含量等方式控制疫情，待發(fā)病豬群排毒期結(jié)束后，再解除隔離。

本試驗選用2個腹瀉發(fā)病豬場，采用重組豬IFN-α對腹瀉發(fā)病仔豬進行治療，旨在降低腹瀉發(fā)病率，縮短疫病防控周期，降低其他豬群的感染壓力。試驗豬場1為豬偽狂犬病野毒感染陽性場，初生仔豬滴鼻接種豬偽狂犬病活疫苗后，腹瀉發(fā)病率比對照組降低18.3個百分點；哺乳母豬與腹瀉仔豬連續(xù)注射3 d重組豬IFN-α，腹瀉發(fā)病率比對照組降低了23.8個百分點；豬偽狂犬病活疫苗與重組豬IFN-α同時使用，4日齡仔豬腹瀉率降低至2.2%，比對照組低27.9個百分點。在豬偽狂犬病野毒感染陽性豬場，豬偽狂犬病活疫苗滴鼻免疫初生仔豬，對豬場的腹瀉疫情防控具有一定的效果；在試驗豬場1以重組豬IFN-α治療仔豬腹瀉疾病成果顯著，大幅降低腹瀉發(fā)病率，縮短了腹瀉疾病的持續(xù)時間。

在試驗豬場2，以重組豬IFN-α連續(xù)肌肉注射哺乳母豬與腹瀉仔豬，仔豬腹瀉發(fā)病率由53%下降至9.6%，比對照組低19.1個百分點。重組豬IFN-α通過干擾病毒的復(fù)制，發(fā)揮抗病毒作用。在人用醫(yī)藥方面，已經(jīng)有諸如重組干擾素凝膠、重組干擾素注射液等產(chǎn)品面世，適用于肝炎、皰疹、尖銳濕疣、感冒、結(jié)膜炎等多種病毒性疾病，同時也被證明具備增強巨噬細(xì)胞的吞噬功能、增強細(xì)胞毒T細(xì)胞的殺傷作用和天然殺傷性細(xì)胞的功能[7-8]。重組干擾素產(chǎn)品在人用醫(yī)藥中的應(yīng)用已證明了該類基因工程產(chǎn)品的安全性與廣泛適用性。隨著獸用生物制品的不斷發(fā)展，重組豬干擾素產(chǎn)品將不斷增多，重組豬干擾素產(chǎn)品將會不斷應(yīng)用于豬病的防治。本試驗通過2個豬場的案例證實，重組豬IFN-α對仔豬腹瀉疾病具有良好的治療效果，可以有效縮短發(fā)病周期。在存在豬偽狂犬病等其他疫病混合感染時，需要結(jié)合實際情況，制定具有針對性的腹瀉疫病防控方案，才能取得更好的防控效果。