盈江縣高山大白菜根腫菌生理小種鑒定及抗源篩選

尹俊龍錢正益鄭宇峰趙從新岳艷玲*

（1云南農(nóng)業(yè)大學園林園藝學院，云南昆明 650201；2景東彝族自治縣農(nóng)業(yè)試驗站，云南普洱 676299；3德宏州農(nóng)業(yè)技術推廣中心，云南芒市 679300）

大白菜根腫病是由蕓薹根腫菌（Plasmodiophora brassicae Woron.）侵染所引起的一種世界性土傳病害。該病菌最早發(fā)現(xiàn)于歐洲，目前流行于主要十字花科作物產(chǎn)區(qū)（伍文憲 等，2015）。根腫菌的休眠孢子能夠在土壤中存活8 a以上（譚翀和岳艷玲，2013），一旦被侵染將很難再進行十字花科作物的種植。根腫菌自20世紀末傳入我國，不斷蔓延，目前已有多個省市土壤受到污染，損失慘重（田雅琳，2015）。近年來，隨著對根腫病防控方法的深入研究，發(fā)現(xiàn)施用生石灰調(diào)節(jié)土壤pH能夠在一定程度上減弱根腫病的為害（班靜潔，2014），施用枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）生物制劑能夠抑制土壤中90%的根腫菌孢子萌發(fā)（彭麗莎，2015），施用化學農(nóng)藥氟啶胺（福帥得）防治效果可以達到80%以上（王昌玉 等，2004）。但最為經(jīng)濟有效的綠色防控方法是使用抗病品種。由于根腫菌在不同的地區(qū)以不同致病性和不同類型的生理小種形式存在，造成抗病品種在不同地區(qū)栽培后所表現(xiàn)出的抗性也存在顯著差異（譚翀和岳艷玲，2013）。盈江是云南省德宏州高山大白菜的重要產(chǎn)區(qū)，但土壤被根腫菌污染后生產(chǎn)受到嚴重威脅，產(chǎn)量損失嚴重，幾近絕收，因此篩選適宜盈江地區(qū)栽培的抗病品種尤為重要。為了保障該地區(qū)大白菜生產(chǎn)的需求，對該地區(qū)根腫菌進行生理小種鑒定和抗源篩選，以期為盈江地區(qū)大白菜生產(chǎn)和新品種選育提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

根腫菌采自云南省德宏州盈江縣油松嶺大白菜產(chǎn)區(qū)。

Williams鑒別寄主4份，即2個結球甘藍Jersey Queen、Badger Shipper和 2個 蕪 菁 甘 藍Laurentian、Wilhelmsburger，源自沈陽農(nóng)業(yè)大學。

從國內(nèi)外引進抗根腫病大白菜品種18份，品種名稱及來源見表2；對照為感病品種魯春白1號。

1.2 試驗方法

試驗于2016年8～10月在云南農(nóng)業(yè)大學園林園藝學院蔬菜基地進行。利用Williams鑒別系統(tǒng)，采用菌土法（司軍 等，2003）進行根腫菌生理小種鑒定和大白菜品種抗性鑒定。菌土的孢子濃度為1×107個·g-1（周永紅 等，2007），每個品種接種100株，40 d后調(diào)查發(fā)病情況，計算發(fā)病率和病情指數(shù)。

根據(jù)十字花科作物根腫菌苗期病害分級標準（侯明生和蔡麗，2014）對不同品種大白菜植株發(fā)病情況進行鑒定和分級，分級標準：0級，根部無腫瘤；1級，側根有小腫瘤；3級，主根腫大，其直徑小于2倍莖基部；5級，主根腫大，其直徑是莖基部的2～3倍；7級，主根腫大，其直徑是莖基部的3～4倍；9級，主根腫大，其直徑是莖基部的4倍以上或腫大的根部變黑。計算病情指數(shù)，病情指數(shù)=0記為免疫，病情指數(shù)＜10記為抗病，病情指數(shù)≥10記為感病。

2 結果與分析

2.1 盈江根腫菌生理小種鑒定

Williams 鑒別系統(tǒng)的4個寄主接種盈江根腫菌40 d后，病情指數(shù)分別為21、33、28、30，均大于10，且各寄主的發(fā)病率均為100%（表1）。根據(jù)Williams鑒別系統(tǒng)的分類標準，盈江根腫菌為4號生理小種。

表1 盈江根腫菌生理小種鑒定結果

2.2 大白菜品種抗性鑒定

從國內(nèi)外引進的18個抗根腫病大白菜品種接種盈江根腫菌后，發(fā)病率和病情指數(shù)明顯不同（表2）。其中尚品、CR鐵甲1號、抗根911、泰能CR119、倍盛CR12、新抗根等6個品種的發(fā)病率和病情指數(shù)均為0，對盈江根腫菌表現(xiàn)免疫，占供試品種的33.3%；德高CR117、中華白菜王的發(fā)病率分別為17%和11%，病情指數(shù)分別為9.7和7.7，對盈江根腫菌表現(xiàn)抗病，占供試品種的11.1%；其他10個品種和感病對照魯春白1號的發(fā)病率均為100%，病情指數(shù)在38.8～65.7之間，表現(xiàn)感病。

表2 18個抗根腫病大白菜品種對盈江根腫菌抗性鑒定結果

3 結論與討論

3.1 盈江根腫菌是更復雜的根腫菌

本試驗中，Willimas鑒別系統(tǒng)的4個寄主接種盈江根腫菌后全部發(fā)病，發(fā)病率均為100%；病情指數(shù)分別為21、33、28、30，均大于10，鑒定盈江根腫菌為4號生理小種。但是，抗4號生理小種的大白菜品種榮耀、亞菲4號和秋冠在接種湖北枝江和山東青島2個地區(qū)的4號生理小種后均表現(xiàn)抗病（曾令益 等，2017），而在本試驗中榮耀、秋冠和亞菲4號接種盈江根腫菌后的發(fā)病率均為100%，病情指數(shù)均大于10，表現(xiàn)為感病，說明盈江根腫菌4號生理小種與湖北枝江和山東青島根腫菌4號生理小種不同，盈江根腫菌致病性更強，可能是Willimas鑒別系統(tǒng)鑒別不到的生理小種，也可能是含有多個生理小種的混合菌，具體小種組成還需要進一步進行單孢分離侵染鑒定。

3.2 盈江根腫菌抗病種質(zhì)資源相對豐富

本試驗引進的18個抗根腫病大白菜品種接種盈江根腫菌后，尚品、CR鐵甲1號、抗根911、泰能CR119、倍盛CR12、新抗根等6個品種的發(fā)病率和病情指數(shù)均為0，對盈江根腫菌表現(xiàn)免疫；德高CR117、中華白菜王的發(fā)病率分別為17%和11%，病情指數(shù)分別為9.7和7.7，對盈江根腫菌表現(xiàn)抗病。說明這8個品種可能含有抗盈江根腫菌的抗性基因，可利用這些遺傳資源，針對該地區(qū)特殊的生理小種，將抗病基因轉育到適宜生態(tài)類型品系中，培育符合當?shù)卦耘鄨@藝性狀需求的大白菜抗病新品種。

3.3 篩選符合當?shù)厣a(chǎn)需求的大白菜新品種

盈江縣是云南省德宏州高山大白菜重要產(chǎn)區(qū)，已有20 a的栽培歷史，大白菜夏秋季生產(chǎn)是當?shù)剞r(nóng)民創(chuàng)收的重要項目。隨著土壤被根腫菌污染，根腫病發(fā)生為害越來越嚴重，給當?shù)卮蟀撞松a(chǎn)造成了巨大的損失。近幾年來，德高CR117在該地區(qū)進行推廣應用，初步取得了較好的防控效果。但是，盈江地區(qū)主要是進行夏秋季栽培，溫度高、雨水大，德高CR117軟腐病的發(fā)生率為10%～13%，而且該品種球形偏大，不太符合當?shù)厥袌鲂枨?。本試驗篩選出6個對盈江根腫菌表現(xiàn)免疫的大白菜品種，可通過進一步試種，對其在當?shù)氐谋憩F(xiàn)進行綜合評價，以篩選出適宜當?shù)貧夂驐l件和市場需求的抗病品種，豐富盈江地區(qū)大白菜的品種類型。