蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測技術(shù)與應用實踐研究

◎ 朱建恩

（廣東產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗研究院，廣東 佛山 528300）

我國是一個農(nóng)業(yè)大國，隨著人們生活水平的不斷提升，食品安全問題逐漸成為普遍關注的話題。近年來，我國人口持續(xù)增長，農(nóng)業(yè)種植面積也得到擴張，隨之而來的便是果蔬質(zhì)量問題。農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，農(nóng)藥是必不可少的化學藥品，其使用程度的增加，嚴重危害了蔬菜質(zhì)量、糧食產(chǎn)量。農(nóng)藥的過度使用，導致其在蔬菜中形成殘留，繼而引發(fā)中毒的現(xiàn)象，這是當前非常嚴重的問題，必須應用農(nóng)藥殘留快速檢測技術(shù)加以解決。

1 農(nóng)藥殘留快速檢測技術(shù)概述

1.1 應用原理

當前農(nóng)藥殘留最為嚴重的是蔬果殘留，比較常見的農(nóng)藥有有機磷農(nóng)藥、氨基甲酸酯農(nóng)藥等。其中，有機磷農(nóng)藥若在種植中使用不規(guī)范或者頻率過高，會影響蔬果質(zhì)量，因此農(nóng)藥殘留檢測的重點便是有機磷、氨基甲酸酯這兩類農(nóng)藥。

一般檢測時比較常用方法包括酶抑制法、免疫分析法、生物傳感器法、酶抑制分光光度法。酶抑制通過是通過有機磷與氨基甲酸酯農(nóng)藥本身所帶有的可特異性，抑制昆蟲中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的乙酰膽堿酯酶活性，使其無法正常傳導，最終中毒而死。一般實驗過程中，通過堿酯酶、有機磷（氨基甲酸酯農(nóng)藥）之間的反應抑制酶活性，使用膽堿酯酶將靛酚乙酸酯進行水解，使其在催化作用下成為乙酸、靛酚，從而對樣品內(nèi)是否有農(nóng)藥殘留進行判斷[1]。

1.2 檢測設備

常用的農(nóng)藥殘留速測儀以多通道光路設備為主，該設備可以同時檢測若干個樣品，且操作簡單、成本低，檢測完畢之后可以直接顯示出檢測結(jié)果，并且具備數(shù)據(jù)接口。此外，農(nóng)藥殘留檢測實驗過程中，比較常用的設備也包括安鑫寶WT-51A、歐達科儀PR-202、CNY-817C等。試劑以酶為主，如乙酰膽堿酯酶（AChE），底物則多使用硫代乙酰膽堿、碘化代丁酰膽堿、碘化硫代乙酰膽堿。顯色劑主要是二硫代二硝基苯甲酸、2,6-二氯靛酚。經(jīng)過一段反應時間之后通過分光光度法，按照吸光值的變化，計算ChE抑制率，根據(jù)最終計算結(jié)果判斷有機磷氨基甲酸酯農(nóng)藥的殘留量[2]。抑制率如果≥50%，且呈陽性，則可以判定其超標。如果檢驗時使用比色法，也就是分光光度法，其檢出限時間以3 min為準。

2 農(nóng)藥殘留快速檢測流程

蔬菜中一旦有農(nóng)藥殘留，必然會影響人們的身體健康，必須使用可行的檢測技術(shù)展開農(nóng)藥殘留檢測，檢驗蔬菜是否符合食品安全標準，從根本上解決食品安全問題?，F(xiàn)如今，農(nóng)藥檢測所使用的方法主要有生物測定法、化學分析法、生物與化學相融合的綜合檢測法，這3種方法可以更加準確且全面地檢測、分析蔬菜中農(nóng)藥殘留。所選擇的檢測技術(shù)不同，操作方式也不盡相同。為了快速、準確的完成蔬菜農(nóng)藥殘留檢測，檢測人員必須選擇最合適的快速檢測技術(shù)。同時，實際選擇過程中，必須要對蔬菜特性進行考慮[3]。蔬菜的儲存時間較短，檢測期間務必要提高效率，在有限的時間內(nèi)快速、高效地完成檢測。所以，此次分析中主要圍繞酶法快速檢測技術(shù)展開分析。實際檢測時，農(nóng)藥殘留快速檢測流程分為采樣、提取液、選擇實驗試劑、明確靜置時間、確定檢測時間這幾個步驟。

2.1 取樣

所選擇的葉類蔬菜主要選取葉尖部分，果菜選取果皮，使用剪刀將其剪為1 cm左右的試樣，重量以2 g為最佳。針對汁液內(nèi)包含酶破壞性、深色物質(zhì)褪色元素的果蔬（如辣椒、蘿卜、番茄）以及可以使最終結(jié)果呈現(xiàn)假陽性的蔬菜（如芹菜），取樣時需要將整株浸泡于器皿中，或者采用淋噴的方式。

2.2 提取液

使用提取液來提取樣品內(nèi)農(nóng)藥溶解，提取時間以2～10 min為最佳。

2.3 選擇試劑

蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測中比較常用的快速檢測試劑有提取液、酶底物以及顯色劑。一般所采用的試劑均是從儀器的生產(chǎn)廠家直接選購、配送[4]。

2.4 明確靜置時間

靜置時間是摻入酶與顯色劑之后到摻入底物中的時間。實驗過程中發(fā)現(xiàn)，靜置時間如果維持在6～12 min，最終獲得的檢測結(jié)果并不明顯差異。

2.5 確定檢測時間

檢測時間是比色皿放置于比色池中，將蓋板蓋在上方，按下啟動鍵直到顯示最終檢測結(jié)果的這一段時間，一般設置為3 min。

3 蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測技術(shù)實踐

3.1 應用范圍與類型

使用酶法進行蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測，其適用范圍包括葉菜類、果菜類、瓜菜類等，這些種類的蔬菜中含有有機磷類以及氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留，有機磷類農(nóng)藥主要包括倍硫磷、氧化樂果和辛硫磷，而氨基甲酸酯類農(nóng)藥則包括殘殺威、克百威、速滅威以及滅多威。

3.2 檢測設備和樣品的處理

檢測設備包括GDYN-110SB型農(nóng)藥殘毒快速檢測儀、天平、振蕩器、魄力器皿、檢測酶、移液槍、緩沖液、底物與顯示器等。當完成設備的準備工作之后，必須處理實驗所需樣品，將準備好的蔬菜樣品稱取1 g放置于燒杯內(nèi)，并且在燒杯中注入5 mL緩沖液，以濕震蕩法持續(xù)60～120 s，將提取液倒出之后靜置3～5 min即可。

3.3 培養(yǎng)樣品溶液

在干試管內(nèi)放入容量為2.5 mL的樣品提取液，選擇相對應的對照液，分別在樣品提取液和對照液中注入0.1 mL的酶液與顯色劑，將試管搖晃均勻之后，放置在溫度為37 ℃的恒溫箱內(nèi)15 min，隨后在試管內(nèi)注入容量為0.1 mL的底物，隨后觀察顯色是否出現(xiàn)反應，放置到快速檢測儀器內(nèi)，根據(jù)儀器操作要求完成蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測工作。

3.4 檢測結(jié)果

最終所得出的結(jié)果判斷可以通過抑制率進行判斷：

公式中，Δ0代表對照液反應3 min之后，吸光度所呈現(xiàn)的變化值，Δt是3 min之后樣品所呈現(xiàn)的吸光度變化值。

對最終檢測結(jié)果進行分析，以抑制率為最終結(jié)果，設置50%為界限。若蔬菜樣品計算后的抑制率＜50%，證明蔬菜農(nóng)藥殘留率滿足食品安全要求，即蔬菜樣品安全；若≥50%且多次試驗之后結(jié)果依然不變，則證明蔬菜樣品農(nóng)藥殘留超標，即蔬菜本身不安全。為了深入展開殘留超標樣品，建議試驗氣相色譜儀以及高效液相儀這兩個設備展開詳細檢測，如此便可以得知蔬菜內(nèi)農(nóng)藥殘留含量。

通過上述分析可知，使用酶法可以快速且高效地完成蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測，試驗所消耗的時間小于20 min，且經(jīng)過驗證最終試驗準確性較高，可以保證檢測后蔬菜安全性。

4 結(jié)語

蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測是保證蔬菜食品安全以及人體健康的重要舉措，應用可行的蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測技術(shù)，有利于解決市場上蔬菜農(nóng)藥殘留問題，并且推動我國農(nóng)業(yè)發(fā)展。