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    多孔功能性PLA/納米氧化鈰復(fù)合纖維的制備及性能

    2018-08-01 07:04:26張恒飛孟靜靜常玉雪周宏艷
    中國塑料 2018年7期
    關(guān)鍵詞:表面張力紡絲靜電

    李 玥,張恒飛,孟靜靜,常玉雪,周宏艷

    (河南工程學(xué)院材料與化學(xué)工程學(xué)院,鄭州 450007)

    0 前言

    PLA是以乳酸為主要原料聚合得到的聚合物,可以生物降解,實(shí)現(xiàn)在自然界中的循環(huán),是理想的綠色高分子材料[1-5]。此外,PLA本身還具有良好的生物相容性,目前被廣泛的應(yīng)用在醫(yī)療領(lǐng)域,如手術(shù)縫合線、防粘連膜、骨填充材料等[6-8]。但是,PLA本身只具備良好的生物相容性,不具備生物活性,因而需要對其進(jìn)行改性以提高其生物活性[9-11]。文獻(xiàn)表明,CeO2具有良好的促進(jìn)成骨細(xì)胞生長和分化性能,因而將CeO2復(fù)合能夠賦予PLA一定的功能性,從而拓寬其應(yīng)用范圍[12-13]。但是,PLA/CeO2復(fù)合材料無法直接應(yīng)用到醫(yī)療中,需對其進(jìn)行加工。靜電紡絲技術(shù)是目前較為成熟的一種制備超細(xì)纖維膜的一種技術(shù),其能夠紡制具有可生物降解性、生物相容性并且無毒無害的聚合物的納米級超細(xì)纖維,不僅保留其自身的優(yōu)良性能,而且可制作腫瘤治療載體材料、組織工程支架材料、藥物釋放載體材料,在醫(yī)學(xué)中適用于創(chuàng)傷修復(fù)和移植涂膜等方面[14-18]。本文利用靜電紡絲技術(shù),制備了PLA/CeO2靜電紡絲復(fù)合纖維,并系統(tǒng)地表征了CeO2對溶液的性質(zhì)、電壓和CeO2用量對纖維直徑、CeO2對細(xì)胞在PLA/CeO2纖維膜上增殖的影響,期望為PLA/CeO2的實(shí)際應(yīng)用提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

    1 實(shí)驗(yàn)部分

    1.1 主要原料

    PLA,粉料,相對分子質(zhì)量為50 000,濟(jì)南岱罡生物科技有限公司;

    CeO2,純度>99.99 %,平均顆粒直徑為25 nm,上海晶純生化科技股份有限公司;

    二氯甲烷,分析純(含量≥99 %),天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司;

    N-N二甲基甲酰胺(DMF),分析純(含量≥99 %),上海晶純生化科技股份有限公司;

    小鼠成骨前體細(xì)胞,MC3T3-E1,暨南大學(xué)生物工程學(xué)院實(shí)驗(yàn)室凍存;

    堿性磷酸酶試劑盒,南京建成生物工程研究所;

    DMEM低糖培養(yǎng)基(含有多種氨基酸以及葡萄糖的培養(yǎng)基)、胎牛血清,美國Gibco公司。

    1.2 主要設(shè)備及儀器

    旋轉(zhuǎn)黏度計(jì),NDJ-1,上海平軒科學(xué)儀器有限公司;

    全自動(dòng)表面張力儀,QBZY,上海方瑞儀器有限公司;

    電導(dǎo)率儀,DDB-303A,上海儀電科學(xué)儀器股份有限公司;

    差示掃描量熱儀(DSC),Q20,美國TA公司;

    X射線衍射儀(XRD),D8ADVAE,德國布魯克公司;

    掃描電子顯微鏡(SEM),Quanta 250,捷克FEI公司;

    SANS拉力機(jī),CMT8501,深圳新三思集團(tuán)。

    1.3 樣品制備

    靜電紡絲液的配制:在制備PLA/CeO2共混體系靜電紡絲溶液時(shí),以二氯甲烷和DMF的混合溶劑(DMF與二氯甲烷體積比為3∶7)將PLA溶解,同時(shí)借助超聲震蕩儀對PLA進(jìn)行扶助溶解,同時(shí)能夠使CeO2在溶劑PLA溶液中充分分散,盡可能地減少CeO2在PLA溶液中形成團(tuán)聚,從而對紡絲產(chǎn)生影響;同時(shí)根據(jù)本課題組之前的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,PLA靜電紡絲液的最佳濃度為10 %(質(zhì)量分?jǐn)?shù),下同),故在本文中PLA的濃度統(tǒng)一為10 %;此外,CeO2在PLA/CeO2復(fù)合體系中的濃度為0 %、0.5 %、1.0 %、2.0 %、4.0 %和8.0 %;在室溫下,將不同質(zhì)量干燥后的CeO2粉末添加到10 %的PLA溶液中,磁力攪拌12 h,超聲除氣泡后備用;

    PLA/CeO2復(fù)合纖維膜的制備:將配置好的不同CeO2含量的PLA/CeO2紡絲溶液在靜電紡絲機(jī)中紡成復(fù)合膜;紡絲電壓為20~28 kV,紡絲機(jī)設(shè)備溫度為35 ℃,靜電紡絲液的注射速率為1.0 mL/h,每個(gè)比例的復(fù)合膜紡絲時(shí)間為6 h。

    1.4 性能測試與結(jié)構(gòu)表征

    分別采用旋轉(zhuǎn)黏度計(jì)測試不同CeO2用量的PLA/CeO2復(fù)合靜電紡絲溶液的黏度,測試溫度為25 ℃,旋轉(zhuǎn)速度為12 r/min;采用全自動(dòng)表面張力儀測試不同CeO2用量的PLA/CeO2復(fù)合靜電紡絲溶液的表面張力,測試溫度為25 ℃;采用電導(dǎo)率儀測試不同CeO2用量的PLA/CeO2復(fù)合靜電紡絲溶液的電導(dǎo)率,測試溫度為25 ℃;

    PLA/CeO2復(fù)合纖維膜形貌的觀察:將所得到的不同CeO2含量、不同紡絲電壓下的PLA/CeO2復(fù)合纖維膜噴金處理后,通過SEM觀察纖維膜的形貌;

    PLA/CeO2復(fù)合纖維膜的DSC分析:將不同CeO2含量的PLA/CeO2復(fù)合纖維膜干燥后,剪取約6~10 mg的放到DSC坩堝內(nèi),在氮?dú)鈿夥障?,?0 ℃/min的升溫速率升溫至200 ℃,記錄升溫曲線;在200 ℃恒溫5 min,然后以20 ℃/min的速率降溫至25 ℃;

    CeO2對PLA/CeO2纖維膜細(xì)胞增殖的影響:MC3T3-E1細(xì)胞株在含10 %小牛血清的細(xì)胞培養(yǎng)液DMEM中培養(yǎng);將細(xì)胞置于37 ℃、5 %的CO2和95 %濕度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),每2 d換一次培養(yǎng)液;同時(shí)將不同CeO2用量的PLA/CeO2靜電紡絲膜剪成直徑約為14 mm的圓形,放入24孔板中,每個(gè)PLA/CeO2比例的材料設(shè)置5個(gè)復(fù)孔,然后用75 %的醫(yī)用酒精將材料浸泡過夜,然后用磷酸緩沖鹽溶液(PBS)清洗3次,紫外滅菌3 h,然后用含10 %小牛血清的完全培養(yǎng)基浸泡1 h;培養(yǎng)接近融合的MC3T3-E1細(xì)胞,以0.25 %胰蛋白酶消化液制成細(xì)胞懸液,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),然后稀釋成約1×104個(gè)/mL,將細(xì)胞懸液接種于放置材料的24孔板中,每孔加1 mL,37 ℃、5 %的CO2條件下孵育1、4、7 d;實(shí)驗(yàn)組為:在有材料的孔內(nèi)1 mL、1×104個(gè)/mL的細(xì)胞懸液,其中材料分別為:PLA,PLA/0.5 %CeO2,PLA/1.0 %CeO2,PLA2.0 %/CeO2,PLA/4.0 %CeO2的靜電紡絲膜;在細(xì)胞接種后的1、4、7 d分別取出一塊24孔板,吸出培養(yǎng)液,然后每孔加入含有10 % CCK-8的完全培養(yǎng)液350 μL,然后在細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)孵育4 h,4 h后將在每個(gè)培養(yǎng)孔中吸取100 μL的液體加入96孔板中,然后用酶聯(lián)免疫檢測儀于450 nm處測定吸光度值。

    2 結(jié)果與討論

    2.1 PLA/CeO2靜電紡絲液的性質(zhì)

    靜電紡絲溶液性質(zhì)對于靜電紡絲是否能夠順利進(jìn)行有著重要影響,尤其是黏度、電導(dǎo)率和表面張力對靜電紡絲的影響尤為重要,因此,本文對不同CeO2用量的PLA/CeO2靜電紡絲液的黏度、電導(dǎo)率和表面張力進(jìn)行了表征,如表1所示。從表1可以看出,不同CeO2用量的PLA/CeO2復(fù)合靜電紡絲液的黏度基本無變化,主要是因?yàn)镃eO2的用量較小,不足以引起復(fù)合靜電紡絲液的變化。PLA/CeO2復(fù)合靜電紡絲液的表面張力隨CeO2用量的增加而逐漸減小,且CeO2用量為8.0 %時(shí)減少較多,由于在紡絲過程中,溶液的表面張力較小時(shí),在紡絲的過程中比較容易形成液滴,因而CeO2用量為8.0 %時(shí),不適合進(jìn)行靜電紡絲。此外,PLA/CeO2復(fù)合靜電紡絲液的電導(dǎo)率隨CeO2的用量的增加而逐漸增加,這主要是由于CeO2本身是一種半導(dǎo)體材料,當(dāng)其在溶液中的用量較多的時(shí)候,相應(yīng)的溶液的電導(dǎo)率也逐漸增加。

    表1 PLA/CeO2靜電紡絲液的性質(zhì)Tab.1 The properties of PLA/CeO2 electrospinning solution

    2.2 PLA/CeO2復(fù)合靜電紡絲纖維

    (a)×1 000 (b)×5 000圖1 PLA多孔纖維SEM照片F(xiàn)ig.1 SEM image of PLA fiber

    多孔纖維主要包括纖維之間的空隙和纖維本身的孔,利用靜電紡絲技術(shù),通過控制靜電紡絲的條件,可以紡制出多孔靜電紡絲膜。如圖1所示,PLA靜電紡絲纖維在絲與絲之間存在著約5 μm大小的空隙,且在PLA纖維的表面也存在著納米級的孔。纖維的比表面積得到了大幅的提升,這說明由PLA/CeO2雜化超細(xì)纖維在諸多領(lǐng)域具有應(yīng)用潛力,如醫(yī)用材料和吸附材料等。

    2.3 電壓對PLA/CeO2復(fù)合纖維的影響

    在靜電紡絲的實(shí)驗(yàn)過程中,紡絲的主要推動(dòng)力就是電場力,當(dāng)電場力過小時(shí),將會(huì)對溶液的噴射以及纖維的成型造成影響,當(dāng)電壓過高時(shí)又會(huì)造成溶劑的揮發(fā)問題,因而本文研究了靜電紡絲電壓對于PLA纖維直徑的影響。在不同電壓下進(jìn)行靜電紡絲,得到PLA/CeO2超細(xì)纖維,通過SEM進(jìn)行對纖維進(jìn)行觀察,如圖2所示。從圖2可以看出,隨著靜電紡絲電壓的增加,得到的纖維直徑先減小后增加,通過對不同電壓下得到的纖維進(jìn)行測量(每個(gè)電壓統(tǒng)計(jì)100根纖維,取平均值),如圖3所示。從圖3可以看出,紡絲電壓在26 kV時(shí),PLA纖維的直徑最小,約為880 nm。其可能的原因是隨著電壓的增加“泰勒錐”表面電荷較多,電荷形成的場力對液滴的拉伸作用加強(qiáng),破壞了原有的“電場力 - 表面張力”的之間的平衡,最終導(dǎo)致纖維變細(xì),在電壓為26 kV時(shí)達(dá)到最小值。但是當(dāng)紡絲電壓為28 kV時(shí),纖維變粗,這時(shí)在泰勒錐表面積聚的電荷較多,泰勒錐變得不穩(wěn)定,因而形成的纖維變得不穩(wěn)定,因而形成的纖維直徑分布不均勻,同時(shí)由于電壓較高時(shí),泰勒錐射流過快,導(dǎo)致溶劑不能夠完全揮發(fā),導(dǎo)致纖維不夠緊密,最后統(tǒng)計(jì)的結(jié)果就是纖維直徑增加,且分布不均勻。因而,通過對比可知,在電壓為26 kV的條件下紡制出的纖維直徑最小,因此確定出最優(yōu)紡絲電壓。

    2.4 CeO2添加量對PLA/CeO2復(fù)合纖維的影響

    根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果,采用最優(yōu)紡絲電壓(26 kV),研究不同CeO2添加量對PLA/CeO2復(fù)合纖維的影響。從圖4中可以看出,在不同添加量的情況下,紡制出的纖維形貌具有一定差別,純PLA纖維表面較為光滑且纖維粗細(xì)較為均勻,直徑大小基本一致,當(dāng)開始加入CeO2時(shí),可以發(fā)現(xiàn),纖維的表面開始出現(xiàn)孔洞,這也是本文的目的所在,隨著CeO2用量的不斷增加,纖維

    電壓/kV:(a)20 (b)22 (c)24 (d)26 (e)28圖2 不同電壓下復(fù)合纖維的SEM照片F(xiàn)ig.2 SEM images of ultrafine PLA/CeO2 fibers prepared by electrospinning at different voltages

    圖3 電壓對PLA纖維直徑的影響Fig.3 The effect of voltages on thediameter of PLA fiber

    照片類型,CeO2用量/%:(a)SEM,0 (b)SEM,0.5 (c)SEM,1.0(d)SEM,2.0 (e)SEM,4.0 (f)TEM,2.0圖4 不同CeO2用量對PLA/CeO2復(fù)合纖維直徑的影響的SEM和TEM照片F(xiàn)ig.4 SEM and TEM image of PLA/CeO2 composite fiber with different content of CeO2

    圖5 CeO2用量對PLA/CeO2復(fù)合纖維直徑的影響Fig.5 The effect of CeO2 content on the diameter ofPLA/CeO2 composite fiber

    表面變得越來越粗糙,孔洞數(shù)目不斷增加。此外,圖4中CeO2用量為2 %時(shí)的TEM圖顯示出纖維表面變得粗糙,且并未看到CeO2團(tuán)聚體,說明CeO2在纖維中的分散較為均勻。從圖5中可以看出,CeO2用量為4 %時(shí),CeO2分散在PLA機(jī)體中,且有少量的CeO2在PLA表面團(tuán)聚成了小顆粒,但是由于PLA表面僅有少量孔的緣故,故未觀察到CeO2在PLA內(nèi)部的分散情況。此外,對圖4中的纖維進(jìn)行統(tǒng)計(jì)后(各取100根,取平均值),得到纖維直徑隨CeO2用量變化的曲線,如圖5所示。從圖5可以看出,隨著CeO2用量的增加,PLA/CeO2復(fù)合纖維的直徑先減小后增加,在CeO2用量為1 %時(shí)達(dá)到最小值,且當(dāng)CeO2用量過多時(shí),纖維的直徑逐漸增加,且纖維的直徑分布逐漸變寬,造成粗細(xì)不均勻的現(xiàn)象。因而,在CeO2用量為1 %時(shí)是實(shí)驗(yàn)所需的最佳添加量,此時(shí)PLA/CeO2復(fù)合纖維的直徑最小,且較為均勻,同時(shí)纖維上有較多的孔洞,能夠滿足實(shí)驗(yàn)需求。

    2.5 熱性能和結(jié)晶性能

    1—PLACeO2用量/%:2—0.5 3—1.0 4—2.0 5—4.0圖6 不同CeO2用量時(shí)PLA/CeO2復(fù)合纖維的DSC升溫曲線Fig.6 DSC heating curves of PLA/CeO2 with different content of CeO2

    1—PLACeO2用量/%:2—0.5 3—1.0 4—2.0 5—4.0圖7 不同CeO2用量時(shí)PLA/CeO2復(fù)合纖維的DSC降溫曲線Fig.7 DSC cooling curves of PLA/CeO2 with different content of CeO2

    圖6和圖7分別為不同CeO2用量的PLA/CeO2復(fù)合纖維的DSC一次升溫和降溫曲線,主要是為了研究CeO2的用量對PLA的熱性能和結(jié)晶性能的影響。從圖6中可以看出,純PLA有多重熔融峰,說明PLA靜電紡絲纖維中含有2種晶型。當(dāng)在PLA靜電紡絲液中添加一定量的CeO2的后,PLA/CeO2復(fù)合纖維中的低溫熔融峰逐漸變小,而高溫熔融峰逐漸變大,且在CeO2用量為1.0 %時(shí),低溫熔融峰消失,全部轉(zhuǎn)變?yōu)楦邷厝廴诜澹覉D7中降溫曲線中也顯示出,CeO2用量為1 %時(shí)的結(jié)晶溫度較PLA有所升高,說明CeO2能夠促進(jìn)PLA纖維的結(jié)晶性能,能夠促使PLA形成晶格較為緊密的晶體。這主要是由于CeO2在溶劑揮發(fā)的過程中,能夠作為晶核,促進(jìn)PLA分子鏈依附在其表面排列,形成了較為致密的晶格。但是,當(dāng)CeO2用量為4.0 %時(shí),又出現(xiàn)了小的低溫熔融峰,降溫曲線中CeO2用量為4 %時(shí)的結(jié)晶溫度與CeO2用量為2 %相比也有所降低,這可能是由于CeO2用量較多,在PLA纖維中的分散性變差所導(dǎo)致的。此外,從圖中還可以看出,純PLA纖維出現(xiàn)了較大的冷結(jié)晶峰,說明PLA結(jié)晶不完善,當(dāng)體系中添加了少量的CeO2之后,冷結(jié)晶峰逐漸變?nèi)酰以贑eO2用量為1.0 %和2.0 %時(shí),冷結(jié)晶峰基本消失,說明CeO2促進(jìn)了PLA的結(jié)晶。與熔融峰一致的是,當(dāng)CeO2用量為4.0 %時(shí),PLA/CeO2復(fù)合纖維又出現(xiàn)了冷結(jié)晶峰,這說明在CeO2用量為4.0 %時(shí),復(fù)合纖維的結(jié)晶性能變?nèi)?,也是由于CeO2在PLA纖維中團(tuán)聚所導(dǎo)致的。

    2.6 CeO2對PLA/CeO2纖維膜細(xì)胞增殖的影響

    CeO2用量/%:■—0.5 ■—1.0 —2.0 —4.0 □—0圖8 CeO2用量對復(fù)合纖維膜細(xì)胞增殖的影響Fig.8 The effect of CeO2 content on the cell proliferation

    從圖8中可以看出,在1、4、7 d時(shí),不同材料組的吸光度值均大于空白組,這說明了添加了CeO2的PLA/CeO2復(fù)合纖維對細(xì)胞是無毒的,具有良好的生物相容性,同時(shí)還可以說明PLA靜電紡絲膜對于細(xì)胞的增殖具有一定的促進(jìn)作用。同時(shí)還可以看出,PLA/CeO2系列的靜電紡絲膜的吸光度值均大于單純的PLA紡絲膜,且CeO2添加量越高,其吸光度值越大,這說明了CeO2對于具有相當(dāng)明顯的細(xì)胞增殖的促進(jìn)作用,這是因?yàn)镃eO2是一種生物相容性較好,能夠促進(jìn)細(xì)胞生長的材料,將其于PLA進(jìn)行復(fù)合后能發(fā)揮PLA和CeO2的特性。

    3 結(jié)論

    (1)CeO2的用量對PLA/CeO2靜電紡絲液的黏度基本無影響;但隨著CeO2用量的增加,靜電紡絲液的表面張力逐漸下降,電導(dǎo)率逐漸提高;

    (2)隨著紡絲電壓的增加,PLA靜電紡絲纖維的直徑先減小后增加,且電壓較高時(shí),纖維直徑分布逐漸變寬;

    (3)CeO2的添加使PLA/CeO2復(fù)合纖維變細(xì),較多的CeO2形成團(tuán)聚體后導(dǎo)致纖維變粗,直徑分布變差;

    (4)CeO2使PLA/CeO2復(fù)合纖維從多重熔融峰轉(zhuǎn)變?yōu)閱沃厝廴诜?,且有效促進(jìn)了PLA的結(jié)晶;當(dāng)CeO2用量過多時(shí),結(jié)晶性能下降,重新轉(zhuǎn)變?yōu)槎嘀厝廴诜澹?/p>

    (5)PLA/CeO2復(fù)合薄膜具有良好的生物相容性,隨CeO2含量的增加,對細(xì)胞增殖的促進(jìn)作用更加明顯。

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