Oct4蛋白對(duì)前列腺癌雄激素剝奪治療后進(jìn)展速度的預(yù)測(cè)價(jià)值分析

薛 煒，邱建新，桑 楠，張志明

目前，臨床對(duì)于前列腺癌的致病原因及具體發(fā)病機(jī)制尚未完全闡述清楚[1]，但有相關(guān)生物學(xué)研究顯示，前列腺癌是指主要發(fā)生在前列腺的上皮性惡性腫瘤，根據(jù)其不同發(fā)病原因及疾病的不同進(jìn)展情況可有多種病理表現(xiàn)類型，其中腺癌最常見[2-3]。而相關(guān)資料曾報(bào)道，目前我國大多數(shù)前列腺癌患者在其確診時(shí)已失去最佳根治治療時(shí)機(jī)，故雄激素剝奪治療為該類患者首選的臨床治療方案[4]。但有研究發(fā)現(xiàn)，經(jīng)雄激素剝奪治療的前列腺癌患者往往有部分治療后可進(jìn)展為去勢(shì)抵抗性前列腺癌，若不及時(shí)予以有效控制，當(dāng)病情繼續(xù)發(fā)展時(shí)可存在極差的預(yù)后效果[5-6]。故找尋影響前列腺癌病情發(fā)展和進(jìn)展以及導(dǎo)致去勢(shì)抵抗性前列腺癌出現(xiàn)的相關(guān)因素并及時(shí)予以干預(yù)是改善前列腺癌患者預(yù)后的關(guān)鍵措施。曾有文獻(xiàn)表明，在不同預(yù)后的前列腺癌患者中其相關(guān)蛋白的表達(dá)存在一定的差異，但具體蛋白種類尚未明確[7-8]。本研究回顧性分析了前列腺癌108例的臨床及隨訪資料，旨在探討八聚體結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子4(Oct4)蛋白對(duì)前列腺癌雄激素剝奪治療后進(jìn)展速度的預(yù)測(cè)價(jià)值?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1臨床資料 選取2010年1月—2014年12月我院收治的前列腺癌108例，均為男性，年齡38～85(56.20±10.26)歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①均符合2012年世界衛(wèi)生組織(WHO)中前列腺癌明確診斷標(biāo)準(zhǔn)[9]；②均經(jīng)相關(guān)臨床及病理檢查等確診；③均經(jīng)雄激素剝奪治療且符合其治療標(biāo)準(zhǔn)；④本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)；⑤所有患者及家屬均知情同意并簽署知情同意書參與本研究。排除標(biāo)準(zhǔn)：①存在原發(fā)性肝腎功能障礙及其他系統(tǒng)嚴(yán)重疾病者；②除前列腺癌外存在其他惡性腫瘤者；③存在雄激素剝奪治療的禁忌證者；④臨床及隨訪資料不完整者。

1.2方法 采用回顧性分析法分析納入本研究108例前列腺癌患者的臨床及隨訪資料，根據(jù)資料結(jié)果可知所有前列腺癌患者在確診后均采用雄激素剝奪治療，且治療結(jié)束后均進(jìn)行了3年的隨訪，在治療及隨訪過程中均記錄年齡、病程、體質(zhì)量指數(shù)等臨床資料、疾病情況及治療后進(jìn)展為去勢(shì)抵抗性前列腺癌狀況，檢測(cè)Oct4蛋白等相關(guān)臨床指標(biāo)水平。

1.3觀察指標(biāo)及檢測(cè)方法 根據(jù)臨床和隨訪資料記錄患者年齡、病程、體質(zhì)量指數(shù)、腫瘤分級(jí)、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等疾病情況及前列腺特異性抗原(PSA)和Oct4蛋白水平，無進(jìn)展生存期和去勢(shì)抵抗性前列腺癌的發(fā)生情況，并比較Oct4蛋白不同表達(dá)及不同前列腺癌患者上述資料的差異。腫瘤分級(jí)通過Gleason評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)[10]可將其分為低分化、中分化和高分化；臨床分期采用2002年AJCC的TNM分期系統(tǒng)[11]進(jìn)行評(píng)價(jià)。PSA檢測(cè)方法：所有患者在檢測(cè)當(dāng)日清晨于空腹?fàn)顟B(tài)下抽取靜脈血5 ml，以3000 r/min離心10 min后分離血清，并將其置于-70℃的環(huán)境中進(jìn)行貯存以待檢測(cè)，通過酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)PSA水平。Oct4蛋白檢測(cè)方法：前列腺癌穿刺石蠟標(biāo)本連續(xù)4 μm厚切片，采用EnVision染色方法，分別檢測(cè)癌組織中Nanog蛋白的表達(dá)情況，具體流程嚴(yán)格按說明書進(jìn)行。已知陽性組織切片作為陽性對(duì)照，PBS代替一抗作陰性對(duì)照。結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)：Oct4蛋白陽性著色表達(dá)于細(xì)胞核，呈黃色、棕黃色、褐色顆粒[12]。本研究采用光鏡下對(duì)每一張切片每一個(gè)視野中的陽性著色細(xì)胞數(shù)、著色強(qiáng)度評(píng)分應(yīng)用半定量方法進(jìn)行評(píng)價(jià)。根據(jù)著色強(qiáng)度：0分為無色，1分為淡黃色，2分為棕黃色，3分為褐色、黑色；根據(jù)陽性細(xì)胞比例：陽性細(xì)胞數(shù)目所占比例<10%為1分、陽性細(xì)胞所占比例11%～50%為2分、陽性細(xì)胞數(shù)51%～75%為3分、陽性細(xì)胞數(shù)所占比例<75%為4分，兩種積分相乘總分≤3分為陰性、>3分為陽性。無進(jìn)展生存期定義標(biāo)準(zhǔn)：為所有患者從雄激素剝奪治療開始至血清總PSA連續(xù)2次升高的時(shí)間[13]。去勢(shì)抵抗性前列腺癌診斷標(biāo)準(zhǔn)：血清睪酮值達(dá)到去勢(shì)水平(<50 μg/L或<17 nmol/L)；連續(xù)3次測(cè)得血清PSA值升高，較最低值升高≥50%[14]。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 18.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料以率或構(gòu)成比(%)表示，采用χ2檢驗(yàn)，采用Log-rank檢驗(yàn)和Cox比例風(fēng)險(xiǎn)回歸模型分別對(duì)前列腺癌患者出現(xiàn)去勢(shì)抵抗性前列腺癌進(jìn)行單因素和多因素分析。α=0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn)。

2 結(jié)果

2.1前列腺癌患者臨床及隨訪資料 108例前列腺癌患者經(jīng)雄激素剝奪治療后其中位無進(jìn)展生存期為28個(gè)月(14～36個(gè)月)，其中Oct4蛋白陽性表達(dá)率為57.41%，血清PSA水平≥50 pg/ml比例為72.22%，而治療后有35.19%的前列腺癌患者進(jìn)展為去勢(shì)抵抗性前列腺癌。見表1。

表1 108例前列腺癌患者臨床及隨訪資料

注：PSA為前列腺特異性抗原，Oct4為11聚體結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子4

2.2不同Oct4蛋白表達(dá)的前列腺癌患者臨床資料比較 腫瘤低分化、出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、PSA水平≥50 pg/ml及治療后進(jìn)展為去勢(shì)抵抗性前列腺癌的前列腺癌患者其Oct4蛋白的陽性表達(dá)率較高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，P<0.01)。見表2。

2.3影響前列腺癌患者出現(xiàn)去勢(shì)抵抗性前列腺癌的單因素分析 不同年齡、腫瘤分級(jí)、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、PSA水平及Oct4蛋白表達(dá)的前列腺癌患者間其治療后進(jìn)展為去勢(shì)抵抗性前列腺癌的發(fā)生率比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

2.4影響前列腺癌患者出現(xiàn)去勢(shì)抵抗性前列腺癌的多因素分析 經(jīng)Cox比例風(fēng)險(xiǎn)回歸模型分析顯示，Oct4蛋白陽性表達(dá)為導(dǎo)致前列腺癌患者經(jīng)雄激素剝奪治療后進(jìn)展為去勢(shì)抵抗性前列腺癌的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P<0.05)。見表4。

3 討論

近年來，隨著人們生活習(xí)慣和生活環(huán)境的改變，我國癌癥患者逐漸增多，相關(guān)數(shù)據(jù)報(bào)道，前列腺癌發(fā)病率在近年呈上升趨勢(shì)[15]。有相關(guān)數(shù)據(jù)報(bào)道，前列腺癌是歐美國家男性中最常見的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率在美國位居第一，而其病死率排名僅次于肺癌，已成為一個(gè)嚴(yán)重影響男性軀體健康和生活質(zhì)量的公共衛(wèi)生問題[16-18]。目前，臨床對(duì)于前列腺癌首選有效治療手段為手術(shù)切除治療，但對(duì)于部分晚期前列腺癌患者來說，手術(shù)治療已錯(cuò)失最佳時(shí)機(jī)，故雄激素剝奪治療在目前被公認(rèn)為是其首選有效治療手段[19]。但隨著治療時(shí)間延長，有學(xué)者發(fā)現(xiàn)部分前列腺癌患者在經(jīng)雄激素剝奪等內(nèi)分泌治療后進(jìn)一步進(jìn)展為去勢(shì)抵抗性前列腺癌，嚴(yán)重影響前列腺癌患者的治療效果及預(yù)后情況[20]，故找尋相關(guān)因素并降低去勢(shì)抵抗性前列腺癌的發(fā)生是改善前列腺癌患者預(yù)后的關(guān)鍵。

本研究結(jié)果顯示，在108例經(jīng)雄激素剝奪治療的前列腺癌患者中，Oct4蛋白陽性表達(dá)率為57.41%，血清PSA水平≥50 pg/ml的比例為72.22%，而治療后有35.19%的前列腺癌患者進(jìn)展為去勢(shì)抵抗性前列腺癌，符合既往研究報(bào)道[21]。本研究結(jié)果還顯示，腫瘤低分化、出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、PSA水平>50 pg/ml及治療后進(jìn)展為去勢(shì)抵抗性前列腺癌的前列腺癌患者Oct4蛋白陽性表達(dá)率均較高，提示Oct4蛋白與前列腺癌病情進(jìn)展及去勢(shì)抵抗性前列腺癌的發(fā)生均有一定的關(guān)系。結(jié)合以往臨床研究可知，Oct4基因?qū)儆诟杉?xì)胞轉(zhuǎn)錄因子的一種，其聯(lián)合Nanog和Sox2共同維持胚胎干細(xì)胞的自我更新和多向分化潛能[22]。

表2 不同Oct4蛋白表達(dá)的前列腺癌患者臨床資料比較(例)

注：PSA為前列腺特異性抗原，Oct4為11聚體結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子4

表3 影響前列腺癌患者出現(xiàn)去勢(shì)抵抗性前列腺癌的單因素分析(例)

注：PSA為前列腺特異性抗原，Oct4為11聚體結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子4

近年來，隨著研究的不斷深入，有研究結(jié)果顯示，在前列腺等多種惡性腫瘤組織中其Oct4基因呈異常表達(dá)[23]，且有相關(guān)研究證實(shí)，較正常前列腺組織而言，前列腺癌組織中Oct4基因的表達(dá)顯著升高，而在良性前列腺組織中其Oct4基因的表達(dá)類似于前列腺癌組織，由此可推斷Oct4基因在前列腺癌的發(fā)生中起著至為關(guān)鍵的作用[24-25]，本研究結(jié)果也符合上述理論。本研究結(jié)果還顯示，不同年齡、腫瘤分級(jí)、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、PSA水平及Oct4蛋白表達(dá)的前列腺癌患者間其治療后進(jìn)展為去勢(shì)抵抗性前列腺癌的發(fā)生率比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示Oct4與去勢(shì)抵抗性前列腺癌的發(fā)生也有著密切關(guān)系。相關(guān)文獻(xiàn)曾證實(shí)，一定水平的Oct4基因?qū)η傲邢侔┙M織的消退具有一定的促進(jìn)作用，但隨著Oct4表達(dá)水平的升高，可導(dǎo)致經(jīng)雄激素剝奪后腫瘤進(jìn)一步生長，從而加大去勢(shì)抵抗性前列腺癌發(fā)生的可能[26]，由此可見，Oct4基因蛋白的表達(dá)可在一定程度預(yù)測(cè)前列腺癌腫瘤生長及去勢(shì)抵抗性前列腺癌的發(fā)生。本研究經(jīng)Cox比例風(fēng)險(xiǎn)回歸模型分析顯示，Oct4蛋白陽性表達(dá)為導(dǎo)致前列腺癌患者經(jīng)雄激素剝奪治療后進(jìn)展為去勢(shì)抵抗性前列腺癌的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，由此則進(jìn)一步證實(shí)了Oct4基因蛋白與去勢(shì)抵抗性前列腺癌的相關(guān)性。

表4 影響前列腺癌患者出現(xiàn)去勢(shì)抵抗性前列腺癌的多因素分析

綜上所述，Oct4蛋白過多表達(dá)為導(dǎo)致前列腺癌患者經(jīng)雄激素剝奪治療后進(jìn)展為去勢(shì)抵抗性前列腺癌的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，可作為臨床預(yù)測(cè)去勢(shì)抵抗性前列腺癌發(fā)生的有效指標(biāo)之一。但本研究所選樣本含量過小及研究時(shí)間過短，對(duì)于Oct4蛋白表達(dá)是否受其他因素影響尚未明確，可加大樣本含量和延長研究時(shí)間進(jìn)一步深入研究。