南通市通州區(qū) 豬圓環(huán)病毒2型感染流行病學調(diào)查

吳鋒/江蘇省南通市通州區(qū)畜牧獸醫(yī)站

豬圓環(huán)病毒由國外學者Tischer在1974年首次發(fā)現(xiàn)，是目前已知最小的哺乳動物病毒，該病毒分為PCV1和PCV2兩種血清型。PCV1在世界范圍豬場中廣泛存在，但對豬無致病性，不會引起臨床癥狀，而PCV2可引起斷奶仔豬多系統(tǒng)衰落綜合征、豬繁殖障礙、豬皮炎和腎炎綜合征等多種豬圓環(huán)病毒相關疾病，PCV2于2001年在我國首次分離，迄今為止仍呈散發(fā)及地方性流行，對國內(nèi)養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟損失。

一、材料和方法

1.病料采集。2016年10月至2018年3月，在南通市通州區(qū)東社、十總、興仁、石港、劉橋、平潮6個鄉(xiāng)鎮(zhèn)的10個中小型豬場采集疑似發(fā)病和病死豬的肝、脾、肺、淋巴結、血液等病料62份，冷凍運輸至實驗室，剪取小塊組織加入1 mL PBS溶液后充分研磨，反復凍融3次后，凍存于-80℃冰箱中備用。

2.病毒核酸提取。按照TaKaRa MiniBEST Viral DNA Extraction Kit操作說明，從處理好的研磨組織及血液中提取病毒DNA，DNA直接作為模板進行PCV2的PCR檢測。

3. PCR檢測。以上述提取的DNA作為模板，利用針對PCV2 ORF2的特異性引物（表1）進行PCR鑒定，反應條件為：94℃變性30s，56℃退火30s，72℃延伸45s，共30個循環(huán)，4℃保溫。反應結束后取10μL樣品進行瓊脂糖凝膠電泳，凝膠成像儀中觀察結果。

表1 PCV2的檢測引物

二、結果與分析

1.臨床癥狀觀察。在南通市通州區(qū)6個鄉(xiāng)鎮(zhèn)共10個疑似發(fā)病的豬場采集病料，其中有8個豬場出現(xiàn)疑似PCV2感染癥狀，包括母豬流產(chǎn)、斷奶仔豬多系統(tǒng)衰落綜合征（PMWS）、喘氣等。

2.PCR鑒定。將采集病料提取DNA后，利用PCR鑒定PCV2感染情況，結果顯示（圖1），陽性對照能夠擴增出預期大?。?73bp）片段，陰性對照無目的條帶，62份待檢樣品中有41份為PCV2檢測陽性（表2）。

圖1 PCV2的PCR檢測結果

3.流行病學調(diào)查結果統(tǒng)計與分析。對疑似發(fā)病的10個豬場中采集的62份病料進行PCR檢測，檢測結果見表2，PCV2陽性率為66.1%，說明該地區(qū)中小型豬場的PCV2感染率較高。

表2

三、討論

PMWS自1991年在加拿大首次報道以來，陸續(xù)在世界范圍內(nèi)發(fā)生，PCV2是引起該病的主要病原，中國于2001年首次分離到該病毒，此后不斷蔓延，迄今已成為國內(nèi)養(yǎng)豬業(yè)的最重要病原之一。本研究中，疑似出現(xiàn)PCV2感染的病豬臨床癥狀表現(xiàn)為典型的PMWS（包括食欲下降，消瘦，腹瀉，腹股溝淋巴結腫大），呼吸癥狀（喘氣，咳嗽，呼吸困難），流產(chǎn)等，與此前報導的PCV2的臨床癥狀基本符合，隨后通過PCR鑒定進一步驗證了該癥狀病因為PCV2感染。

PCV2主要感染豬的免疫系統(tǒng)，引起免疫抑制，從而繼發(fā)其他病原的感染，對養(yǎng)豬業(yè)造成巨大危害，本研究結果顯示，該地區(qū)PCV2感染率較高，有繼發(fā)其他病原的風險，加強豬圓環(huán)病毒病的監(jiān)測和防控，對該地區(qū)養(yǎng)豬業(yè)的健康發(fā)展有著重要意義。

參考文獻（略）