豬鏈球菌病及其疫苗研究進(jìn)展

（萊州市程郭畜牧獸醫(yī)站，山東萊州 261400）

生豬養(yǎng)殖中，豬鏈球菌病有著較高的死亡率及危害性。該病菌致病力核心為毒素與酶的水平，組織中的細(xì)菌在干燥環(huán)境下可以存活幾周，在高消毒條件下則存活性較低。因此，通常消毒藥選擇5%石碳酸、0.1%升泵、2%福爾馬林溶液，有助于消毒殺菌作用。

1 豬鏈球菌病病原體分析

豬鏈球菌病病原體是不同種溶血性鏈球菌，為革蘭氏陽性球菌，結(jié)合血清學(xué)反應(yīng)可以劃分為20個(gè)血清群，其中A、B、C、D、E、F、L、R是核心，R、F群就是引發(fā)該病的主要原因?，F(xiàn)階段，豬鏈球菌病出現(xiàn)的流行的鏈球菌分為C群、L群、D群、關(guān)節(jié)炎、E群。其中，E群鏈球菌引發(fā)的淋巴結(jié)膿腫較為常見。C群能夠引發(fā)敗血性鏈球菌病，該病菌致病力在于毒素與酶的水平。

2 流行病學(xué)分析

鏈球菌無論人或動(dòng)物都有可能感染，生豬感染率較高。生豬感染豬鏈球菌病部位分為扁桃體、乳腺、鼻腔，在生豬肝脾、血液、大腦中都可以檢測(cè)到該病菌。病死生豬一旦未科學(xué)處理病菌就會(huì)立即擴(kuò)散；而傷口與呼吸道則是主要傳染手段，不論生豬年齡、性別，有著較高的死亡率與發(fā)病率。此外，架子豬集中表現(xiàn)為化膿性淋巴結(jié)炎；成年生豬不易感染。該病呈現(xiàn)散發(fā)性地方流行，新疫區(qū)發(fā)病率較高；夏秋為高發(fā)季節(jié)。

3 豬鏈球菌病疫苗進(jìn)展分析

3.1 疫苗研究進(jìn)度

目前，我國(guó)豬鏈球菌病疫苗分為弱毒苗與滅活苗。通過調(diào)查分析，傷害地區(qū)豬鏈球菌病病原主要為C群鏈球菌，帶有一定的R群豬鏈球菌2型，使用以上有目標(biāo)的菌株制成二聯(lián)滅活疫苗有助于該病控制。豬鏈球菌病對(duì)新生幼崽安全性達(dá)到100%，依次使用2株疫苗強(qiáng)毒株攻擊，對(duì)豬鏈球菌病2型可以達(dá)到全面防護(hù)。對(duì)C群的ATCC35246能夠達(dá)到90%的保護(hù)。注射后一個(gè)月內(nèi)生豬身體抵抗力有明顯提高，30～35d展開二免，6個(gè)月后仍然能夠達(dá)到較高水平。

通過對(duì)某地區(qū)臨床分離的20株豬源致病性豬鏈球菌病基因分型條件下，選擇分屬3個(gè)血清型的4株毒性較強(qiáng)、免疫原較高的豬鏈球菌用于苗株。實(shí)踐證明，這種疫苗對(duì)斷奶幼崽、育肥豬、懷孕母豬、白鼠有著較強(qiáng)的保護(hù)性，沒有不良反應(yīng)，適合應(yīng)用豬鏈球菌病的免疫整治。

3.2 基因工程疫苗基礎(chǔ)研究

豬鏈球菌的致病因子存在M蛋白，抗原性較強(qiáng)。所以，展開了M蛋白的提取與實(shí)驗(yàn)了豬鏈球菌病亞單位疫苗。有研究結(jié)合豬鏈球菌2型溶菌酶釋放蛋白與胞外蛋白因子的基因排序，不同設(shè)計(jì)形成一對(duì)引物，將豬鏈球菌2型分離株SS2---1基因組為模板，擴(kuò)大mrp基因1801--2513位序列與epf基因1785--2567位拍戲，建立原核表達(dá)載體pET32a-mrp、pET32a--epf，獲得誘導(dǎo)表達(dá)的不同中蛋白內(nèi)有免疫原性后，使用融合蛋白MRP-EPF免疫新西蘭兔，把最低致死量豬鏈球菌強(qiáng)毒株SS2-1攻擊，兔的成活率達(dá)到50%，超出某個(gè)表達(dá)產(chǎn)物。證明：串聯(lián)形式的融合蛋白是重要的保護(hù)性抗原。經(jīng)過串聯(lián)表達(dá)重組蛋白MRP-EPF，分析研發(fā)新一代亞單位疫苗可能性從而解決疫苗存在的影響因素。

3.3 豬鏈球菌2型疫苗研究和生產(chǎn)動(dòng)態(tài)

通過選擇豬鏈球菌2型SS2--1、SS2-06444SS2-7和SS2-N株對(duì)BALB/c小鼠 豬兔和普通小白鼠致病性展開實(shí)驗(yàn)，豬鏈球菌2型人工感染可能引發(fā)BALE/c白鼠與生豬發(fā)病。毒力因子融菌酶釋放蛋白與細(xì)胞外因子的表現(xiàn)型和其對(duì)BALB/c白鼠的致病性沒有較大關(guān)聯(lián)。BALB/c白鼠使用豬鏈球菌疫苗免疫實(shí)驗(yàn)的動(dòng)物模型。據(jù)相關(guān)報(bào)道：豬鏈球菌2型制苗候選菌株SS2--1與SS2--H的穩(wěn)定性檢驗(yàn)代表其有著較強(qiáng)的穩(wěn)定性，利用限定代次可以達(dá)到40代，是最佳疫苗生產(chǎn)菌株。

此外，有院校聯(lián)合獸醫(yī)站從10株馬鏈球菌獸疫亞種與豬鏈球菌2型分離株內(nèi)選擇毒性較強(qiáng)、免疫原性好的ATCC35246與HA9801株，制成氫氧化鋁膠二聯(lián)滅活疫苗。通過無菌與安全檢驗(yàn)并注射生豬體內(nèi)，注射量約2ml。15d后，對(duì)HA9801與ATCC35246的安全性達(dá)到100%與93%。使用二聯(lián)滅活疫苗4周，幼崽身體水平不斷提高，5周后逐漸降低；二次免疫后不斷升高，120d后依然保持理想水平。攻毒保護(hù)試驗(yàn)與抗體消長(zhǎng)規(guī)律檢測(cè)顯示，制備的豬鏈球菌病二聯(lián)滅活苗有著較強(qiáng)的免疫保護(hù)效果。

4 結(jié)語

伴隨著生豬養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展，豬鏈球菌病也隨之?dāng)U散，對(duì)生豬發(fā)育、養(yǎng)殖有著直接影響。除了豬鏈球菌2型外，C群獸疫鏈球菌依然是重要病原，損失嚴(yán)重且無法得到免疫保護(hù)。因此，在今后工作中加強(qiáng)對(duì)該病的控制尤為重要。養(yǎng)殖過程中，生豬一旦感染豬鏈球菌病及時(shí)進(jìn)行藥敏實(shí)驗(yàn)，科學(xué)用藥且選擇高效、低殘留的抗菌藥品，做好治療時(shí)間與量的控制。養(yǎng)殖過程中，做好疫苗免疫從而降低患病率。