復(fù)方芩連草顆粒的急性毒性試驗(yàn)研究

張郴 蘭慧 陽敬

摘 要：目的：研究復(fù)方芩連草顆粒的急性毒性，評價(jià)黃芩顆粒的安全性。方法：采用經(jīng)典的急性毒性試驗(yàn)方法對小鼠進(jìn)行急性毒性研究。結(jié)果：給藥組小鼠無1例死亡，與對照組比較給藥組小鼠的體重變化無顯著性差異，行為活動(dòng)未受影響，對給藥的小鼠尸解后未發(fā)現(xiàn)器官異常，未測得小鼠的黃芩顆粒的半數(shù)致死量（LD50），最大耐受量MTD為147.6g/kg。結(jié)論： 本試驗(yàn)從急性毒性試驗(yàn)研究結(jié)果分析，復(fù)方芩連草顆粒是一個(gè)安全的劑型。

關(guān)鍵詞：黃芩顆粒；急性毒性；試驗(yàn)研究

中圖分類號(hào)：R285.5 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1671-2064（2018）08-0192-02

大頭瘟是因感受天行邪毒侵犯三陽經(jīng)絡(luò)而引起的以頭面焮紅腫痛、發(fā)熱為主要特征的溫疫病。又稱大頭病、大頭風(fēng)、蝦蟆瘟、大頭天行等。多發(fā)于冬春兩季。由于人體正氣不足，感受時(shí)行風(fēng)熱邪毒而形成。初起邪毒在于衛(wèi)分，可見發(fā)熱微惡寒等表證，旋即熱毒燔灼肺胃膽經(jīng)，上攻顏面咽喉[1-3]。

復(fù)方芩連草顆粒源于萬密齋《保命歌括》黃芩黃連甘草湯，由黃芩、黃連、甘草三味藥組成，被歷代醫(yī)家譽(yù)為“經(jīng)方”，經(jīng)臨床使用具有清熱解毒，消腫止痛的功效。用于治療小兒大頭瘟。但湯劑服用量大，味道不佳，小兒難以服用，且湯劑不方便攜帶，因此特將黃芩黃連甘草湯開發(fā)成現(xiàn)代制劑復(fù)方芩連草顆粒。為使復(fù)方芩連草顆粒合理安全應(yīng)用應(yīng)用于臨床，本實(shí)驗(yàn)參照急性毒性實(shí)驗(yàn)方法，進(jìn)行復(fù)方芩連草顆粒的小鼠急性毒性試驗(yàn)[4-5]。

1 儀器與藥材

復(fù)方芩連草顆粒由紅河衛(wèi)生職業(yè)學(xué)院藥學(xué)教研室提供；JY201電子稱，上海民橋醫(yī)療器械有限公司生產(chǎn)；昆明種小鼠，清潔級(jí)，體重：20±2g，雌雄各半，分性別飼養(yǎng)于實(shí)驗(yàn)室內(nèi)。室溫20～26℃，相對濕度40%～70%，自然光源，排風(fēng)扇通風(fēng)2次/d，每次0.5h，雌雄分籠飼養(yǎng)，水（自來水）自由攝取，飼料為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物全價(jià)營養(yǎng)飼料。

2 方法與結(jié)果

2.1 預(yù)試驗(yàn)

在正式實(shí)驗(yàn)開始之前，以小規(guī)模小鼠數(shù)量做了預(yù)試驗(yàn)，以便為正式試驗(yàn)提供依據(jù)。隨機(jī)將16只小鼠分為2組，雌雄各半，一組作為空白組，另一組作為預(yù)實(shí)驗(yàn)組，試驗(yàn)給藥前禁食不禁水12h。給藥組：以可供灌胃的最大生藥濃度，即1.23g/ml，小鼠灌胃可承受的最大體積（每1g體重0.04ml）1次灌給；復(fù)方芩連草顆?？瞻捉M灌胃等量蒸餾水，方法同預(yù)實(shí)驗(yàn)組。給藥后常規(guī)飼養(yǎng)，觀察5d。結(jié)果小鼠全部存活.因此，無法測出該中藥制劑的LD50，說明該中藥復(fù)方制劑藥毒性很低，是較安全的，故測定本藥對小鼠的最大耐受量[6-7]。

2.2 最大耐受量的測定

在體重范圍內(nèi)，選取健康小鼠40只，雌雄各半，按性別隨機(jī)分為2組：對照組和復(fù)方芩連草顆粒組，每組20只。禁食不禁水15h后，復(fù)方芩連草顆粒藥物組生藥濃度為1.23g/ml，按（每10g體重0.4ml）的最大容積給藥，對照組給予等體積的純凈水。上述動(dòng)物按一天三次給藥，給藥間隔時(shí)間4小時(shí)，即上午（9：00）給藥1次，中午（13：00）給藥1次，下午（17：00）給藥1次，給藥間隔期間不進(jìn)食，給藥四小時(shí)后自由進(jìn)食、飲水。給藥后密切觀察小鼠的反應(yīng)情況，然后繼續(xù)觀察連續(xù)15d，每天稱取其體重并觀察動(dòng)物反應(yīng)。試驗(yàn)第15d稱取體重后，處死小鼠，解剖觀察其心、肝、脾、肺等主要器官的組織變化。

2.3 試驗(yàn)結(jié)果

試驗(yàn)結(jié)果見表1、表2及圖1所示：

從表1，表2、圖1可看出：復(fù)方芩連草顆粒給藥后15日內(nèi)，動(dòng)物沒有死亡，狀況良好，大小便正常，且外觀、皮毛、行為、呼吸均正常，鼻、眼、口腔無異常分泌物，給藥組與對照組的體重增長無顯著差異。復(fù)方芩連草顆粒組小鼠的最大藥量為147.6g/kg，按成人60kg體重計(jì)算相當(dāng)于人全日用藥量（0.8g/kg）的185倍，未見動(dòng)物死亡。認(rèn)為復(fù)方芩連草顆粒毒副作用小。

3 討論

本試驗(yàn)對復(fù)方芩連草顆粒小鼠急性毒性進(jìn)行了觀察和評價(jià)，研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)：給小鼠灌胃最大濃度的復(fù)方芩連草顆粒水溶液，無一死亡，經(jīng)小鼠急性毒性最大耐受量試驗(yàn)考察，得到黃芩顆粒水溶液的最大給藥量值為147.6g·kg-1·d-1。本實(shí)驗(yàn)采取最大濃度以及可耐受的最大灌胃體積灌胃給藥，復(fù)方芩連草顆粒組和對照組小鼠均未觀察到毒副反應(yīng)，未見1例死亡。一般認(rèn)為，按體質(zhì)量計(jì)算小鼠最大給藥量相當(dāng)于成人用量的100倍以上則較安全，因此本試驗(yàn)可為進(jìn)一步臨床研究提供依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

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