潰瘍性結腸炎患者血清自身抗體檢測的價值分析

彭強

重慶市銅梁區(qū)中醫(yī)院檢驗科，重慶 402560

潰瘍性結腸炎為慢性疾病，通常表現(xiàn)為粘液膿血便、腹痛、腹瀉，屬于一種非特異性炎性疾病，有可能出現(xiàn)肝膽、皮膚、骨關節(jié)損害等多種腸外癥狀，是累及結腸或直腸黏膜下層的一種自身免疫反應性腸道疾病，屬于一種炎癥性腸病。由于該病情具有較高的反復性，遷延不愈，而且病程長，極易造成此疾病的進一步發(fā)展，產(chǎn)生大量并發(fā)癥，治療具有一定難度，且遠期預后不良等，導致患者機體健康、生活質量受到嚴重影響。腸黏膜免疫系統(tǒng)對于UC發(fā)病具有重要作用[1]，因此對血清免疫特異性抗體進行檢測重要較高臨床價值[2]。該文方便選取2015年2月—2016年6月收治的68例潰瘍性結腸炎患者，探討p-ANCA、GAB、ASCA、PAB的檢測價值，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

方便選取收治的68例潰瘍性結腸炎患者，設定為觀察組，其中男35例，女33例；年齡15～63歲，平均年齡為（38.62±6.92）歲?；颊呔系谄叽稳珖W術會議上制定的炎癥性腸病診斷標準，均經(jīng)全結腸鏡、病理組織學檢查，未合并其他胃腸道疾病、細菌病毒感染等。并選取同時期腸易激綜合征患者68例，設定為對照組，經(jīng)均結腸鏡檢查表明為腸易激綜合征(IBS)，無自身免疫疾病、遺傳性疾病家族史及腹瀉癥狀，其中男36例，女 32 例；年齡 16～60 歲，平均年齡為（39.02±7.18）歲。兩組基礎資料對比差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），可臨床比較?；颊呔猓医?jīng)倫理委員會批準。

1.2 方法

患者早晨空腹時采集靜脈血液2 mL，經(jīng)離心處理后分離血清，放置到-20℃環(huán)境下待用。采用間接免疫熒光儀實施間接免疫熒光法檢測 pANCA、PAB、ASCA、GAB水平，應用自身抗體檢測試劑盒進行檢測，且嚴格按照試劑盒說明書完成操作步驟，置于每個平板反應區(qū)加樣經(jīng)PBS緩沖液使之稀釋為25 μL血清，以生物薄片進行覆蓋，維持30 min后取出通過室溫進行孵育的生物薄片，且立即將其浸泡導致PBS內，持續(xù)5 min。再加樣到另一個反應平板反應區(qū)的抗人球蛋白，通過熒光標記20 μL，自PBS內取出生物薄片，覆蓋到反應平板，持續(xù)5 min，生物薄片經(jīng)PBS沖洗后浸泡到PBS內且封片，通過熒光顯微鏡進行觀察，以自動由儀器進行數(shù)據(jù)讀取。

1.3 統(tǒng)計方法

數(shù)據(jù)均通過SPSS 20.0統(tǒng)計學軟件進行處理分析，計數(shù)資料通過χ2進行檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 兩組血清自身抗體檢測陽性率比較

觀察組血清p-ANCA、GAB檢測陽性率均高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；兩組血清 ASCA、PAB檢測陽性率對比差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。觀察組 p-ANCA、GAB、ASCA、PAB聯(lián)合檢測陽性率明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 兩組血清自身抗體檢測陽性率比較[n（%）]

2.2 兩組血清自身抗體聯(lián)合檢測陽性率比較

因p-ANCA檢測陽性率最高，則將其與其他3種分別聯(lián)合檢測，陽性率均提高，且p-ANCA/GAB聯(lián)合檢測對比單項檢測的陽性率提高較為顯著，與四項聯(lián)合檢測結果對比差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。兩組聯(lián)合檢測結果對比差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表2。

表2 兩組血清自身抗體聯(lián)合檢測陽性率比較[n（%）]

3 討論

目前，潰瘍性結腸炎發(fā)病機制與發(fā)病原因并無明確闡釋，大多認為，環(huán)境、遺傳、免疫等因素均與潰瘍性結腸炎發(fā)生具有顯著相關性，此類因素對腸黏膜形成一定作用，從而使之出現(xiàn)較高的免疫反應，由此引發(fā)炎癥性病變，使得腸道黏膜受到損傷，而免疫因素對于潰瘍性結腸炎發(fā)生、發(fā)展具有顯著作用。潰瘍性結腸炎患者往往承受較大的身心壓力，而且此疾病病變程度不同，發(fā)作與緩解通常會交替出現(xiàn)，發(fā)病具有較高的反復性，在早期診斷方面具有一定難度，若不及時治療往往導致潰瘍性結腸炎難以治療或出現(xiàn)重癥潰瘍性結腸炎，由于疾病易復發(fā)，存在較高癌變風險，造成較高死亡率，使得結直腸癌風險明顯提高。臨床中對于潰瘍性結腸炎的診斷并無較為標準的理想指標，通常對患者實施內鏡、病理學檢查、放射學檢查等[3]，且有的方法比較復雜性，患者耐受性受到一定限制，導致早期診斷潰瘍性結腸炎存在一定難度，使得患者難以及早得到明確的診斷結果，影響臨床治療，所以尋求更為簡單、有效的臨床診斷方法具有重要價值[4]。實驗室診斷指標在潰瘍性結腸炎的診斷使用中越來越受到關注，尤其p-ANCA、GAB、ASCA、PAB在自身抗體中比較具有代表性，該文重要對上述抗體進行研究。

ANCA可使得細胞胞漿成分成為自身靶抗原，靶抗原供源細胞通常為中性粒細胞、單核細胞。ANCA可分成胞漿型（C-ANCA）、核周染色型（p-ANCA）。上述兩類抗體即可針對把抗原存在不同，而潰瘍性結腸炎患者中的ANCA類型通常我為p-ANCA。p-ANCA的靶抗原處在細胞核周圍，一般是腸系膜、腸黏膜固有層內淋巴結的淋巴細胞形成，往往呈現(xiàn)出不連續(xù)性的核周分布狀態(tài)。經(jīng)檢測可知，p-ANCA在大部分潰瘍性結腸炎患者中呈現(xiàn)出陽性表達。經(jīng)該文研究可知，p-ANCA在觀察組的陽性率為58.82%，在對照組的陽性率為1.47%，觀察組陽性率明顯高于對照組。有研究[5]得到UC患者ANCA陽性率為68.3%，健康者為1.7%。ANCA對于潰瘍性結腸炎具有較高的特異性，達到92.7%，靈敏度為65.9%。國外有報道稱，ANCA敏感性為42%，特異性為97%。有些研究結果具有一定差異[6]，極有可能和研究對象病情程度具有一定關系，而且實驗室方法、人種、地區(qū)等均可能對結果造成一定影響。經(jīng)組織病理學研究表明，隱窩內存在的大量杯狀細胞可作為潰瘍性結腸炎的組織學診斷標志，小腸杯狀細胞所呈現(xiàn)的宏觀、微觀分布對于病灶分布具有決定性作用，GAB屬于診斷潰瘍性結腸炎的一個特異性指標，但目前在我國并無較多的研究報道。經(jīng)該文研究可知，GAB在觀察組的陽性率為32.35%，對照組為8.82%，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。ASCA為真菌菌屬的一種抗體，可有效反映腸道特殊抗原的免疫耐受性喪失情況，也認為其可對無法識別的病原體形成免疫反應[7]。在該文研究中，觀察組ASCA陽性率為10.29%，對照組為4.41%，兩組差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。國外一些資料認為，ASCA對于診斷炎性腸道疾病具有較高價值[8]，但在我國并無明顯價值[9]，對其差異原因進行分析，有可能是：種族遺傳具有一定差異性，因歐美與亞洲人群具有不同遺傳背景[10]，由此導致血清自身抗體具有明顯差異；因實驗室、實驗技術手段具體一定差別[11]；對ASCA檢測時所使用的試劑盒說明書中的cut-off值(1∶1 000)源自歐洲人群參考值，在中國群體中是否適用需要進行研究[12]。PAB對于潰瘍性結腸炎、克羅恩病的臨床診斷及鑒別存在一定價值，但在該文研究中，觀察組陽性率為4.41%，對照組為0.00%，兩組差異無統(tǒng)計學意義。由此可知，PAB對于潰瘍性結腸炎并不敏感。P-ANCA與GAB聯(lián)合檢測潰瘍性結腸炎具有較高的陽性率，可有效提高UC的臨床診斷，ASCA、PAB對于潰瘍性結腸炎患者并無較高表達，因此p-ANCA分別與ASCA、PAB進行聯(lián)合檢測，其對UC的陽性率并無顯著提高[13]。

綜上所述，在對潰瘍性結腸炎患者進行血清自身抗體檢測時，P-ANCA、GAB具有結果的診斷價值，但PAB、ASCA對于UC的診斷并無較高價值，也有可能是因為該文選取樣本較少，無法確定其診斷意義，還需進一步擴大樣本進行討論。

[1]李慕然，劉艷迪，鄭曉莉，等.血清學抗體檢測對炎癥性腸病的診斷價值[J].中華臨床醫(yī)師雜志：電子版，2013,7(6)：2425-2427.

[2]謝文，汪付兵，余曉萍，等.潰瘍性結腸炎患者血清自身抗體檢測的臨床價值[J].國際醫(yī)學檢驗雜志，2013，34(15)：1959-1960.

[3]韓曉芳，劉洋，譚艷，等.鈣衛(wèi)蛋白及抗中性粒細胞胞漿抗體聯(lián)合檢測對炎癥性腸病的診斷價值研究[J].國際檢驗醫(yī)學雜志，2012，33(11)：1286-1288.

[4]張玲玲，許鐘，黃國美，等．血清抗體檢測在炎癥性腸病中的臨床應用研究[J].中國實用醫(yī)藥，2016，11(26)：1-3．

[5]李艷萍．867例抗中性粒細胞胞漿抗體檢測的臨床分析[J].吉林醫(yī)學，2012，33（11）：2265-2266.

[6]麻婧，吳開春．糞鈣衛(wèi)蛋白在炎癥性腸病應用中的優(yōu)勢探討[J].胃腸病學和肝病學雜志，2016，25(2)：231-234.

[7]李莉，張文．抗中性粒細胞胞漿抗體檢測臨床意義分析[J].國際醫(yī)學檢驗雜志，2012，33（18）：2281-2282.

[8]王璋，吳泉峰.血清自身抗體.P-ANCA及GAB檢測在潰瘍性結腸炎中的臨床診斷價值探討[J].檢驗醫(yī)學與臨床，2016，13（16）：2288-2290.

[9]時玉菲，章先，謝琿，等.金黃色葡萄球菌A型腸毒素雙抗體夾心ELISA檢測方法的建立及應用[J].微生物學通報，2016，43（3）：687-694.

[10]Mooci G,Marzo M,Papa A,et al.Dermatological adverse reactions during anti-TNFtreatments：focus on inflammatory bowel disease[J].J Crohns Colitis，2013，7(10)：769-779.

[11]薛霖，余楠，郭勇暉，等.手足口病相關腸道病毒感染血清中交叉抗體反應的初步鑒定[J].中華疾病控制雜志，2015，19（7）：655-658.

[12]Baar JE,Nuij VJ,Oldenburg B，et al.Majority of patients with inflammatory boweldisease in clinical remission have mucosal inflammation[J].Inflamm Bowel Dis，2012，18(9)：1634-1640.

[13]毛毅影.血清腸道EV71病毒抗體快速檢測手足口病患兒的臨床意義[J].遼寧醫(yī)學雜志，2016，30（1）：30-31.