宮頸癌患者人乳頭狀瘤病毒感染與陰道細(xì)菌感染的相關(guān)性*

郭冰杰 楊彩梅

(北京中醫(yī)醫(yī)院順義醫(yī)院婦產(chǎn)科，北京 101300)

宮頸癌是女性最常見的惡性腫瘤之一，在女性中的發(fā)病率僅低于乳腺癌，嚴(yán)重威脅著廣大婦女的生命[1-2]。流行病學(xué)調(diào)查顯示全世界每年宮頸癌新發(fā)病例約有 50萬人，我國示每年新發(fā)宮頸癌14萬病例左右[3]。人乳頭狀瘤病毒(human papilloma virus，HPV)是乳多空病毒科乳頭瘤病毒屬，具雙鏈閉環(huán)DNA基因組，其長度為7200～8000bp，為無包膜的小分子(55nm)DNA腫瘤病毒[4-5]。HPV感染是宮頸癌發(fā)生的主要原因，其中高危型HVP主要為HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52，不過多數(shù)HPV感染都是暫時的，只有少部分HPV感染發(fā)生可發(fā)展為宮頸癌前病變或?qū)m頸癌，也表明還有因素的參與協(xié)同促進(jìn)宮頸癌發(fā)生發(fā)展[6-8]。宮頸癌患者多合并有陰道感染，使得陰道分泌物有特殊腥臭氣味，影響患者的身心健康[9]。特別是條件致病菌便會在陰道內(nèi)大量繁殖，可改變陰道的微環(huán)境，繼而誘發(fā)出現(xiàn)陰道的菌群紊亂，不過是否有增加HPV感染與宮頸致癌的風(fēng)險還不得而知[10-11]。本文將宮頸癌患者及同期慢性宮頸炎患者的陰道分泌物細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果及HPV感染情況進(jìn)行回顧性分析，了解宮頸癌患者中HPV感染和陰道細(xì)菌感染的情況，分析其可能的協(xié)同作用。現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 研究對象 2014年2月～2017年1月選擇在我院診治的宮頸癌患者150例作為觀察組，同期選擇非宮頸癌的慢性宮頸炎患者150例作為對照組。納入標(biāo)準(zhǔn)：研究得到醫(yī)院倫理委員會的批準(zhǔn)；已婚，均有性生活史；年齡20～90歲；觀察組與對照組均經(jīng)病理檢查證實(shí)診斷明確；沒有合并其他惡性腫瘤的患者。排除標(biāo)準(zhǔn)：曾經(jīng)放療或行新輔助化療后的患者；無性生活史的患者；合并有其他婦科及系統(tǒng)的惡性腫瘤患者；既往被診斷過宮頸病變，并接受治療的患者。兩組的年齡、孕次、產(chǎn)次、體重指數(shù)等對比無明顯差異(P>0.05)，見表1。

表1 兩組患者一般資料對比Table 1 The general data of two groups

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集 ①陰道分泌物培養(yǎng)采集：在月經(jīng)結(jié)束后第5～7d，采用碘伏常規(guī)消毒外陰后，暴露子宮頸部，用無菌長柄棉簽采集陰道內(nèi)中上1/3 內(nèi)側(cè)壁粘膜，取出標(biāo)本后置于無菌試管中，送檢驗(yàn)科細(xì)菌室進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)鑒定分析。②宮頸HPV采集方法：暴露宮頸部，選擇專用小刷子置于子宮頸口與粘膜交界處，順時針旋轉(zhuǎn) 5 圈，停留 10 s，取出后將小刷子置于無菌試管中，送檢驗(yàn)科細(xì)菌室進(jìn)行宮頸HPV分析。

1.2.2 檢測方法 ①細(xì)菌分離培養(yǎng)與鑒定：將細(xì)菌標(biāo)本接種于麥康凱培養(yǎng)平板、巧克力平板、血瓊脂平板等，標(biāo)本接種后培養(yǎng) 18-24h，觀察菌落形態(tài)，采用全自動微生物鑒定儀 VITEK2 compact進(jìn)行鑒定。②HPV-DNA檢測：采用美國高危HPV-DNA檢測試劑盒進(jìn)行檢測，其為一種非放射性相對快速而且能同時檢測13種高危亞型HPV方法，檢測結(jié)果 RLU/CO>1.0pg/ml為HPV陽性，HPV 陰性為檢測結(jié)果 RLU/CO<1.0pg/ml。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 將所有資料數(shù)據(jù)輸入 Microsoft Excel 工作表中，應(yīng)用SPSS20.00軟件進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)采用百分比、率表示，計(jì)量數(shù)據(jù)選擇均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，對比方法為t檢驗(yàn)與卡方分析，相關(guān)性分析采用直線相關(guān)分析，檢驗(yàn)水準(zhǔn)ɑ=0.05，P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 陰道細(xì)菌感染情況對比 觀察組中檢出陰道細(xì)菌78例，檢出率為52.0%，其中革蘭陰性菌60例，革蘭陽性菌18例，具體病原菌分布及構(gòu)成比(見表2)。對照組中檢出陰道細(xì)菌70例，檢出率為46.7%，其中革蘭陰性菌55例，革蘭陽性菌15例，具體病原菌分布及構(gòu)成比(見表3)。兩組陰道細(xì)菌感染檢出率對比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(2=0.087,P>0.05)。

表2 78例宮頸癌患者陰道分泌物的病原菌分布及構(gòu)成比Table 2 Distribution and proportion of pathogens in vaginal secretions of cervical cancer patients

表3 70例宮頸炎患者陰道分泌物的檢出分布及構(gòu)成比Table 3 Detection distribution and ratio of vaginal secretions in patients with cervicitis

2.2 HPV-DNA檢測結(jié)果比較 觀察組中檢出HPV-DNA感染90例，陽性率60.0%；對照組中檢出HPV-DNA感染40例，陽性率26.7%，觀察組的HPV-DNA陽性率明顯高于對照組(P<0.05)，見表4。

表4兩組患者HPV-DNA檢測結(jié)果比較

Table4ComparisonofHPV-DNAbetweenthetwogroups

組別nHPV-DNA陽性HPV-DNA陽性率(×10-2)觀察組1509060.0對照組1504026.724.781P<0.05

2.3 HPV感染與陰道細(xì)菌感染的相關(guān)性 在觀察組中，HPV-DNA感染狀態(tài)與陰道細(xì)菌感染的結(jié)果差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(2=0.872，P>0.05)，見表5。

表5150例宮頸癌患者HPV感染與陰道細(xì)菌感染的相關(guān)性

Table5CorrelationbetweenHPVinfectionandvaginalbacterialinfectionincervicalcancerpatients

HPV-DNA狀況n陰道細(xì)菌感染[n,(×10-2)]陽性(n=78)陰性(n=72)陽性9048(53.3)42(46.7)陰性6030(50.0)30(50.0)20.872P>0.05

注：直線相關(guān)分析宮頸癌患者HPV感染與陰道細(xì)菌感染無明顯相關(guān)性(r=0.092,P>0.05)。

3 討論

宮頸癌在女性生殖系統(tǒng)中比較常見，雖然當(dāng)前其發(fā)病率與死亡率有所下降，但是依然是當(dāng)前女性最主要的惡性腫瘤之一[12]。我國是宮頸癌的高發(fā)國家 之一，特別是在城市的宮頸癌發(fā)病率和死亡率遠(yuǎn)超過全國平均水平。宮頸癌發(fā)病的危險因素包括生物學(xué)因素、行為危險因素、遺傳易感性等，生物學(xué)因素主要為細(xì)菌、病毒和衣原體等各種微生物的感染等[13,14]。

HPV的持續(xù)感染是宮頸癌發(fā)生的主要原因，HPV基因可分為早期區(qū)(E區(qū))，晚期區(qū)(L區(qū))及非編碼區(qū)(LCR)；在所有已知HPV亞型中，約90-95%的HPV陽性腫瘤為高危[15，16]。為此通過檢測HPV來篩查宮頸感染易感人群，是預(yù)防宮頸癌發(fā)生的關(guān)鍵[17]。本研究顯示觀察組中檢出HPV-DNA感染90例，陽性率60.0%；對照組中檢出HPV-DNA感染40例，陽性率26.7%，觀察組的HPV-DNA陽性率明顯高于對照組(P<0.05)，也表明宮頸癌患者伴隨有HPV-DNA高陽性狀況。

健康女性生殖道內(nèi)寄居著多種正常的微生物群落，可與機(jī)體、 環(huán)境之間構(gòu)成了相互協(xié)調(diào)、制約、動態(tài)的微生態(tài)平衡體系。正常情況下在陰道菌群中，最主要的是以陽性乳酸桿菌為優(yōu)勢菌群的微生態(tài)系統(tǒng)[18]。陽性乳酸菌有利于維持陰道酸性環(huán)境，可對自身宿主起占位性保護(hù)作用，而使外襲菌無法立足；陽性乳酸菌對宿主體液免疫和機(jī)體免疫有一定的影響，有利于防御外襲菌的侵入[19]。當(dāng)因各種原因破壞生殖道微生態(tài)系統(tǒng)的菌群動態(tài)平衡時，可使得乳酸桿菌的減少或者造成生殖道菌群菌株的變化，從而導(dǎo)致宮頸疾病的發(fā)生[20]。本研究顯示觀察組中檢出陰道細(xì)菌78例，檢出率為52.0%，其中革蘭陰性菌60例，革蘭陽性菌18例；對照組中檢出陰道細(xì)菌70例，檢出率為46.7%，其中革蘭陰性菌55例，革蘭陽性菌15例，兩組陰道細(xì)菌感染檢出率對比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(2=0.087,P<0.05)。也表明宮頸癌患者陰道分泌物致病菌檢出率較高，病原菌菌株多，革蘭陰性菌相對較多。從機(jī)制上分析，宮頸癌患者由于臨床癥狀表現(xiàn)為長期的不規(guī)則陰道流血，可造成免疫功能低下，導(dǎo)致陰道細(xì)菌感染[21，22]。

炎癥觸發(fā)癌癥這一觀點(diǎn)一直是醫(yī)學(xué)界的焦點(diǎn)， 除了 HPV-DNA病毒之外，陰道細(xì)菌感染是否是其協(xié)同因素之一值得探討[23]。特別是女性感染 HPV大多呈隱性感染，宮頸感染可發(fā)生在宮頸癌發(fā)生前及發(fā)展的早期階段，但是是否有宮頸癌的誘發(fā)因素還不明確。研究發(fā)現(xiàn)宮頸癌和癌前病變中宮頸局部細(xì)胞因子存在明顯變化，局部炎癥在宮頸癌發(fā)生過程中存在一定作用。合并陰道細(xì)菌感染者發(fā)生宮頸癌風(fēng)險增加的機(jī)制還有局部炎癥可能導(dǎo)致局部組織化生，在腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用[24]。也有研究合并生殖道感染的患者宮頸癌發(fā)病風(fēng)險顯著增加，可能增加HPV感染機(jī)會和HPV病毒載量[25]。

本研究顯示在觀察組中，HPV-DNA感染狀態(tài)與陰道細(xì)菌感染的結(jié)果差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(2=0.872，P>0.05)，直線相關(guān)分析宮頸癌患者HPV感染與陰道細(xì)菌感染無明顯相關(guān)性(r=0.092,P>0.05)。表明陰道細(xì)菌感染尚不足以作為HPV的協(xié)同因子促進(jìn)宮頸癌的發(fā)生，將在下一步進(jìn)行更系統(tǒng)和廣泛的調(diào)查研究，以進(jìn)一步確定生殖道中細(xì)菌感染在HPV導(dǎo)致的宮頸癌中的作用。

4 結(jié)論

本文資料顯示，宮頸癌患者的HPV陽性率高于宮頸炎患者，且陰道分泌物中致病菌檢出率較高，革蘭陰性菌檢出率居首位。陰道細(xì)菌感染與HPV感染協(xié)同因素促進(jìn)宮頸癌的發(fā)生還有待進(jìn)一步研究。

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