缺氧誘導(dǎo)因子-1α、同型半胱氨酸、胱抑素C與2型糖尿病性眼肌麻痹的相關(guān)性研究

于 敏，張彬彬，薛天宇

(大連市第三人民醫(yī)院 神經(jīng)內(nèi)科， 遼寧 大連 116033)

糖尿病周圍神經(jīng)病變作為糖尿病最常見的慢性并發(fā)癥之一，發(fā)病率較高，影響著多達(dá) 50%的糖尿病患者，是糖尿病致殘率甚至死亡率增加的一個(gè)主要原因[1]，而糖尿病性眼肌麻痹為糖尿病神經(jīng)病變并發(fā)癥之一。目前研究認(rèn)為，缺氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)、同型半胱氨酸(Hcy)、胱抑素C(CysC)參與了糖尿病眼肌麻痹的發(fā)生、發(fā)展。本文通過觀察糖尿病性眼肌麻痹患者HIF-1α、Hcy、CysC水平的關(guān)系，旨在探討三者在糖尿病眼肌麻痹發(fā)病機(jī)制中的作用及意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇大連市第三人民醫(yī)院2015年1月至2016年12月神經(jīng)內(nèi)科、內(nèi)分泌科住院的2型糖尿病患者120例，采用病例-對(duì)照方法研究，根據(jù)是否合并糖尿病眼肌麻痹，將120例2型糖尿病患者分為兩組，其中2型糖尿病性眼肌麻痹組(A組，60例，其中男28例，女32例)、2型糖尿病組(B組，60例，男30例，女30例)。另選同期健康體檢者為對(duì)照組(NC組，60例，男30例，女30例)。病例入選標(biāo)準(zhǔn)：(1)糖尿病性眼肌麻痹：排除感染、中毒、動(dòng)脈瘤、重癥肌無力、顱內(nèi)占位、腦卒中及眼科檢查等其他病因所致眼肌麻痹,而確診為糖尿病性眼肌麻痹。(2)2型糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)采用1999年世界衛(wèi)生組織(WHO)糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)：糖尿病癥狀加任意時(shí)間血漿葡萄糖≥11.1 mmol/L，或FBG≥7.0 mmol/L，或OGTT 2 h PG≥11.1 mmol/L。告知本研究的內(nèi)容及目的并簽署知情同意書。

1.2 方 法

記錄性別、年齡、病程、測(cè)量身高、體重、血壓，并計(jì)算體重指數(shù)(BMI)=體重(kg) /身高(m2)。素食，避免茶、咖啡等有色飲料，避免劇烈運(yùn)動(dòng)3 d，試驗(yàn)前1天禁食12～14 h后，于第2天清晨空腹靜息狀態(tài)下抽取靜脈血，采用日立7600-020全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定糖化血紅蛋白(HbAlc)、空腹血糖(FBG )、總膽固醇(CHO)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-c)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-c)，采用酶聯(lián)免疫法測(cè)定HIF-1α濃度、高效液相色譜法測(cè)定血清Hcy濃度、免疫比濁法測(cè)定血清胱抑素C指標(biāo)(CysC)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié) 果

2.1 組間臨床資料比較

A、B組的血清HIF-1α、Hcy、CysC 濃度高于NC組，其中A 組的血清HIF-1α低于B組， A 組的血清Hcy、CysC高于B組，均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P均<0.05，各組一般資料比較除空腹血糖(FBG)和糖尿病史外，其他指標(biāo)差別均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P>0.05)。見表1。

表1 各組間一般資料及 HIF-1α、Hcy、CysC 濃度的比較

1) 與 NC組比較，P<0.05;2)與B組比較，P<0.05。BMI: 體重指數(shù);CHO:膽固醇;TG:甘油三酯;LDL:低密度脂蛋白膽固醇;HDL:高密度脂蛋白膽固醇;FBG:空腹血糖;HbA1c:糖化血紅蛋白;HIF-1α:α缺氧誘導(dǎo)因子-1α;Hcy:同型半胱氨酸;CysC:胱抑素C

2.2 多元回歸分析

HIF-1α與病程、HbA1c、FBG呈顯著負(fù)相關(guān)，Hcy與病程、HbAlc、FBG、CysC呈正相關(guān)，CysC 與病程、Hcy 呈正相關(guān)，P均<0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表2～4。

表2 影響 HIF-1α 的多元逐步回歸分析

表3 影響Hcy的多元逐步回歸分析

表4 影響CysC的多元逐步回歸分析

2.3 危險(xiǎn)因素分析

糖尿病病程≥5年，HbA1c≥7%，Hcy≥10 μmol/L，CysC≥1 mg/L是糖尿病眼肌麻痹的危險(xiǎn)因素。OR值分別為1.341(95%CI=1.166-1.647),1.254(95%CI=1.219-1.458),1.589(95%CI=1.478-1.612)，1.474(95%CI=1.291-1.552)，P均<0.05。見表5。

3 討 論

糖尿病發(fā)病早期即存在組織缺血缺氧[2-5]，而缺血缺氧在糖尿病眼肌麻痹、糖尿病周圍神經(jīng)病變及糖尿病其它慢性并發(fā)癥中發(fā)揮著重要的作用。HIF-1α是調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)氧代謝的關(guān)鍵因子之一，也是迄今為止發(fā)現(xiàn)的唯一能在特異性缺氧狀態(tài)下發(fā)揮自變量賦值為糖尿病病程≥5年=1，<5年=0；HbA1c≥7%=1，<7%=0；Hcy≥10 μmol/L=1，<10 μmol/L=0；CysC≥1 mg/L=1，<1 mg/L=0

活性的轉(zhuǎn)錄因子，能對(duì)細(xì)胞的缺氧起穩(wěn)定作用[6-7]。有研究表明，HIF-1α在糖尿病周圍神經(jīng)病變的發(fā)展過程中具有一定作用[8-9]，而糖尿病性眼肌麻痹是糖尿病神經(jīng)病變并發(fā)癥之一，HIF-1α可能也參與了糖尿病眼肌麻痹的發(fā)展。研究發(fā)現(xiàn)，缺血/缺氧的程度可以誘導(dǎo)不同的效應(yīng)，輕、中度缺氧時(shí)，HIF-1α的復(fù)合物穩(wěn)定，引起VEGF、EPO等具有神經(jīng)保護(hù)作用的靶基因表達(dá)[10-11]，增強(qiáng)神經(jīng)細(xì)胞對(duì)缺氧的適應(yīng)力。但在嚴(yán)重缺氧時(shí)，HIF-1α使細(xì)胞內(nèi)的p53、BNIP3等水平增高，導(dǎo)致神經(jīng)毒性[12]。故推測(cè)，在糖尿病眼肌麻痹早期HIF-1α可以增強(qiáng)神經(jīng)細(xì)胞對(duì)缺氧的適應(yīng)力，對(duì)疾病的發(fā)展起一定保護(hù)作用，而隨著糖尿病病程的延長(zhǎng)、缺氧的加重，HIF-1α可誘導(dǎo)p53及BNIP3等凋亡基因造成神經(jīng)細(xì)胞損傷以及神經(jīng)功能受損表現(xiàn)細(xì)胞毒性。在本研究中糖尿病各組(A 組、B 組)的血清HIF-1α濃度高于健康對(duì)照組(NC組)，也不除外隨著缺氧的加重，HIF-1α已對(duì)神經(jīng)細(xì)胞產(chǎn)生了毒性作用，進(jìn)而使糖尿病眼肌麻痹加重。但目前對(duì)于缺氧程度及持續(xù)時(shí)間所致HIF-1α介導(dǎo)的神經(jīng)細(xì)胞保護(hù)抑或毒性的分界尚缺乏進(jìn)一步研究。另有研究表明，糖尿病病程、高血糖對(duì) HIF-1α具有短期升高，逐漸抑制的作用。本研究中，糖尿病眼肌麻痹組(A 組)的血清HIF-1α低于單純糖尿病組(B組)，且通過多元回歸分析表明與病程、HbA1c、FBG呈負(fù)相關(guān)，與研究報(bào)道相符。提示血清HIF-1α參與了糖尿病眼肌麻痹的發(fā)生、發(fā)展中的病理生理過程，其作用機(jī)制相似。

表5 Logistic 回歸分析各危險(xiǎn)因素與糖尿病性眼肌麻痹的關(guān)系

Hcy與動(dòng)脈粥樣硬化密切相關(guān)，是引起大血管病變的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。最近有研究表明，Hcy與糖尿病周圍神經(jīng)病相關(guān)，高水平Hcy能引起氧化應(yīng)激，損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞，影響神經(jīng)髓鞘蛋白代謝，加重神經(jīng)病變。給予葉酸和B族維生素降低Hcy水平，可以緩解臨床癥狀[13-14]。CysC通過抑制Hcy分解過程中酶的活性，從而升高Hcy濃度，并與Hcy、組織蛋白酶等相互作用，參與糖尿病血管病變、神經(jīng)病變的病理過程[15]。本文中糖尿病各組(A 組、B 組)的血清Hcy、CysC 濃度高于健康對(duì)照組(NC組)，且糖尿病眼肌麻痹組(A 組)血清Hcy、CysC高于單純糖尿病組(B組)，提示血清Hcy與CysC可能通過相互作用共同參與了糖尿病眼肌麻痹的病理變化過程。

綜上所述，本研究通過檢測(cè)HIF-1α、Hcy、CysC水平，及其影響因素，分析糖尿病眼肌麻痹的危險(xiǎn)因素，探討HIF-1α、Hcy及CysC與糖尿病眼肌麻痹的關(guān)系和作用機(jī)制,為糖尿病眼肌麻痹的防治提供新的切入點(diǎn)。另外，本臨床研究提示早期適量的HIF-1α對(duì)2型糖尿病及糖尿病性眼肌麻痹有保護(hù)作用，而長(zhǎng)期、過量的 HIF-1α?xí)又丶膊〉陌l(fā)生、發(fā)展，目前本研究未作出HIF-1α對(duì)神經(jīng)細(xì)胞保護(hù)抑或毒性分界的定量研究，尚有待于更大樣本的分層隊(duì)列試驗(yàn)和多因素回歸分析。

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