反復(fù)輸血者血小板抗體對血小板輸注的分析與研究

任 俊

（廣州血液中心機采成分部，廣東 廣州 510095）

臨床上常通過血小板輸血來預(yù)防、治療因血小板功能缺陷、血小板減少等原因?qū)е碌某鲅猍1]。但患者在多次反復(fù)輸血的情況下，可能引起血小板相關(guān)抗體的出現(xiàn)，并導(dǎo)致血小板輸注無效的情況。作為臨床輸血治療中最常見的一類問題，做好血小板抗體的檢測，把握反復(fù)輸血者血小板抗體對血小板輸注的影響對于提高患者的輸注效果十分重要。本文收集2015年9月至2016年9月在我中心接受臨床血小板配型標(biāo)本200份作為研究對象，并采用固相凝集法對血小板抗體的產(chǎn)生進行監(jiān)測，分析其對血小板輸注效果的影響。具體報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：收集2015年9月至2016年9月在我中心接受臨床血小板配型標(biāo)本200份作為研究對象，標(biāo)本來源的患者均為反復(fù)輸血，且輸血次數(shù)均＞2次，涉及患者的男35份，女30份，其年齡在20～74歲，平均年齡為（50.2±3.7）歲。患者的原發(fā)性疾病包括了慢性白血病、急性白血病、惡性腫瘤、再生障礙性貧血、骨髓增生異常綜合組，各有14、20、7、12、12份。

1.2 方法：采用固相凝集法對血液標(biāo)本中的血小板抗體進行監(jiān)測：抽取4 mL靜脈血作為標(biāo)本，將其平均分成兩份，一份置于普通真空管中，另一份置于含有EDTA-K2抗凝劑的真空管中，每份2 mL，通過離心分別獲得上層血清及上層2/3富含PLT的血漿待用。同時，以凍干血小板稀釋后獲得血小板混懸液。取出反應(yīng)板條，設(shè)處理孔（加樣本）、未處理孔（自身對照樣本）、陽性對照孔、陰性對照孔，先在處理孔、陽性對照孔、陰性對照孔內(nèi)加入50 μL血小板混懸液，然后于未處理孔中加入等量自身含PLT血漿。經(jīng)平板離心機分別離心，使血小板在反應(yīng)孔固定后，再經(jīng)多次洗滌后吸干殘余液體，分別向其中加入100 μL低離子強度溶液后，再于處理孔、未處理孔中加入患者血清50 μL，而陽性對照孔中加入陽性對照血清50μL，陰性對照孔中加入陰性對照血清50 μL。然后將反應(yīng)板置于37 ℃水浴條件下孵育半小時，多次洗滌后吸去殘余液體，并向各孔中加入抗人IgG和指示細(xì)胞各50 μL，振蕩混合后，離心，將處理孔、未處理孔的結(jié)果與對照孔進行比較，其顏色變化同陽性孔則為陽性，同陰性孔則為陰性。其中，當(dāng)處理孔陰性而未處理孔呈陽性提示抗體類型為HLA抗體；當(dāng)處理孔與未處理孔均為陽性提示抗體類型為HPA抗體；當(dāng)處理孔弱陽性而未處理孔陽性提示兩種抗體同時存在；當(dāng)處理孔與未處理孔均為陰性則提示無相關(guān)抗體存在。

同時，對血小板輸注前1 h、輸注后1 h及24 h血小板計數(shù)變化進行測定，采用Sysmex 2100型全自動血液細(xì)胞計量儀對血小板進行定量監(jiān)測，同時借助血庫型濾器、床旁型濾除器針對紅細(xì)胞懸液中、血小板內(nèi)部的白細(xì)胞實施濾過處理。計算輸血者血小板輸注結(jié)束后的增值（CCI），CCI=輸注完成后的血小板增值×體表面積/血小板總數(shù)（體表面積=[0.0061×患者身高（cm）+0.0128×患者體質(zhì)量（kg）]-0.01529），如輸血者的血小板輸注完成后1 h內(nèi)CCI＞7.5×109/L，且血小板輸注完成后24 h內(nèi)CCI＞4.5×109/L，認(rèn)為輸注有效[2]。

1.3 觀察指標(biāo)：按照標(biāo)本的血小板抗體監(jiān)測結(jié)果將其分為陽性組和陰性組，記錄并比較血小板輸注完成后1、24 h后的CCI值以及血小板輸注有效率。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法：本次實驗數(shù)據(jù)采用SPSS12.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析，其中計量資料對比采用t檢驗，計數(shù)資料對比采用卡方檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

200份反復(fù)輸血者的血液標(biāo)本經(jīng)血小板抗體監(jiān)測，共檢出陽性標(biāo)本114份，占57.00%，陰性標(biāo)本86份，占43.00%，對兩組標(biāo)本血小板輸注后1、24 h內(nèi)的CCI值進行比較，結(jié)果可見陽性組均顯著低于陰性組，同時，陽性組的輸注有效率（21.05%）也顯著低于陰性組（68.60%），比較均有統(tǒng)計學(xué)差異 （P＜0.05）。見表1、2。

表1 血小板抗體監(jiān)測陰性或陽性者在血小板輸注后1、24 h內(nèi)的CCI值比較（±s）

表1 血小板抗體監(jiān)測陰性或陽性者在血小板輸注后1、24 h內(nèi)的CCI值比較（±s）

組別 輸注后1h 輸注后24h陽性組(114) 6.79±1.87 2.37±0.74陰性組(86) 19.31±2.04 8.86±1.53 t值 19.297 15.924 P值 0.000 0.000

表2 血小板抗體監(jiān)測陰性或陽性者的血小板輸注效果比較[n（%）]

3 討 論

血小板輸注無效是血液制品輸注中的常見問題，造成該問題的因素有免疫性因素和非免疫性因素兩種，非免疫性因素以感染、出血、發(fā)熱、藥物使用等為主。免疫因素則以HPA抗原、HLA抗原不合等為主[3]，血小板表面抗原系統(tǒng)有血小板特異性抗原、血小板相關(guān)抗原之分，而血小板相關(guān)抗原與其他細(xì)胞表面或組織共有，因HPA抗體、HLA抗體引起的血小板輸注無效在所有免疫因素中占八成以上，尤以HLA抗體為主[4]。反復(fù)輸血者很容易出現(xiàn)同種免疫反應(yīng)，并產(chǎn)生血小板相關(guān)抗體，再次輸注含有相關(guān)抗體抗原成分的血小板制品時，抗原抗體反應(yīng)的發(fā)生可能導(dǎo)致血小板破壞，并致血小板輸注無效的產(chǎn)生[5]。

本文對200份反復(fù)輸血者的血液標(biāo)本中血小板抗體存在情況進行了監(jiān)測，結(jié)果顯示，血小板抗體陽性率為56.92%，同時，陽性組輸血者血小板輸注后1、24 h內(nèi)的CCI值（CCI值被認(rèn)為是評價血小板輸注無效的科學(xué)指標(biāo)，當(dāng)輸血者連續(xù)兩次及以上輸注足量同型血小板，但其循環(huán)血液中的血小板計數(shù)未見明顯增加，輸血者出血問題無法緩解就可以判斷為血小板輸注無效[6]）均顯著低于陰性組，而輸注無效率則顯著高于陰性組，提示血小板抗體陽性對其輸注效果有顯著影響。

針對上述情況，如輸血者出現(xiàn)血小板輸注無效，但仍對血小板有需求的情況下，可以通過血小板抗體的檢測及交叉配血試驗的實施，對免疫因素導(dǎo)致的血小板無效輸注問題進行針對性解決。為了降低血小板抗體陽性導(dǎo)致的血小板輸注無效情況，可通過血小板配合性輸注提高輸注效果。

總之，反復(fù)輸血者可能因免疫反應(yīng)的發(fā)生產(chǎn)生血小板相關(guān)抗體，并影響血小板的輸注效果。

參考文獻

[1] 朱春玲.反復(fù)輸血者血小板抗體對血小板輸注效果的影響分析[J].生物技術(shù)世界,2015,32(2):53.

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[3] 張秋會,張婧,劉麗娜,等.多次輸血后患者血小板輸注無效的血小板抗體檢測與分析[J].臨床輸血與檢驗,2015,17(5):409-411.

[4] 阿不都外力?阿巴拜克力,呂萍,阿布都肉蘇力?肉孜.分析血小板抗體檢測在反復(fù)輸血患者中的應(yīng)用效果[J].臨床醫(yī)藥文獻雜志,2016,3(18):3558-3559.

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[6] 夏世勤,蘇莉,劉秋洪,等.血液病患者血小板抗體檢測及其與血小板輸注療效的相關(guān)性研究[J].醫(yī)學(xué)檢驗,2013,28(22):82-86.