烏飯樹葉總黃酮對(duì)鏈脲佐菌素致II型糖尿病小鼠降血糖作用的研究

陳奕好

摘 要：本實(shí)驗(yàn)旨在探索烏飯樹葉總黃酮對(duì)鏈脲佐菌素（streptozotocin，STZ）所致II型糖尿?。╰ype II diabetes mellitus， DM2）模型小鼠的降血糖作用。實(shí)驗(yàn)通過注射STZ構(gòu)建II型糖尿病小鼠模型，用提取出的烏飯樹葉總黃酮灌胃治療6周后，檢測(cè)小鼠體重和空腹血糖含量的變化。結(jié)果顯示，灌胃治療6周后，與糖尿病模型組相比，烏飯樹葉總黃酮高劑量組小鼠的體重顯著增加（p<0.05），血糖含量明顯降低（p<0.01）。由此可知，烏飯樹葉總黃酮對(duì)STZ致II型糖尿病小鼠具有一定降血糖作用，從而為糖尿病的防治提供一定科學(xué)依據(jù)和研究基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞：烏飯樹葉；總黃酮；鏈脲佐菌素；II型糖尿病

文章編號(hào)：1004-7026（2018）01-0117-02 中國(guó)圖書分類號(hào)：R285.5 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

糖尿?。╠iabetes mellitus， DM）是一種和胰島素密切相關(guān)的受多因素影響代謝性疾病，主要由胰島素分泌不足或胰島素抵抗引起，在全球范圍內(nèi)嚴(yán)重威脅人類身心健康[1]。糖尿病主要類型分為I型糖尿病（TIDM）和II型糖尿?。═IIDM），其中后者占絕大部分比例。II型糖尿病主要特征為胰島素抵抗和胰島β細(xì)胞功能的減退，是環(huán)境因素和遺傳因素共同作用所導(dǎo)致的，病因十分復(fù)雜且并發(fā)癥呈多樣化[2]。其主要臨床表現(xiàn)：多飲、多尿、多食、易疲憊及身體質(zhì)量下降等。近年來隨著全球人口老齡化趨勢(shì)的加劇，糖尿病發(fā)病率呈逐年遞增的趨勢(shì)。近年來大量文獻(xiàn)指出，存在于許多野生植物中的黃酮類化合物具有降血糖作用[3； 4]。黃酮類化合物具有普遍的生理活性，對(duì)防治心腦血管疾病和呼吸系統(tǒng)方面的疾病作用顯著， 同時(shí)還具有抗病毒并加強(qiáng)機(jī)體免疫力的功效。烏飯樹又名南燭、羊塵飯子，屬杜鵑花科常綠灌木，廣泛分布于我國(guó)福建、江蘇、廣東等地。實(shí)驗(yàn)表明，烏飯樹葉含有多種化學(xué)成分，主要包括黃酮類、維生素、多糖類、果膠、有機(jī)酸等等[5]。但現(xiàn)階段對(duì)于烏飯樹葉的研究還不夠深入，本研究旨在通過注射鏈脲佐菌素構(gòu)建II型糖尿病小鼠模型，經(jīng)不同濃度烏飯樹葉總黃酮灌胃治療6周后的小鼠體重和血糖含量等指標(biāo)變化，探討烏飯樹葉總黃酮的降血糖作用，為烏飯樹的資源開放與有效利用提供一定依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

ICR小鼠50只，雄性，體重24～26g，由四川省成都達(dá)碩實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物合格證號(hào)SCXK（川）2015-030。小鼠自由進(jìn)食飲水，室溫保持25℃左右。

1.2 試劑與儀器

烏飯樹葉購(gòu)自成都市藥材市場(chǎng)，經(jīng)四川師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院植物學(xué)教研室鑒定為烏飯樹葉Vaccinium bracteatum Thunb.。鏈脲佐菌素（源葉生物有限公司），葡萄糖測(cè)定試劑盒（上海榮盛生物藥業(yè)有限公司）；蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品（四川省維克奇生物科技有限公司）；大孔樹脂HP600（東虹化工有限公司）；其余鹽酸、氫氧化鈉、氯化鈉、無水乙醇等均為國(guó)產(chǎn)分析純。

電子天平JD200-3（沈陽龍騰電子稱量?jī)x器有限公司），超聲波清洗儀（寧波新芝生物科技股份有限公司），紫外可見分光光度計(jì)（上海天美科學(xué)儀器有限公司），旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀R510B（星海王生化設(shè)備有限公司），強(qiáng)生穩(wěn)豪倍健型血糖儀（強(qiáng)生醫(yī)藥有限公司）。

1.3 烏飯樹葉總黃酮的提取與制備

參照文獻(xiàn)方法提取烏飯樹葉總黃酮[6； 7]，通過分光光度計(jì)法檢測(cè)濃度，配制成生藥濃度為20mg/mL的水溶液備用。

1.4 糖尿病小鼠模型的構(gòu)建與治療

將50只小鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)3d后，隨機(jī)分為5組（每組10只），分別為糖尿病模型組、陽性對(duì)照組、烏飯樹葉總黃酮高劑量組、烏飯樹葉總黃酮低劑量組和正常對(duì)照組。每只用苦味酸標(biāo)記并禁食12h后，其中前四組小鼠腹腔注射STZ 150mg/kg，連續(xù)注射3d。正常對(duì)照組小鼠注射等體積生理鹽水。建模結(jié)束后，烏飯樹葉總黃酮高劑量組和烏飯樹葉總黃酮低劑量組分別進(jìn)行灌胃治療，灌胃濃度為150mg/kg以及50mg/kg，治療持續(xù)6周。陽性對(duì)照組連續(xù)灌胃二甲雙胍溶液40mg/kg，模型組和正常對(duì)照組每日給予同等體積生理鹽水。

1.5 糖尿病小鼠指標(biāo)檢測(cè)

（1）體重：在灌胃治療開始后第0、3、6周，稱重測(cè)量各組小鼠體重并記錄。（2）空腹血糖檢測(cè)：在灌胃治療開始后第0、3、6周，對(duì)小鼠進(jìn)行空腹血糖測(cè)定，測(cè)定前禁食12 h。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

用Excel 2013軟件處理數(shù)據(jù)，采用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）進(jìn)行分析，各組數(shù)據(jù)采用單因素方差分析，p<0.05為顯著性差異， p<0.01為極顯著差異。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1 烏飯樹葉總黃酮對(duì)糖尿病小鼠體重的影響

詳見表1，與正常對(duì)照組相比，糖尿病模型組小鼠的體重在建模后（即第0周）無明顯差異，在灌胃生理鹽水第3周和第6周均有顯著降低（P<0.01）。與糖尿病模型組相比，總黃酮高、低劑量組小鼠的體重在建模后（即第0周）均無明顯變化，在灌胃治療第3周升高（P<0.05），在灌胃治療第6周升高顯著（P<0.01）。陽性對(duì)照組小鼠體重在生理鹽水灌胃第3周及第6周，較糖尿病模型組均有顯著提高（P<0.01）。

2.2 烏飯樹葉總黃酮對(duì)糖尿病小鼠血糖的影響

詳見表2，與正常對(duì)照組相比，糖尿病模型組小鼠的空腹血糖含量在給藥第0、3、6周時(shí)均明顯高于正常對(duì)照組（P<0.01）。在建模后即給藥第0周，糖尿病模型組、總黃酮高、低劑量組和陽性對(duì)照組的空腹血糖含量均無明顯差異。灌胃給藥第3周時(shí)，與模型組小鼠相比，陽性對(duì)照組空腹血糖含量較低（P<0.05），總黃酮高、低劑量組無明顯差異。在第6周時(shí)，陽性對(duì)照組和總黃酮高劑量組小鼠的空腹血糖含量較糖尿病模型組相比降低明顯（P<0.01）。

3 討論

目前醫(yī)學(xué)上對(duì)糖尿病的治療尚無有效的治愈方法，主要以控制患者血糖水平及預(yù)防并發(fā)癥。糖尿病已經(jīng)被視為生活中嚴(yán)重危害人類身心健康的第三大非傳染性疾病，僅次于惡性腫瘤和心血管疾病[8； 9]。糖尿病小鼠模型是通過損傷小鼠胰臟或胰島？茁-細(xì)胞導(dǎo)致胰島素的分泌不足，使小鼠出現(xiàn)高血糖進(jìn)而形成糖尿病。作為胰島？茁細(xì)胞毒劑，鏈脲佐菌素可選擇性地?fù)p壞其胰島？茁細(xì)胞，導(dǎo)致血清胰島素出現(xiàn)不同程度地下降并且伴隨小鼠血糖升高，從而建立II型糖尿病小鼠模型[10； 11]。

研究表明，植物中的多種活性成分在一些慢性疾病中發(fā)揮著重要作用。本研究發(fā)現(xiàn)烏飯樹葉總黃酮高、低劑量組能在一定程度降低II型糖尿病小鼠空腹血糖含量，且降血糖效果隨總黃酮?jiǎng)┝可叨訌?qiáng)。結(jié)果表明烏飯樹葉總黃酮能降低STZ致II型糖尿病小鼠所產(chǎn)生的高血糖，為烏飯樹葉的資源開發(fā)與糖尿病的防治提供一定的科學(xué)依據(jù)。

參考文獻(xiàn)：

[1]王來，高穎生，陳風(fēng)飛，等.三種金花茶葉提取物對(duì)2型糖尿病小鼠的降糖作用研究[J].亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2017，（22）：3-6.

[2]肖遐，吳雄，何純蓮.百合多糖對(duì)Ⅰ型糖尿病大鼠的降血糖作用[J].食品科學(xué)，2014，（01）：209-213.

[3]俞浩，毛斌斌，周國(guó)梁，等.白背三七總黃酮對(duì)糖尿病大鼠的降血糖作用[J].食品科學(xué)，2013，（15）：295-298.

[4]李鵬程，樸春紅，張嵐，等.蕎麥殼黃酮提取物對(duì)2型糖尿病大鼠的血糖改善作用及機(jī)制[J].食品科學(xué)，2017，（05）：244-250.

[5]蘇凱迪，姚士，李賀然，等.烏飯樹葉提取物的化學(xué)成分與抗氧化活性研究[J].中國(guó)食品添加劑，2017，（07）：87-95.

[6]張德謹(jǐn).烏飯樹葉黃酮的提取、分離及結(jié)構(gòu)鑒定[D].中國(guó)礦業(yè)大學(xué)，2015.

[7]陳義勇，張德謹(jǐn).烏飯樹葉黃酮超聲—微波輔助提取工藝的優(yōu)化[J].食品與機(jī)械，2016，（01）：148-153.

[8]湯喜蘭，唐劍彬，張啟云，等.黃連總生物堿對(duì)糖尿病大鼠降血糖作用研究[J].中國(guó)臨床藥理學(xué)與治療學(xué)，2010，（09）：967-971.

[9]朱科學(xué)，聶少平，宋丹，等.黑靈芝多糖對(duì)Ⅱ型糖尿病大鼠血糖、血脂及腸系膜上動(dòng)脈病變改善作用[J].食品科學(xué)，2013，（23）：300-304.

[10]馮冠英，宋曉雪，徐志立，等.黃秋葵對(duì)糖尿病小鼠的降血糖作用[J].轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)電子雜志，2017，（11）：44-47.

[11]尹日鳳，李宇清，王亞軍，等.金花茶葉提取物對(duì)糖尿病小鼠肝臟糖代謝的調(diào)節(jié)作用[J].中藥材，2017，（12）：2959-2962.