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    肉牛胚胎移植技術(shù)要點(diǎn)

    2018-05-14 21:36:55巴合提古麗·胡那畢亞
    現(xiàn)代畜牧科技 2018年8期
    關(guān)鍵詞:胚胎移植飼養(yǎng)管理肉牛

    巴合提古麗·胡那畢亞

    摘要:胚胎移植是將具有優(yōu)良遺傳性狀的早期胚胎從供體母牛體內(nèi)取出,移植到另一頭生理狀態(tài)相同的母牛子宮內(nèi),使其繼續(xù)發(fā)育形成胎兒直到順利分娩的過(guò)程。胚胎移植涉及的技術(shù)環(huán)節(jié)較多,每一環(huán)節(jié)的工作都對(duì)胚胎移植的成功與否影響極大,需做好各環(huán)節(jié)的工作。

    關(guān)鍵詞:肉牛;胚胎移植;受體牛;供體牛;超數(shù)排卵;同期發(fā)情;飼養(yǎng)管理

    中圖分類號(hào):S823. 3+6

    文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:B

    文章編號(hào):2095-9737(2018)08-0053-01

    1 供、受體肉牛的選擇與飼養(yǎng)管理

    供體牛選擇品種特征明顯,具有較高生產(chǎn)性能的母牛,其遺傳性狀要求穩(wěn)定,并且要系譜清楚。受體牛一般選擇當(dāng)?shù)氐狞S牛品種,應(yīng)選擇14—15月齡,體重在360 kg以上的育成牛或者年齡在2.5~5歲的1—2胎的成年母牛。供、受體牛都要健康無(wú)病,繁殖性能良好,沒(méi)有流產(chǎn)史,發(fā)情周期正常,并且性器官的發(fā)育也要求正常。

    供、受體母牛都要進(jìn)行科學(xué)的飼養(yǎng)管理,合理的飼喂,提供適宜的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),營(yíng)養(yǎng)是影響母牛繁殖能力的主要因素,所提供的飼料要求多樣且品質(zhì)優(yōu)良,青飼料、粗飼料、精飼料以及各種飼料添加都要搭配合理,以保證肉牛攝入充足的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),同時(shí)還要保證母牛攝入充足且清潔的飲水。

    2 供體牛的超數(shù)排卵處理

    胚胎移植需要對(duì)供體母牛進(jìn)行超數(shù)排卵處理,以獲得多枚胚胎,一般要求供體母牛的排卵數(shù)量要在10枚左右,如果排卵數(shù)量過(guò)多,會(huì)易起卵巢囊腫,并且排卵效果不穩(wěn)定,如果排卵過(guò)少則會(huì)降低胚胎移植的意義,還會(huì)造成胚胎難以采集。超數(shù)排卵主要使用的藥物有促卵泡素( FSH)、氯前列烯醇(PG)或陰道栓(CIDR)等,超數(shù)排卵過(guò)程中在發(fā)情后的第9~13天,連續(xù)4天早晚肌注促卵泡素,中間間隔12 h,在注射后的第3天用氯前列烯醇處理?;蛘呖梢栽诠w牛發(fā)情期到來(lái)的前4天,即發(fā)情周期的第16天注射促性腺激素,然后在出現(xiàn)發(fā)情狀況的當(dāng)天注射絨毛膜促性腺激素。

    3 受體牛同期發(fā)情技術(shù)

    同期發(fā)情技術(shù)是胚胎移植的一個(gè)重要的環(huán)節(jié),可為超數(shù)排卵的供體牛在同一時(shí)間內(nèi)準(zhǔn)備足夠的用于移植的受體牛,通過(guò)與受體牛同期化處理可以使供、受體牛的生理狀態(tài)保持相同。在同期化處理時(shí),發(fā)情時(shí)間與供體牛最好提前一天,并且受體牛的處理頭數(shù)一般為供體牛的5倍。常用的同期發(fā)情技術(shù)為前列腺法,可分為一次前列腺法和二次前列腺法,一次法是對(duì)處于發(fā)情周期第10天的受體牛一次肌注前列腺素2~4 mL,誘導(dǎo)其發(fā)情,發(fā)情后第7天再進(jìn)行移植。二次法是對(duì)在第一次肌注前列腺素后的11天再次肌注前列腺素2—4 mL,在發(fā)情后第7天移植。實(shí)際表明,注射二次法的效果要優(yōu)于注射一次法。

    4 胚胎的采集與貯存

    胚胎的采集在母牛發(fā)情配種后的第7天進(jìn)行,將發(fā)情當(dāng)天視為0天,實(shí)施沖胚,在沖胚前需要通過(guò)直腸法檢查卵巢黃體的個(gè)數(shù),以判斷可沖出胚胎的個(gè)數(shù),在沖胚前需要準(zhǔn)備好器械和沖胚液,所有的器械都要嚴(yán)格的消毒,沖胚液則要提前在35~37℃的水浴鍋內(nèi)預(yù)熱。在操作時(shí)采用直腸把握法將沖卵管插入一側(cè)的子宮角的深部,注入沖卵液后將子宮角抬高,使沖卵液回流,并將其回收。一般一側(cè)的子宮角需要反復(fù)沖7次左右。沖胚結(jié)束后需要直接從沖管向子宮角內(nèi)灌注抗生素和氯前列烯醇。

    采集的的胚胎需要進(jìn)行檢查,并對(duì)胚胎進(jìn)行鑒定和分級(jí)。首先要將胚胎回收,一般使用沉淀法,將回收液靜置20 min后將上清去除,吸到液面還有2—2.5 cm深時(shí)即可。胚胎的鑒定要在顯微鏡下觀察胚胎分裂與否、形態(tài)色調(diào)、均勻度、細(xì)胞的密度等情況,并將胚胎分為A、B、C、D4級(jí)。其中A級(jí)的胚胎形態(tài)完整、輪廓清晰,為球形,分裂球大小均勻,結(jié)構(gòu)緊湊,透明度適中,無(wú)細(xì)胞和液泡附著;B級(jí)輪廓清晰,色調(diào)及細(xì)胞密度良好,可見到一些附著的細(xì)胞和液泡;C級(jí)輪廓不清,色調(diào)發(fā)暗,結(jié)構(gòu)較松散,游離的細(xì)胞或液體較多,變性的細(xì)胞達(dá)30% - 50%;D級(jí)未受精卵、16細(xì)胞以下受精卵、有碎片的退化卵及變性細(xì)胞超過(guò)一半的胚胎。其中A、B、C級(jí)胚胎為可用胚胎,并且A、B級(jí)為可冷凍胚胎,C級(jí)胚胎只能用于鮮胚移植,D級(jí)胚胎為不可用胚胎。

    一般采集的鮮胚需要進(jìn)行冷凍保存,以保持活力,可選擇常規(guī)冷凍法,將胚胎置于防凍液中平衡一段時(shí)間,然后裝管后以每分鐘降低0.3~0.5℃的速度降低至-7℃,植凍后溫度緩慢的降低至 35℃,平衡10 min后迅速置于液氮中保存。

    5 胚胎的解凍與移植

    胚胎移植可分為鮮胚移植和凍胚移植。凍胚在解凍后可直接移植,先從液氮中取出細(xì)管,置于空氣中10 s,然后再將其置于35℃溫水中10 s,將封口端剪去,裝入移植槍。輸胚采用直腸把握法,在輸胚前要考慮胚胎的發(fā)育情況和受體牛的發(fā)情時(shí)間,一般輸胚前需要確定受體牛處于發(fā)情周期的6~8天,并還要確定卵巢上有明顯的黃體存在,并且輸胚還要在有黃體一側(cè)的子宮角深處,操作的方法與人工授精相同。

    胚胎移植后要注意觀察受、供體牛的健康情況以及發(fā)情情況,對(duì)于供體牛在下次發(fā)情時(shí)可正常配種,如果受體牛在胚胎移植后仍發(fā)情,則說(shuō)明移植失敗,如果未表現(xiàn)出發(fā)情,則要觀察3~5個(gè)情期,并做好妊娠的診斷工作。

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