黔引迷迭香主要酚類成分分析及抗氧化活性比較

冷家歸　于二汝　李德文　王少銘　羅莉斯　侯穎輝

摘 要 采用高效液相色譜法（HPLC）對4種黔引迷迭香的多酚成分進(jìn)行定性和定量分析，并利用DPPH、ABTS自由基清除能力和鐵離子還原能力（FRAP）3種方法評價多酚成分的抗氧化能力。結(jié)果顯示4種材料均富含類黃酮、酚酸和二萜酚等多酚類化合物，總酚含量介于4 345.5～5 673.0 mg/100 g 。其中槲皮素、迷迭香酸、阿魏酸、綠原酸和鼠尾草酸是迷迭香最主要的酚類物質(zhì)。黔引迷迭香4號的抗氧化活性最高，利用DPPH、ABTS和 FRAP等3種方法檢測的結(jié)果依次為184.4、290.0、155.6 μmol/g。相關(guān)性分析表明，總酚與總抗氧化活性能力顯著相關(guān)，迷迭香酸對總抗氧化活性能力貢獻(xiàn)最大，其次為鼠尾草酸、槲皮素和水楊酸。本研究對于了解黔引迷迭香抗氧化活性成分，以及資源的進(jìn)一步開發(fā)利用具有重要指導(dǎo)意義。

關(guān)鍵詞 迷迭香；貴陽；多酚；HPLC；抗氧化活性

中圖分類號 S573 文獻(xiàn)標(biāo)識碼 A

Abstract Polyphenols in the leaves of four rosemary cultivars were extracted in alkyd mixture. The contents were identified and quantified using high performance liquid chromatography （HPLC）， and the antioxidant activities were evaluated using three different methods as DPPH， ABTS and FRAP assays. The results showed that the tested rosemarys were all abundant in polyphenols， such as flavonoid， phenolic acid and phenolic diterpenes. The contents of total phenolics in the four rosemarys were ranged from 4 345.5 to 5 673.0 mg/100 g. Among these phenols， quercetin， rosmarinic acid， ferulic acid， chlorogenic acid and carnosic acid were the main compounds. The results also showed that Qian 4 has the highest antioxidant activity， which was 184.4， 290.0 and 155.6 μmol/g determined by DPPH， ABTS and FRAP， respectively. Finally， correlation analysis indicated that rosmarinic acid made the largest contribution to the total antioxidant activity， while carnosic acid， quercetin and salicylic acid were the second greatest contributors. This study is valuable for understanding the compositions and further development and utilization of antioxidants in rosemary resources.

Keywords Rosmarinus officinalis L.； Guiyang； polyphenols； HPLC； antioxidant activities

DOI 10.3969/j.issn.1000-2561.2018.08.025

迷迭香（Rosmarinus officinalis L.）是唇形科迷迭香屬亞灌木，原產(chǎn)于地中海地區(qū)，目前世界各地廣泛栽培，在我國貴州、云南、廣西、海南、新疆和福建等地有一定種植面積。迷迭香植株中提取的非揮發(fā)性成分為多酚類物質(zhì)，具有抗菌消炎等活性。植物多酚包括3種主要類型的化合物：類黃酮、酚酸和二萜酚[1]。類黃酮主要包括槲皮素、芫花素和楊梅素等，具有抗菌、消炎和抗氧化等功能，其中槲皮素可用于抗癌、消炎和抗氧化[2-3]，而且已在美國市場上作為主要膳食補(bǔ)充劑廣泛使用[4]。酚酸類化合物具有抗病毒、抗菌、抗炎和抗氧化等生物活性[5-6]，主要包括迷迭香酸、水楊酸、咖啡酸、綠原酸、阿魏酸、對香豆酸和香草酸等成分。二萜酚包括鼠尾草酸和鼠尾草酚等，因其具有抗氧化和抗菌性，在食品、營養(yǎng)保健和化妝品行業(yè)的應(yīng)用越來越多[7]。

多酚廣泛存在于植物的莖、葉、皮、果內(nèi)，是植物重要的次生代謝產(chǎn)物，不僅與植物病蟲害及抗性有密切關(guān)系，也與人類生活息息相關(guān)。人們在食用糧食、蔬菜、水果及飲用茶過程中，都會攝入植物多酚，作為一類具有生物活性的天然化合物，多酚會對人的飲食、營養(yǎng)和健康產(chǎn)生影響。經(jīng)常食用富含多酚食品可以提高血漿的抗氧化能力，保護(hù)細(xì)胞免受自由基氧化反應(yīng)引起的氧化損傷，從而抑制多種氧化損傷引起的疾病[8-9]。因此，多酚是一類值得學(xué)者關(guān)注、研究和開發(fā)利用的天然化合物。研究表明，多酚對自由基的清除能力高于常用維生素C、維生素E和β-胡蘿卜素等抗氧化活性物質(zhì)，成為目前公認(rèn)的體外強(qiáng)抗氧化劑[10-11]。Chipault等[12]就32種香辛料的抗氧化活性進(jìn)行了研究，并認(rèn)為迷迭香和鼠尾草是研究天然抗氧化活性的良好材料。

貴州省農(nóng)業(yè)科學(xué)院香料研究所于2014年引進(jìn)了4種迷迭香資源，依次命名為黔引迷迭香1號、2號、3號和4號，前期已對4種資源在貴陽生態(tài)區(qū)生長發(fā)育的主要特征特性及其精油含量與成分進(jìn)行了分析[13]。本研究目的是明確4種黔引迷迭香葉片提取物中多酚組成與含量，并運用3種體外抗氧化活性法快速測定其抗氧化活性能力，為篩選天然抗氧化劑提供理論依據(jù)，以期開發(fā)天然抗氧化劑和食品添加劑。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 材料 供試材料為黔引迷迭香1號、2號、3號、4號，均種植在貴州省農(nóng)科院（26°N，106°E）貴陽試驗地香料資源圃，且在相同栽培條件下正常生長2年。迷迭香葉片采集時間為2016年9月，選擇天氣晴朗的中午采集，每個品種隨機(jī)取樣5株。取樣時，用枝剪從莖基部剪取整株，然后將樣品帶回實驗室，隨機(jī)采集100 g葉片，并立即冷凍干燥48 h直至恒重。干燥葉片加入液氮磨樣機(jī)（IKA A11， 德國）研磨成均勻細(xì)粉，然后過60目篩，將粉末儲存在棕色干燥器或–80 ℃冰箱中備用。

1.1.2 試劑 色譜級乙腈和甲醇購于賽默飛世爾（Thermo Fisher Scientific），分析純甲醇和甲酸購買自北京化工廠，三氟乙酸（TFA，≥99%）、福林-肖卡試劑、沒食子酸（GA）、6-羥基-2，5，7，8-四甲基色烷-2-羧酸（Trolox）和蘆?。ā?8%，PubChem CID： 5280805）購買自中國藥品生物制品撿定所，水楊酸（≥99%，PubChem CID： 338）、咖啡酸（≥99%，PubChem CID： 689043）、綠原酸（≥99%，PubChem CID： 1794427）、阿魏酸（≥99%，PubChem CID： 445858）、對-香豆酸（≥99%，PubChem CID： 637542）、香草酸（≥97%，PubChem CID： 8468）、槲皮素（≥98%，PubChem CID： 5280343）、芫花素（≥99%，PubChem CID： 5281617）、楊梅素（≥98%，PubChem CID： 5281672）均購自上海安譜實驗科技股份有限公司。1，1-二苯基-2-苦肼自由基（1，1-Diphenyl- 2-picrylhydrazyl radical，DPPH·+）、 2，2-聯(lián)氮-雙（3-乙基-苯并噻唑啉-6-磺酸）二銨鹽自由基[2，2-azino-bis （3-ethylbenzothia- zoline-6-sulphonic acid） diammonium salt，ABTS·+]、2，4，6-三（2-吡啶基）三嗪（2，4，6-tripyridyl-S-triazine，TPTZ）、迷迭香酸（≥98%，PubChem CID： 5281792）、鼠尾草酸（≥97%，PubChem CID： 65126）和鼠尾草酚（≥98%，PubChem CID： 442009）均購自Sigma-Aldrich（St. Louis， USA）。高效液相色譜（HPLC）分析用水由Milli-Q超純水系統(tǒng)（MA，美國）制備。

1.2 方法

1.2.1 總多酚的提取 總酚提取方法參考Zhang等[14]，有改動。稱取0.1 g研磨好的迷迭香葉片干粉放入10 mL離心管中，加入2 mL抽提溶劑（甲醇：水：甲酸：三氟乙酸=70：27：2：1，體積比），用漩渦儀漩渦混勻，然后將盛有樣品的離心管置于超聲清洗器中，25 ℃超聲輔助提取25 min， 12 000 rpm離心10 min，收集上清液，此過程重復(fù)3次，使樣品充分抽提，合并收集到的上清液并混勻，加入石油醚，去除抽提液中的葉綠素及其他脂溶性雜質(zhì)。將收集的抽提液存放于–20 ℃冰箱備用，樣品進(jìn)樣之前過0.22 ?m有機(jī)濾膜。每個材料均做3次重復(fù)處理。

1.2.2 總酚含量測定 總酚含量分析參考Folin- Ciocalteu法[15]測定，有改動。取待測迷迭香葉片提取液100 ?L與0.9 mL超純水依次加入10 mL試管中，補(bǔ)水5.0 mL，混勻，再加0.2 mL福林-肖卡試劑，充分搖勻，靜置2 min后，加入10%碳酸鈉溶液2.0 mL，混勻。讓溶液在室溫下避光反應(yīng)60 min后，用移液槍分別移取200 ?L加入96孔酶標(biāo)板，然后用酶標(biāo)儀（MULTISKAN GO，Thermo，F(xiàn)isher Scientific，美國）測量溶液在波長為750 nm處的吸光度。樣品中總酚含量用沒食子酸當(dāng)量（GAE）表示，單位為mg/100 g干重。

1.2.3 HPLC分析 通過HPLC測定迷迭香葉片中多酚成分，參考Liu等[16]方法，稍有改動，并用標(biāo)準(zhǔn)品定性定量。該分析設(shè)備配備有P680A LPG-4型二元梯度泵，ultiMate 3000自動進(jìn)樣器，TCC-100色譜柱控溫箱，戴安PDA-100二極管陣列檢測器。色譜柱為C18反相硅膠柱（Athena C18-WP， 4.6 mm×250 mm， 粒徑5 μm），保護(hù)柱為上海安譜科學(xué)儀器有限公司生產(chǎn)的C18反相保護(hù)柱。所用的流動相為：A相：0.1% 甲酸水溶液（v/v）；B相，乙腈。洗脫梯度為：0 min，30% B；2 min，30% B；16 min，60% B；31 min，90% B；33 min，30% B；35 min，30% B。每次進(jìn)樣10 μL，流速0.8 mL/min，柱溫控制在25 ℃。鼠尾草酸和鼠尾草酚檢測波長為280 nm，迷迭香酸、水楊酸、咖啡酸、綠原酸、阿魏酸、對香豆酸和香草酸檢測波長為330 nm，槲皮素、芫花素和楊梅素檢測波長為350 nm。使用二極管陣列檢測器在線記錄200～800 nm范圍內(nèi)的紫外-可見吸收數(shù)據(jù)。多酚化合物的含量以mg/100 g干重計。

通過標(biāo)準(zhǔn)品定性分析了多酚化合物，且逐一鑒定了其中的單個成分，并用外標(biāo)法對其進(jìn)行定量。每一個標(biāo)準(zhǔn)品都選取5個點作標(biāo)準(zhǔn)曲線，所有標(biāo)準(zhǔn)曲線都顯示了較好的線性度（r2>0.998 9）。13個化合物的校準(zhǔn)方程、線性范圍（mg/L）、測定系數(shù)（r2）、檢測限（LOD，mg/L）和定量限（LOQ，mg/L）、日間和日內(nèi)相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD），具體如表1所示。其中日間和日內(nèi)相對標(biāo)準(zhǔn)偏差分別小于3.09%（n=6）和2.78%（n=6）。樣品回收的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差分別小于2.70%，回收率在96.58%～102.33%之間，表明該方法具有較高的準(zhǔn)確性。

1.2.4 抗氧化活性測定 采用DPPH、ABTS和FRAP 3種方法來評價4種黔引迷迭香葉片提取的多酚總抗氧化能力。DPPH自由基清除能力的測定參照Brand-Williams等[17]方法并稍有改動。取50 μL葉片提取物加入到250 μL 0.5 mmol/L的DPPH溶液中暗反應(yīng)24 h，然后在波長為515 nm處測量其吸光度，用沒食子酸（GA）作標(biāo)準(zhǔn)曲線，標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍為100～600 μmol/L。結(jié)果用GA當(dāng)量表示，即μmol GAE/g。ABTS自由基清除能力的測定參照Zheng等[18]方法并稍作改動。取5 mL 7 mmol/L的ABTS溶液，加入88 μL 140 mmol/L的硫酸鉀溶液，輕輕混勻，在室溫下暗反應(yīng)14 h。用PBS緩沖液將ABTS·+溶液稀釋，將5 μL樣品加入到995 μL稀釋后的ABTS·+溶液中，在室溫下暗反應(yīng)10 min，然后在波長為732 nm處測量其吸光度。用Trolox作標(biāo)準(zhǔn)曲線，標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍為100～900 μmol/L。結(jié)果用Trolox當(dāng)量表示，即μmol TE/g。根據(jù)Benzie等[19]所述的方法進(jìn)行FRAP測定，有改動。將25 mL pH 3.6的醋酸鹽緩沖液，2.5 mL 10 mmol/L TPTZ溶液和2.5 mL 20 mmol/L的Fe3+溶液三者混合，配制成FRAP工作液。將5 μL待測樣品加入到995 μL FRAP工作液中，室溫下暗反應(yīng)15 min，然后在波長為593 nm處測量其吸光度。用Trolox作標(biāo)準(zhǔn)曲線，標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍為150～1 200 μmol/L。結(jié)果用Trolox當(dāng)量表示，即μmol TE/g。

1.3 數(shù)據(jù)分析

所有數(shù)據(jù)均為3個生物學(xué)重復(fù)，且用平均值（M）±標(biāo)準(zhǔn)差（SD）表示。數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析采用SPSS 19.0軟件完成。采用單因素方差分析和Duncan多重比較來確定不同組平均值在p<0.05水平上的顯著相關(guān)性，Pearson（雙側(cè)）相關(guān)檢測來確定抗氧化活性和多酚成分之間的相關(guān)性。

2 結(jié)果與分析

2.1 總酚含量

為了評價4種黔引迷迭香的抗氧化活性能力，分別測定了葉片提取物中總酚含量，結(jié)果見表2。4種迷迭香的總酚含量在4 345.5～5 673.0 mg/100 g之間。其中，黔引迷迭香1號的總酚含量最高；其次是黔引迷迭香4號，為（5 646.4±85.5） mg/100 g，黔引迷迭香3號為（5 537.0±84.2） mg/100 g，以黔引迷迭香2號的總酚含量最低。Sánchez- Vioque等[20]研究結(jié)果表明，利用超聲輔助有機(jī)溶劑提取迷迭香葉片中的總酚含量為4 400.0 mg/100 g。由此可見，在貴陽生態(tài)區(qū)生長的黔引迷迭香1號、3號和4號資源的總酚含量相對較高。

2.2 類黃酮含量

用標(biāo)準(zhǔn)品定量了槲皮素、芫花素和楊梅素3種類黃酮，其相對含量見表2。在4種黔引迷迭香中，槲皮素含量介于92.0～154.5 mg/100 g之間。其中，黔引迷迭香4號的槲皮素含量最高，其次是黔引迷迭香3號，黔引迷迭香2號的槲皮素含量最低。芫花素的含量在1.6～48.4 mg/100 g之間，以黔引迷迭香2號含量最高，其次是黔引迷迭香3號，以黔引迷迭香1號的芫花素含量最低。楊梅素含量介于14.6～48.9 mg/100 g之間，以黔引迷迭香4號的含量最高，黔引迷迭香2號的含量最低。故槲皮素是主要的類黃酮。

2.3 酚酸含量

本文研究的酚酸包含迷迭香酸、水楊酸、咖啡酸、綠原酸、阿魏酸、對香豆酸和香草酸共7種，其中迷迭香酸、阿魏酸和綠原酸是主要的酚酸，其相對含量見表2。迷迭香酸在4種資源中含量在349.4～515.3 mg/100 g之間，以黔引迷迭香4號的含量最高，黔引迷迭香2號的含量最低。水楊酸含量介于55.6～87.3 mg/100 g之間，黔引迷迭香3號的含量最高，黔引迷迭香2號的含量最低?？Х人岷拷橛?1.4～48.3 mg/100 g之間，綠

原酸含量介于104.5～156.2 mg/100 g之間。對香豆酸在4種材料中的含量介于21.2～49.0 mg/100 g之間，黔引迷迭香1號的含量最高，黔引迷迭香2號的含量最低。香草酸含量為37.0～146.7 mg/100 g之間，黔引迷迭香1號的含量最高，其后依次是黔引迷迭香2號、4號和3號。而阿魏酸在4種黔引迷迭香中的含量介于287.9～437.5 mg/100 g之間，其中黔引1號最高，黔引2號最低。由此可知，黔引迷迭香1號的綠原酸、咖啡酸、阿魏酸、對香豆酸和香草酸含量均最高。

2.4 二萜酚含量

本文鑒定了鼠尾草酸和鼠尾草酚，均是含量較高的二萜酚，其相對含量見表2，這與文獻(xiàn)報道的從新鮮迷迭香中提取的含量相近，且均是重要的二萜酚[5]。鼠尾草酸含量在904.9～1 639.3 mg/ 100 g 之間，其中黔引迷迭香4號含量最高，其次是黔引迷迭香3號[（1 391.9±56.1） mg/100 g]，黔引迷迭香2號的含量最低。鼠尾草酚含量在62.2～166.4 mg/100 g之間，以黔引迷迭香1號含量最高，黔引迷迭香4號的含量最低。故鼠尾草酸和鼠尾草酚均是主要的二萜酚類化合物。

2.5 抗氧化活性能力

DPPH、ABTS和FRAP法是評價抗氧化劑的抗氧化能力常用方法，3種方法的作用機(jī)理各不相同且各具優(yōu)缺點，目前國內(nèi)外還沒有統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)[17-19]。因此，本研究同時用以上3種方法來評價4種黔引迷迭香的抗氧化能力，結(jié)果如表3所示。3種方法測定結(jié)果均表明黔引迷迭香4號的抗氧化能力最強(qiáng)，黔引迷迭香2號的抗氧化能力最弱，上述3種方法所測得的迷迭香抗氧化能 力在數(shù)值上有一定區(qū)別，可以運用于快速檢測 體外抗氧化活性能力。4種迷迭香的DPPH自 由基清除能力在（142.3±2.0）～（184.4±1.0） μmol/g之間，其強(qiáng)弱依次為黔引迷迭香 4號、3號、1號和2號。ABTS自由基清除能力在（257.0±0.6） ～（290.0±0.5） μmol/g之間，其強(qiáng)弱依次為黔引迷迭香4號、1號、3號和2號。FRAP抗氧化活性能力在（112.3±6.5）～（155.6±6.6） μmol/g之間，其強(qiáng)弱依次為黔引迷迭香4號、3號、1號和2號。這說明黔引迷迭香4號、1號和3號具有較高的抗氧化活性能力，可作為研究天然抗氧化活性的資源材料。

2.6 多酚成分和抗氧化活性的相關(guān)性分析

本研究將3種抗氧化活性方法所得數(shù)值與總酚、3種類黃酮、7種酚酸和2種二萜酚的含量分別作相關(guān)性分析，結(jié)果見表4?？偡优cDPPH（p < 0.05，r = 0.928）、ABTS（p < 0.05，r = 0.945）和FRAP（p < 0.05，r = 0.949）均為p<0.05水平上顯著相關(guān)。

在類黃酮類成分中，槲皮素與DPPH（p < 0.05，r = 0.930）、ABTS（p < 0.05，r = 0.903）和FRAP（p < 0.05，r = 0.909）均為p<0.05水平上顯著相關(guān)。而芫花素和楊梅素與DPPH、ABTS和FRAP均無相關(guān)性。研究結(jié)果表明，槲皮素對迷迭香抗氧化能力的貢獻(xiàn)較高，故槲皮素是迷迭香葉片提取物中的活性較強(qiáng)多酚成分。

酚酸類成分中，迷迭香酸是主要的抗氧化活性成分之一[6]，水楊酸多見于植物防御機(jī)制的研究[21]。迷迭香酸與DPPH（p <0.01，r = 0.983）和FRAP（p <0.01，r = 0.990）為p<0.01水平上的極顯著相關(guān)，和ABTS（p <0.05，r = 0.970）為p<0.05水平上的顯著相關(guān)。水楊酸與DPPH（p < 0.05，r = 0.947）、ABTS（p < 0.05，r = 0.937）和FRAP（p < 0.05，r = 0.978）均為p <0.05水平上顯著相關(guān)?？Х人帷⒕G原酸、阿魏酸、對香豆酸和香草酸與DPPH、ABTS和FRAP均無相關(guān)性。研究結(jié)果表明，迷迭香酸和水楊酸對迷迭香抗氧化活性的貢獻(xiàn)較高，故均是抗氧化活性較強(qiáng)的多酚成分。

在二萜酚類成分中，鼠尾草酸與DPPH（p < 0.05，r = 0.942）、ABTS（p < 0.05，r = 0.916）和FRAP（p < 0.05，r = 0.930）均為p<0.05水平上顯著相關(guān)。鼠尾草酸是迷迭香提取物中豐富的多酚成分，且是主要的抗氧化活性成分，這與本文結(jié)果一致[7]。表4中鼠尾草酚與DPPH、ABTS和FRAP均無相關(guān)性，與前人研究不一致，可能是鼠尾草酸在一定條件下會轉(zhuǎn)化成鼠尾草酚所致[22]。

綜上可知，總酚對總抗氧化活性能力的貢獻(xiàn)較大，而迷迭香酸是總酚中對總抗氧化活性能力貢獻(xiàn)最大的成分，其次是鼠尾草酸、槲皮素和水楊酸。

3 討論

本文定性定量分析了在貴州貴陽生態(tài)區(qū)生長的4種黔引迷迭香中多酚的成分。結(jié)果表明，4種黔引迷迭香都含有豐富的多酚成分。其中槲皮素是典型的黃酮醇型類黃酮，還是植物中主要的抗氧化活性成分，也是極好的體外抗氧化劑，更是類黃酮家族中活性氧最有效的清除劑[2-3]，槲皮素的抗氧化能力源于分子內(nèi)存在兩個具有清除自由基能力的基團(tuán)，即B環(huán)中的鄰苯二酚酚基團(tuán)和AC環(huán)3位的OH基團(tuán)[23]；槲皮素常見于歐洲越橘（15.8 mg/100 g）、蔓越橘（8.3～14.0 mg/100 g）、沙棘果（6.2 mg/100 g）、番茄（0.5 mg/100 g）、洋蔥（22.6 mg/100 g）、生菜（2.0 mg/100 g）、芹菜（3.5 mg/100 g）和西蘭花（2.8 mg/100 g）等水果和蔬菜中[24-25]，說明迷迭香中槲皮素的含量均高于蔬菜和水果。而楊梅素在蔓越莓、黑醋栗、巖高蘭、歐洲越橘、藍(lán)莓和覆盆子中的含量介于1.4～14.2 mg/100 g之間[25]，可見黔引迷迭香中的楊梅素含量較高；此外，楊梅素還是天然的類黃酮，具有抗癌和抗誘變劑等生物活性，在自然界植物中廣泛存在[26]。

迷迭香酸、阿魏酸和綠原酸均是重要的酚酸，同前人研究結(jié)果一致[5， 27]。迷迭香酸在紫草科和唇形科植物中存在，主要具有抗病毒、抗菌、抗炎和抗氧化等生物活性[6]。阿魏酸是當(dāng)歸（Angelica sinensis）、大三葉升麻（Cimicifuga heracleifolia）和川穹（Lignsticum chuangxiong）等中藥植物中普遍存在的酚酸，具有低毒、容易在人體內(nèi)吸收等特點，還具有抗菌、消炎、抗血栓形成和抗癌活性，并廣泛應(yīng)用于食品和化妝品行業(yè)[28]。綠原酸在迷迭香、枸杞、咖啡、蘋果、梨、漿果和茄子等植物中存在，主要功能是體外抗氧化劑和預(yù)防心血管疾病[29-30]。

鼠尾草酸是主要的二萜酚，早在70年前首次從鼠尾草中提取鼠尾草酸，并在50年前對其進(jìn)行了鑒定，因其具有抗氧化和抗菌性，在食品、營養(yǎng)保健和化妝品行業(yè)的應(yīng)用越來越多[7]；鼠尾草酸在迷迭香、鼠尾草、羅勒、香蜂花、神香草和牛至等唇形科植物中廣泛存在，其含量在1.0～ 218.0 mg/100 g之間[7]，而在迷迭香中為30.0～500.0 mg/100 g之間，且在‘Severn Sea和‘Miss Jessopps Upright中含量較高[31]。Okamura等[32]報道鼠尾草酚含量為387.0 mg/100 g，毛萼迷迭香中的鼠尾草酚含量為（2 977.0±46.5） mg/100 g，且具有抗癌和消炎活性[5]。此結(jié)果表明，在貴陽生態(tài)區(qū)生長的4種黔引迷迭香的鼠尾草酸含量偏高，而鼠尾草酚含量偏低。

通過DPPH、ABTS和FRAP三種不同的抗氧化活性評價方法，評估了4種黔引迷迭香提取物中多酚的抗氧化活性能力。黔引迷迭香4號、黔引迷迭香1號和黔引迷迭香3號具有相對較高的總抗氧化活性能力，可作為食品添加劑或防腐劑的天然原材料。研究結(jié)果表明，主要的類黃酮、酚酸和二萜酚等成分對抗氧化活性有不同的貢獻(xiàn)。在本研究中，迷迭香酸、鼠尾草酸、槲皮素和水楊酸對抗氧化活性有較顯著的影響。其中迷迭香酸對總抗氧化活性能力的貢獻(xiàn)最大，然后依次是鼠尾草酸和槲皮素，與前人研究結(jié)果一致[6-7， 33]。這進(jìn)一步證明了迷迭香酸和鼠尾草酸是迷迭香葉片提取物中主要的多酚化合物。與此同時，本文中水楊酸是對總抗氧化活性能力有較大貢獻(xiàn)的酚酸類成分，而前人相關(guān)研究表明，水楊酸在植物病蟲害防御中發(fā)揮重要作用[21， 27]。此外，Kerio等[34]研究表明，多酚化合物含量越高，則其抗氧化活性能力相對越強(qiáng)，這與本文研究結(jié)果一致。因此，本研究結(jié)論對于深入了解迷迭香抗氧化活性成分和資源的開發(fā)利用具有重要指導(dǎo)意義。

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