建昌幫和中國藥典法炮制的山藥中多糖含量比較

鄭燕枝 謝明 吳火生

摘要[目的]比較建昌幫和中國藥典法炮制的山藥中多糖含量。[方法]采用超聲法提取山藥多糖，以料液比、提取時間、提取溫度為因素，通過正交試驗，得出提取山藥多糖的最優(yōu)條件，采用苯酚-硫酸法測定山藥水提液中多糖含量。[結(jié)果]山藥多糖提取的最佳工藝為料液比1∶30、提取時間1 h、提取溫度60 ℃。多糖含量從大到小依次為建昌幫法、中國藥典法、生品。[結(jié)論]建昌幫法炮制的山藥多糖高于中國藥典法，為建昌幫炮制法提供試驗依據(jù)。

關(guān)鍵詞 山藥；多糖；含量；建昌幫法；中國藥典法

中圖分類號 S632.1 文獻標識碼 A 文章編號 0517-6611（2018）22-0159-03

Abstract[Objective]The research aimed to compare the polysaccharide content of Jianchang group and Chinese pharmacopoeia method in Dioscorea opposite.[Methods]Ultrasonic method was used to extract polysaccharide from Dioscorea opposite. In the case of solid-liquid ratio， extraction time and extraction temperature，the optimum conditions for polysaccharide extraction from Dioscorea opposite were determined by orthogonal test. The content of polysaccharide in Dioscorea opposite extract was determined by phenol-sulfuric acid method.[Results]The best technology of polysaccharide extraction was material liquid 1∶30， extracting time 1 h， extraction temperature 60 ℃.The polysaccharide content from the largest to the smallest was Jianchang group，Chinese pharmacopoeia method，raw material.[Conclusion]The polysaccharide from Jianchang group is higher than that of Chinese pharmacopoeia. This paper provides experimental basis for the processing of Jianchang group.

Key words Dioscorea opposita Thunb.；Polysaccharides；Content；Jianchang group method；Chinese pharmacopoeia method

“建昌幫”是中國南方古藥幫和中藥炮制的重要流派之一，與“樟樹幫”合稱為“江西幫”，為全國13個大藥幫之一。它發(fā)祥于江西南城縣，以擅長傳統(tǒng)飲片加工炮制、藥村集散交易著稱。藥界至今還有 “藥不到樟樹不靈（齊），藥不過建昌不行”之說[1]。在中藥炮制加工的過程中，輔料是十分重要的附加物料，輔料品種多具有地方或者幫派特色。在豐富多樣的炮制輔料中，谷糠是建昌幫最具特色的輔料之一。谷糠，又稱谷殼、礱糠，是稻谷的外殼，在南方最為常見，入脾胃經(jīng)。用谷糠與藥共制，不僅能使藥物均勻受熱，色澤鮮艷，還能緩和藥性，增強藥物健脾祛濕的功效療效。谷糠的運用，在我國中藥炮制界獨具特色，“南糠北麩”是我國南北中藥炮制技術(shù)流派的顯著區(qū)別[2]。

山藥為薯蕷科植物薯蕷（Dioscorea opposite Thunb.）的根莖[3]，味甘，性平，歸脾、肺、腎經(jīng)，既是餐桌上常見的美味又保健的食品，也是常用的中藥材之一，具有補脾養(yǎng)胃、生津益肺、補腎澀精等功效，主治脾虛泄瀉、久痢、虛勞咳嗽、消渴、遺精等癥[4]。山藥多糖是懷山藥重要的生物活性成分，眾多研究發(fā)現(xiàn)懷山藥多糖具有調(diào)節(jié)免疫、抗氧化延緩衰老、抗腫瘤抗突變、降血糖降血脂、調(diào)節(jié)脾胃等作用[5-10]。筆者以多糖含量為指標，利用超聲提取法，經(jīng)單因素試驗考察最佳提取條件，并結(jié)合正交試驗設(shè)計，優(yōu)選山藥多糖超聲提取的最佳工藝；采用苯酚-硫酸法測定建昌幫和中國藥典法炮制的山藥中多糖含量，比較其差異，為建昌幫炮制法提供一定的試驗依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

山藥藥材購于福建百盛藥業(yè)有限公司。無水葡萄糖（分析純，批號20160615，國藥集團化學(xué)試劑有限公司）；苯酚（分析純，批號20160511，國藥集團化學(xué)試劑有限公司）；硫酸（分析純，批號2017111228， 三明市三圓化學(xué)試劑有限公司）；無水乙醇（分析純，批號20170516，國藥集團化學(xué)試劑有限公司）。

1.2 儀器與設(shè)備 UV1800PC-DS2型紫外可見分光光度計（上海美普達儀器有限公司）；AL204電子天平[梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司]；電子天平[賽多利斯科學(xué)儀器（北京）有限公司]；離心機（長沙湘智離心機儀器有限公司]；HH-4數(shù)顯恒溫水浴鍋（江蘇省金壇市榮華儀器制造有限公司）。

1.3 方法

1.3.1 山藥生品及炮制品的制備。

1.3.1.1 生品。山藥樣品，60 ℃烘干，備用。

1.3.1.2 中國藥典法（麥麩炒山藥）。先將炒制容器預(yù)熱至一定程度，均勻撒入定量的麥麩，中火加熱，即刻煙起，隨即投入山藥片，迅速拌炒至淡黃色，偶有焦黃斑，取出，篩去麥麩，攤開晾涼。100 g藥材用麥麩10～15 g。

1.3.1.3 建昌幫法（蜜谷糠炒山藥）。先將炒制容器預(yù)熱至一定程度，投入適量蜂蜜，煉蜜，待蜜冒魚眼泡，投入定量的谷糠，拌炒均勻后，投入山藥，以谷糠覆蓋山藥燜數(shù)秒后，快速翻炒，炒至亮黃色，取出，篩去谷糠，攤開晾涼。100 g藥材用谷糠100 g，蜂蜜30 g。

1.3.2 工藝流程。

山藥及其炮制品→分別粉碎→過12、18號套篩→80%乙醇超聲提取→棄去乙醇提取液→加水超聲提取→離心取上清液（5 000 r/min，5 min）→測定多糖含量。

1.3.3 山藥多糖提取的最佳條件。

分別考察不同的料液比、提取時間、提取溫度下，采用苯酚-硫酸法檢測山藥多糖含量，初步得到山藥多糖的最佳提取條件并進行正交設(shè)計優(yōu)化提取工藝。

1.3.3.1 葡萄糖標準曲線制作。精密吸取葡萄糖對照品溶液（0.1 mg/mL） 0.1、0.3、0.5、0.7、0.9、1.1 mL，加蒸餾水至2 mL，加入1 mL 5% 苯酚溶液和5 mL濃硫酸，于40 ℃水浴中加熱40 min，冰水浴5 min，按紫外—可見分光光度法（2015 年版《中國藥典》一部附錄） 規(guī)定， 490 nm 處測定吸光度，以吸光度為縱坐標、葡萄糖濃度（mg/L） 為橫坐標繪制標準曲線，計算回歸方程。

1.3.3.2 山藥多糖含量的測定。

精密稱取山藥干燥粉末1.00 g，置具塞錐形瓶中，精密加入80% 乙醇10 mL 超聲0.5 h，棄去乙醇提取液，加蒸餾水30 mL，60 ℃超聲1 h 提取多糖，離心，取上清液1 mL，加蒸餾水稀釋10倍，即得供試品溶液。精密量取供試品溶液0.5 mL于10 mL具塞刻度試管中后，按“1.3.3.1”方法測定吸光度，按標準曲線測定供試品中多糖含量，按下式計算山藥中多糖的含量。

1.3.3.3 山藥多糖提取工藝的優(yōu)化。

在單因素的基礎(chǔ)上，采用正交試驗優(yōu)化山藥多糖的提取工藝。以料液比、提取時間、提取溫度進行L9（33）正交試驗，以多糖含量為依據(jù)選出最佳工藝條件，具體試驗方案見表1。

1.3.4 建昌幫和中國藥典法炮制的山藥中多糖含量。方法同“1.3.3.2”項。

2 結(jié)果與分析

2.1 葡萄糖溶液標準曲線 以吸光度為縱坐標、葡萄糖濃度為橫坐標繪制標準曲線，得出線性回歸方程為Y=16.677X-0.015 2，相關(guān)系數(shù)r=0.999 5，表明葡萄糖濃度在0.005～0.055 mg/mL 線性關(guān)系良好。

2.2 山藥多糖提取的最佳條件

2.2.1 料液比對山藥多糖提取率的影響。精密稱取山藥干燥粉末1.00 g，置具塞錐形瓶中，選取不同的料液比（1∶10、1∶20、1∶30、1∶40 mL/g），精密加入80%乙醇10 mL 超聲提取30 min，棄去乙醇提取液，加蒸餾水，50 ℃超聲30 min，其他操作同“1.3.3.2”，結(jié)果見圖2。由圖2可知，山藥多糖的含量隨著料液比的增加而上升，但當料液比超過30 mL/g時，測得多糖含量開始降低。因此，初步確定最佳料液比為1∶30。

2.2.2 提取時間對山藥多糖提取率的影響。精密稱取山藥干燥粉末1.00 g，置具塞錐形瓶中，精密加入80%乙醇10 mL超聲提取30 min，棄去乙醇提取液，加蒸餾水30 mL，提取溫度50 ℃，選取不同的提取時間（15、30、45、60 min），其他操作同“1.3.3.2”，結(jié)果見圖3。由圖3可知，山藥多糖的含量隨著提取時間的延長而上升，但當時間超過45 min時，測得多糖含量開始降低。因此，初步確定最佳提取時間為45 min。

2.2.3 提取溫度對山藥多糖提取率的影響。精密稱取山藥干燥粉末1.00 g，置具塞錐形瓶中，精密加入80% 乙醇10 mL 超聲提取30 min，棄去乙醇提取液，加蒸餾水30 mL，超聲45 min，選取不同的提取溫度（30、40、50、60 ℃），其他操作同“1.3.3.2”，結(jié)果見圖4。由圖4可知，山藥多糖的含量隨著提取溫度的升高而上升，但當溫度超過50 ℃時，測得多糖含量開始降低。因此，初步確定最佳提取溫度為50 ℃。

2.3 正交試驗結(jié)果

采用正交試驗優(yōu)化山藥多糖的提取工藝。以料液比、提取時間、提取溫度進行L9（33）正交試驗，結(jié)果見表2。

由表2可知，超聲法提取山藥多糖的最佳條件為A3B3C3，即料液比1∶30、提取時間60 min、提取溫度60 ℃。極差分析表明，在超聲法提取山藥多糖的3個因素中，影響山藥多糖得率的主因子依次為提取溫度、料液比和提取時間。

2.4 建昌幫和中國藥典法炮制的山藥多糖含量測定

稱取山藥干燥粉末約1 g，置具塞錐形瓶中，精密加入80% 乙醇10 mL 超聲0.5 h，棄去乙醇提取液，加蒸餾水30 mL，60 ℃超聲1 h 提取多糖，離心，取上清液1 mL，加蒸餾水稀釋10倍，即得供試品溶液。精密量取供試品溶液0.5 mL于10 mL具

塞刻度試管中后，按“1.3.3.1”方法測定吸光度，按標準曲線法測定供試品中多糖含量，并計算山藥多糖的含量。結(jié)果表明（表3），建昌幫和中國藥典法炮制的山藥中多糖含量從大到小依次為建昌幫法、中國藥典法、生品。

3 結(jié)論

（1）超聲提取法提取山藥多糖的最佳工藝為料液比1∶30、提取時間60 min、提取溫度60 ℃。

（2）山藥經(jīng)建昌幫和中國藥典法炮制后多糖含量較生品均有所升高?？赡苁禽o料麥麩和谷糠能使山藥均勻受熱，質(zhì)地變得較生品疏松，從而有助于山藥多糖的溶出。且建昌幫法炮制的山藥多糖含量高于中國藥典法，可能與建昌幫所用的輔料蜜谷糠有關(guān)，具體有待進一步研究，該研究為建昌幫法炮制山藥提供了試驗依據(jù)。

參考文獻

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