常用殺蟲劑與球孢白僵菌的相容性及對溫室白粉虱的協(xié)同防效

姜靈　洪波　王新譜　賈彥霞

摘要

本試驗(yàn)測定6種常用殺蟲劑對球孢白僵菌孢子萌發(fā)、菌絲生長和產(chǎn)孢量的影響，并選取相容性高的殺蟲劑在10倍稀釋濃度下與球孢白僵菌復(fù)配對溫室白粉虱進(jìn)行防治。結(jié)果表明，球孢白僵菌與10%吡蟲啉WP的相容性最高，而與2.5%聯(lián)苯菊酯EC和20%高氯·噻嗪酮EC相容性較差，在10倍稀釋濃度下10%吡蟲啉WP對孢子萌發(fā)和菌絲生長的抑制率分別為12%和3.38%，產(chǎn)孢量為1.94×106個(gè)/mL。對白粉虱協(xié)同防效試驗(yàn)中，3個(gè)處理間存在顯著差異，復(fù)配藥劑的防效最高能達(dá)到85.19%，在防治3 d后一直維持在80%以上，高于單獨(dú)使用球孢白僵菌制劑和10%吡蟲啉WP的防效。因此，在溫室白粉虱的防治過程中，可利用生防真菌制劑與低濃度的化學(xué)殺蟲劑復(fù)配，從而達(dá)到增效作用。

關(guān)鍵詞

球孢白僵菌； 化學(xué)殺蟲劑； 相容性； 溫室白粉虱； 生物防治

中圖分類號：

S476.12

文獻(xiàn)標(biāo)識碼： B

DOI： 10.16688/j.zwbh.2017112

Compatibility of chemical pesticides with Beauveria bassiana and

synergistic control effect on Trialeurodes vaporariorum

JIANG Ling， HONG Bo， WANG Xinpu， JIA Yanxia

（College of Agriculture，Ningxia University， Yinchuan 750021， China）

Abstract

Impacts of 6 chemical pesticides on spore germination， mycelial growth and sporulation of Beauveria bassiana were determined under laboratory conditions， and control effects of the mixed B.bassiana and highly compatible pesticides with 10 fold dilution concentrations against Trialeurodes vaporariorum were investigated. The results showed that B.bassiana had the highest compatibility with imidacloprid 10% WP， but worse compatibility with bifenthrin 2.5% EC and betacypermethrin·buprofezin 20% EC buprofezin. The inhibitory rates of imidacloprid 10% WP at 10 fold dilution concentration on spore germination and mycelial growth were 12% and 3.38%， respectively， and the sporulation was 1.94×106 conidia/mL. There were significant differences among three test groups for synergistic control. Corrected control effect of the mixture of B.bassiana and imidacloprid 10% WP was 85.19%， higher than that using B.bassiana or imidacloprid 10% WP alone and maintained above 80% after three days of application. Therefore， the mixture of the entomopathogenic fungi and the low concentration pesticides was synergistic for the whitefly control.

Key words

Beauveria bassiana； chemical pesticide； compatibility； Trialeurodes vaporariorum； biological control

溫室白粉虱Trialeurodes vaporariorum屬半翅目Hemiptera粉虱科Aleyrodidae，寄主廣泛，以刺吸植物汁液為生，造成植株生長發(fā)育受阻，嚴(yán)重影響設(shè)施蔬菜的品質(zhì)，是為害設(shè)施蔬菜的主要害蟲之一[1]。對溫室白粉虱的防治一直以化學(xué)防治為主，造成其抗藥性不斷增強(qiáng)、環(huán)境污染加劇，農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留超標(biāo)等惡劣現(xiàn)狀。因此，利用病原真菌來防治粉虱成為國內(nèi)外專家學(xué)者研究的熱點(diǎn)[26]。病原真菌通過孢子等侵染體感染害蟲，作用過程緩慢，殺蟲率不高[7]，為彌補(bǔ)這一缺陷，專家學(xué)者在真菌制劑中添加低劑量生物學(xué)相容的高效低毒低殘留的化學(xué)農(nóng)藥，既縮短孢子侵染昆蟲的潛伏期，增強(qiáng)殺蟲效果又減少了化學(xué)藥劑的用量[8]。近年來，設(shè)施栽培產(chǎn)業(yè)成為寧夏戰(zhàn)略性主導(dǎo)產(chǎn)業(yè)之一，但隨著種植面積的增加，粉虱為害也日趨嚴(yán)重，已經(jīng)嚴(yán)重影響了蔬菜的產(chǎn)量、品質(zhì)和食品安全。在本試驗(yàn)中，我們就球孢白僵菌和6種溫室常用殺蟲劑的相容性進(jìn)行了研究，并利用球孢白僵菌和相容性較高的殺蟲劑在溫室栽培的番茄上進(jìn)行了對溫室白粉虱的協(xié)同防效試驗(yàn)，以探索在無公害蔬菜生產(chǎn)中有效控制粉虱為害的最佳途徑。

1 材料與方法

1.1 供試菌劑與藥劑

供試菌劑為球孢白僵菌粉劑（每克約含150億孢子），江西天人生態(tài)有限公司生產(chǎn)。取1 g球孢白僵菌粉劑溶解在100 mL無菌水中，磁力攪拌器攪拌均勻，取100 μL涂布于PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng)，待形成菌落，用打孔器打出菌餅在PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng)7 d備用。供試殺蟲劑為溫室中常用于防治白粉虱的化學(xué)殺蟲劑，種類見表1。

1.2 試驗(yàn)方法

采用含藥平板培養(yǎng)法進(jìn)行相容性試驗(yàn)，即在培養(yǎng)基中加入不同種類不同濃度的殺蟲劑，接種球孢白僵菌，測定其菌落生長抑制率和產(chǎn)孢量。

殺蟲劑濃度設(shè)置和含藥平板的制備：按產(chǎn)品推薦使用濃度（c）、5倍稀釋濃度（0.2c）、10倍稀釋濃度（0.1c）對殺蟲劑進(jìn)行設(shè)置。先配制成含推薦濃度殺蟲劑的PDA培養(yǎng)基，含殺蟲劑的培養(yǎng)基與正常培養(yǎng)基按1∶4的比例混合均勻配制成含5倍稀釋濃度殺蟲劑的培養(yǎng)基，按1∶9的比例配制成含10倍稀釋濃度殺蟲劑的培養(yǎng)基，充分混勻后倒入培養(yǎng)皿中，每皿大約20 mL，制成含藥平板，每個(gè)濃度設(shè)3次重復(fù)，以不含殺蟲劑的培養(yǎng)基為對照。

1.2.1 殺蟲劑對球孢白僵菌孢子萌發(fā)的影響

取備用的球孢白僵菌，將表面的孢子用含0.05%吐溫-80的無菌水洗脫，雙層紗布過濾掉菌絲，磁力懸浮器充分?jǐn)嚢?，將孢子濃度調(diào)到1×107個(gè)/mL，先配成含推薦濃度殺蟲劑的孢子懸浮液，按1.2中含藥平板的制備方法，利用不含殺蟲劑的孢子懸浮液分別稀釋成含5倍和10倍稀釋殺蟲劑的懸浮液。將含不同濃度殺蟲劑的孢子懸浮液置于搖床（25±1）℃，120 r/min，振蕩培養(yǎng)24 h，每種濃度設(shè)3個(gè)重復(fù)，不含殺蟲劑的孢子懸浮液為對照。利用血球計(jì)數(shù)板對各處理的孢子進(jìn)行計(jì)數(shù)，計(jì)算孢子萌發(fā)抑制率。

孢子萌發(fā)抑制率=對照組孢子萌發(fā)率-處理組孢子萌發(fā)率對照組孢子萌發(fā)率×100%。

1.2.2 殺蟲劑對球孢白僵菌菌絲生長的影響

取備用的球孢白僵菌，打取5 mm菌餅，接入含藥平板，以不加殺蟲劑的平板為對照。培養(yǎng)7 d后用十字交叉法測量各處理菌落直徑，計(jì)算不同濃度各種殺蟲劑對菌絲生長的抑制率。

菌絲生長抑制率=對照組菌落平均直徑-處理組菌落直徑對照組菌落平均直徑×100%。

1.2.3 殺蟲劑對球孢白僵菌產(chǎn)孢量的影響

取1.2.2中在含藥平板上培養(yǎng)的球孢白僵菌，用打孔器在菌落中心到邊緣1/2處打孔，制成直徑5 mm的菌餅，每個(gè)平板均勻取4個(gè)菌餅，放入20 mL含0.1%的吐溫-80無菌水中，玻璃棒搗碎，雙層紗布過濾掉培養(yǎng)基和菌絲，反復(fù)沖洗至50 mL，磁力懸浮器充分?jǐn)嚢杌靹?，用血球?jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，計(jì)算產(chǎn)孢量。

1.2.4 溫室藥效試驗(yàn)

供試作物：番茄，品種為‘京番301，寧夏天緣種業(yè)有限公司提供。

選擇與球孢白僵菌相容性好的殺蟲劑，與正常用量的球孢白僵菌粉劑進(jìn)行復(fù)配。在寧夏大學(xué)農(nóng)科實(shí)訓(xùn)基地的溫室，在番茄盛果期選取長勢一致的番茄苗進(jìn)行藥效試驗(yàn)。采用常規(guī)水肥管理。試驗(yàn)分為殺蟲劑推薦濃度、球孢白僵菌推薦濃度、復(fù)配藥劑3個(gè)處理。每個(gè)處理3次重復(fù)。小區(qū)面積為10 m2，按照隨機(jī)區(qū)組排列，各小區(qū)間以不做處理的番茄為間隔，每隔5行設(shè)一個(gè)小區(qū)，使各處理互不干擾。利用3WBD18背負(fù)式電動(dòng)噴霧器將藥液均勻噴灑在葉片表面，平均每個(gè)小區(qū)用藥量為1 L。對照組（CK）施用相同用量的清水。

統(tǒng)計(jì)方法：小區(qū)內(nèi)5點(diǎn)取樣，每點(diǎn)標(biāo)定3株，在標(biāo)定的植株中部標(biāo)記2葉片，統(tǒng)計(jì)溫室白粉虱成蟲的數(shù)量。施藥前一天統(tǒng)計(jì)溫室白粉虱基數(shù)，用藥后1、3、5、7 d，進(jìn)行活蟲數(shù)量統(tǒng)計(jì)，計(jì)算蟲口減退率及防效。為方便統(tǒng)計(jì)，在早晨溫室白粉虱活動(dòng)較弱時(shí)進(jìn)行計(jì)數(shù)。

蟲口減退率=處理前對照蟲量-處理后處理蟲量處理前處理蟲量×100%；

校正防效=（1-處理前對照蟲量×處理后處理蟲量處理后對照蟲量×處理前處理蟲量）×100%。

1.3 數(shù)據(jù)處理

所有試驗(yàn)數(shù)據(jù)利用Excel 2010和DPS 7.05軟件進(jìn)行處理，利用Duncan氏新復(fù)極差法分析數(shù)據(jù)的差異顯著性。

2 結(jié)果與分析

2.1 殺蟲劑對球孢白僵菌孢子萌發(fā)的影響

由表2可以看出：6種供試殺蟲劑在不同濃度下對球孢白僵菌的孢子萌發(fā)的影響不同，方差分析得出，同種殺蟲劑的不同濃度和相同濃度的不同殺蟲劑對球孢白僵菌的孢子抑制率存在顯著差異，在推薦濃度下，殺蟲劑對孢子萌發(fā)的抑制率都較高，5%啶蟲脒EC、2.5%聯(lián)苯菊酯EC和20%高氯·噻嗪酮EC對孢子萌發(fā)的抑制率達(dá)到100%，其他殺蟲劑也在90%以上。隨著濃度稀釋，殺蟲劑對孢子萌發(fā)的抑制率隨之減小，在10倍稀釋濃度下，10%吡蟲啉WP的抑制率最低，為12%，與其他5種殺蟲劑相比，10%吡蟲啉WP在各濃度下對孢子萌發(fā)的抑制率都最低。

2.2 殺蟲劑對球孢白僵菌菌絲生長的影響

由表3可以看出，6種供試殺蟲劑在不同濃度下對球孢白僵菌菌絲生長的抑制作用不同， 25%噻蟲嗪WG、10%吡蟲啉WP的不同濃度處理對球孢白僵菌菌絲生長的抑制率存在顯著差異；6種殺蟲劑在推薦濃度和5倍稀釋濃度下對菌絲生長的抑制率差異顯著，在10倍稀釋濃度下，25%噻蟲嗪WG和10%吡蟲啉WP的菌絲生長抑制率接近，無顯著差異，但與其他殺蟲劑差異顯著。6種供試殺蟲劑在推薦濃度下對菌絲生長的抑制率高低依次為：20%高氯·噻嗪酮EC>2.5%聯(lián)苯菊酯EC>5%啶蟲脒EC>20%烯啶蟲胺WG>25%噻蟲嗪WG>10%吡蟲啉WP。2.5%聯(lián)苯菊酯EC、5%啶蟲脒EC、20%高氯·噻嗪酮EC在各濃度下對菌絲生長有較強(qiáng)的抑制作用。推薦濃度下2.5%聯(lián)苯菊酯EC、20%高氯·噻嗪酮EC對菌絲生長抑制率都在80%以上，5%啶蟲脒EC也達(dá)到71.73%，5倍和10倍稀釋濃度下3種殺蟲劑的抑制率都在50%以上。25%噻蟲嗪WG、20%烯啶蟲胺WG在推薦濃度下對菌絲生長的抑制率分別為54.85%、59.92%，但在5倍、10倍稀釋濃度下抑制率較低。10%吡蟲啉WP在各濃度下對菌絲生長的抑制率都低于其他供試殺蟲劑，10倍稀釋下的抑制率僅為3.38%，對菌絲生長基本無抑制作用。

2.3 殺蟲劑對球孢白僵菌產(chǎn)孢量的影響

由圖1可以看出，6種供試殺蟲劑在不同濃度下對球孢白僵菌產(chǎn)孢量的影響不同，但各處理產(chǎn)孢量隨著殺蟲劑濃度降低而增加。方差分析得出，除10倍稀釋濃度下的10%吡蟲啉WP外，各濃度殺蟲劑處理的產(chǎn)孢量與對照組產(chǎn)孢量存在顯著差異，對照組的產(chǎn)孢量為2.25×106個(gè)/mL，添加10倍稀釋濃度10%吡蟲啉WP的球孢白僵菌產(chǎn)孢量為1.94×106個(gè)/mL，與對照組產(chǎn)孢量無顯著差異。其他5種殺蟲劑處理的產(chǎn)孢量都不超過1.5×106個(gè)/mL，培養(yǎng)基中添加各個(gè)濃度的10%吡蟲啉WP，球孢白僵菌的產(chǎn)孢量都高于其他供試殺蟲劑，并且10倍稀釋濃度下的10%吡蟲啉WP對球孢白僵菌的產(chǎn)孢量基本無影響。

2.4 殺蟲劑與球孢白僵菌相容性的綜合評價(jià)

綜合上述殺蟲劑對球孢白僵菌孢子萌發(fā)、菌絲生長和產(chǎn)孢量的試驗(yàn)結(jié)果，可得出10%吡蟲啉WP與球孢白僵菌的相容性最高。試驗(yàn)中， 25%噻蟲嗪WG和20%烯啶蟲胺WG對球孢白僵菌菌絲生長抑制較小，但對孢子萌發(fā)抑制較強(qiáng)且產(chǎn)孢量低，因此與球孢白僵菌的相容性較差；20%高氯·噻嗪酮EC、2.5%聯(lián)苯菊酯EC和5%啶蟲脒EC對孢子萌發(fā)、菌絲生長和產(chǎn)孢均抑制較強(qiáng)，與球孢白僵菌的相容性更差。10%吡蟲啉WP在田間推薦使用濃度下對菌絲生長的抑制率為37.55%，遠(yuǎn)低于其他5種供試殺蟲劑，產(chǎn)孢量為1.37×106個(gè)/mL，在供試殺蟲劑中對球孢白僵菌產(chǎn)孢影響較小，在5倍和10倍稀釋濃度下，10%吡蟲啉WP對球孢白僵菌的孢子萌發(fā)抑制率較低，在10倍稀釋濃度下對孢子萌發(fā)的抑制率僅為12%，對菌絲生長和產(chǎn)孢量基本無影響，是與球孢白僵菌相容性高的殺蟲劑。

2.5 10%吡蟲啉WP與球孢白僵菌復(fù)配對溫室白粉虱的防治效果

根據(jù)表4可以看出，藥后1 d，3種處理對溫室白粉虱的防效存在顯著差異，復(fù)配藥劑處理的防效最高為72.11%，單獨(dú)使用球孢白僵菌和10%吡蟲啉WP的防效分別為69.66%、65.22%，10%吡蟲啉WP防效較低。藥后3 d，3種處理對溫室白粉虱的防治效果存在顯著差異，復(fù)配藥劑處理的防效仍最高，為85.19%，10%吡蟲啉WP防效高于球孢白僵菌。藥后5～7 d，3種處理的防效仍存在顯著差異，單獨(dú)使用球孢白僵菌和10%吡蟲啉WP的防效維持在70%左右，復(fù)配藥劑的防效在80%以上。在整個(gè)防治過程中，復(fù)配藥劑的防效一直較高并能維持在80%以上，持效性優(yōu)于單獨(dú)使用一種藥劑。

3 結(jié)論與討論

利用生防真菌防治害蟲，既能長期有效地控制蟲口數(shù)量，又能緩解害蟲抗性增強(qiáng)的問題，并且生防真菌在低成本下即可實(shí)現(xiàn)大量生產(chǎn)，具有防治優(yōu)勢[9]。生防真菌利用活性孢子等侵染體侵染害蟲[7]，與殺蟲劑混用首先要考慮兩者的相容性。相容性高低與藥劑的種類和濃度有關(guān)，通常殺蟲劑的相容性高于殺菌劑，低濃度的殺蟲劑相容性優(yōu)于高濃度[1011]。

本文通過球孢白僵菌與6種殺蟲劑相容性試驗(yàn)得出，10%吡蟲啉WP與球孢白僵菌的相容性較高，尤其在10倍稀釋濃度下對孢子萌發(fā)和菌絲生長抑制較弱，且產(chǎn)孢量與對照組差異不顯著，這與許壽濤等的研究結(jié)果一致[8]，Alizadeh等利用球孢白僵菌制劑與亞致死濃度的敵百蟲復(fù)配防治馬鈴薯甲蟲[12]，耿博聞等利用低濃度的25%噻蟲嗪WG與黃綠綠僵菌復(fù)配防治褐飛虱，防效最高能提高63.8%[13]，也是由于在低濃度下殺蟲劑與生防真菌相容性較高。利用10倍稀釋濃度的10%吡蟲啉WP與球孢白僵菌進(jìn)行復(fù)配對溫室白粉虱進(jìn)行防治，防治效果比單獨(dú)用球孢白僵菌和10%吡蟲啉WP要好，混合菌劑在防治過程中防效最高能達(dá)到85.19%，且能一直穩(wěn)定在80%以上，速效性、持效性比單獨(dú)利用一種藥劑高。在陳斌等的研究中，利用球孢白僵菌與低濃度的10%吡蟲啉WP混配表現(xiàn)出對粉虱種群顯著的控制作用[14]，劉愛萍等利用白僵菌與印楝素復(fù)配防治亞洲小車蝗，田間防效能達(dá)到64.20%，遠(yuǎn)高于單獨(dú)使用一種藥劑的防效[15]。表明10%吡蟲啉WP與多種生防真菌相容性較高[1619]，利用10%吡蟲啉WP與生防真菌復(fù)配對害蟲進(jìn)行防治，既減少了化學(xué)藥劑的使用，又提高了防效。25%噻蟲嗪WG、10%吡蟲啉WP、5%啶蟲脒EC、20%烯啶蟲胺WG同為煙堿類殺蟲劑，與球孢白僵菌的相容性卻不同。生防真菌和殺蟲劑種類眾多且更新較快，因此，利用殺蟲劑與生防真菌復(fù)配防治害蟲，必須進(jìn)行相容性試驗(yàn)，確保兩者發(fā)揮更好的防治效果。在防治過程中，3種處理的防效都未達(dá)到90%，10%吡蟲啉WP的防效最高為83.46%，可能10%吡蟲啉WP為該溫室中防治白粉虱的常用殺蟲劑，導(dǎo)致白粉虱抗性提高，對此還應(yīng)對相關(guān)抗性試驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證。一般蟲生真菌侵染害蟲需要一定的時(shí)間，單獨(dú)施用菌劑應(yīng)該在1～2 d內(nèi)才會(huì)發(fā)揮作用，但試驗(yàn)中，施藥1 d后，校正防效達(dá)到了69.66%，是由于每次在統(tǒng)計(jì)活蟲數(shù)量時(shí)，被球孢白僵菌侵染后活動(dòng)遲緩的白粉虱未被計(jì)入，造成蟲口減退率較高，從而影響了校正防效。混合菌劑和球孢白僵菌的防效可能受溫室溫度、濕度的影響，一般溫度較高、偏濕的環(huán)境下生防真菌更容易侵染害蟲[20]，因此，在使用真菌制劑時(shí)要考慮使用環(huán)境因素（溫度、濕度等）對真菌生長的影響。

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（責(zé)任編輯：楊明麗）