胚胎停育患者血清TNF-α和IL-8的表達(dá)研究

柳勝賢,王 芳,劉格琳,吳成平

(鄭州大學(xué)附屬洛陽(yáng)中心醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)中心 471009)

胚胎停育是孕早期的一種常見(jiàn)病理現(xiàn)象，它不同于先兆流產(chǎn)，而是孕囊內(nèi)的受精卵尚未形成胚胎就停止了發(fā)育，通俗地說(shuō)就是胚芽無(wú)心管搏動(dòng)出現(xiàn)了枯萎[1]。胚胎停育不僅對(duì)孕婦身心健康造成極大的傷害，同時(shí)也給家人、親屬帶來(lái)負(fù)面影響，加重了社會(huì)負(fù)擔(dān)。造成胚胎停育的因素是多方面的，可能是染色體、內(nèi)分泌和自身抗體方面出現(xiàn)了問(wèn)題，也可能是血型不合、病毒感染、生長(zhǎng)環(huán)境變化而不適合胚胎生長(zhǎng)發(fā)育。近年來(lái)，隨著胚胎停育發(fā)生率不斷上升，全面了解胚胎停育的病因，并采取相應(yīng)的保護(hù)措施，在生殖醫(yī)學(xué)領(lǐng)域具有特殊意義[2]。有研究[3-4]表明，白細(xì)胞介素-8(inierleukin-8,IL-8)對(duì)早期滋養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)浸潤(rùn)、胚泡著床及胎盤(pán)形成有較大的促進(jìn)作用，而腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor，TNF-α) 水平升高則對(duì)胚胎發(fā)育產(chǎn)生較大抑制作用。為進(jìn)一步了解胚胎停育的發(fā)病機(jī)制與影響因素，筆者對(duì)胚胎停育患者血清中TNF-α和IL-8水平進(jìn)行了檢測(cè)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取本院2015年1月至2016年12月收治的61例胚胎停育患者為研究組，入選者均符合胚胎停育診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]，即有下列4種情形之一：(1)頭臂長(zhǎng)度大于或等于7 mm且無(wú)胎心；(2)孕囊平均直徑大于或等于25 mm且無(wú)胎心；(3)檢查出無(wú)卵黃囊的孕囊,14 d后復(fù)查未見(jiàn)有胎心的胚胎；(4)檢查出有卵黃囊的孕囊，11 d后仍不見(jiàn)有胎心的胚胎。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)既往有不良妊娠史、精子抗體陰性，性激素及甲狀腺功能檢查和夫婦染色體核型分析出現(xiàn)異常者；(2)停經(jīng)超過(guò)12周及患有子宮畸形、子宮肌瘤及生殖器官急感染等疾病者；(3)合并有嚴(yán)重內(nèi)科疾病及傳染性疾病者。另選同期來(lái)本院就診可見(jiàn)胚胎原始心管搏動(dòng)、既往無(wú)不良孕產(chǎn)史的50名正常早孕女性為對(duì)照組，兩組對(duì)象年齡、孕次、妊娠天數(shù)和孕囊直徑比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性，詳見(jiàn)表1。本研究經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，受試者均知情同意并簽署知情同意書(shū)。

表1 兩組對(duì)象臨床資料比較

1.2方法 所有研究對(duì)象于入組后次日空腹采集肘靜脈血3 mL，3 000 r/min離心25 min后置于-80 ℃冰箱中待檢。采用微粒子化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)血清孕酮，定量測(cè)定試劑盒購(gòu)自威海威高生物科技有限公司[魯食藥監(jiān)械(準(zhǔn))字2011第2400227號(hào)]，嚴(yán)格按試劑盒說(shuō)明進(jìn)行操作；TNF-α、IL-8采用放射免疫分析技術(shù)進(jìn)行測(cè)定，試劑盒購(gòu)自北京北方生物技術(shù)研究所，操作步驟嚴(yán)格按照試劑盒操作說(shuō)明進(jìn)行。

2 結(jié) 果

研究組患者血清孕酮的水平和IL-8水平明顯低于對(duì)照組，而TNF-α水平則明顯高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，見(jiàn)表2。

表2 兩組對(duì)象血清TNF-α和IL-8水平比較

3 討 論

所謂胚胎停育指早期胚胎停止生長(zhǎng)發(fā)育，導(dǎo)致胚胎“消失”，胚胎停育過(guò)去稱過(guò)期流產(chǎn)或稽留流產(chǎn)，雖然也是典型的妊娠終止，但其病理過(guò)程與先兆流產(chǎn)有很大差異[5-6]。導(dǎo)致胚胎停育的原因復(fù)雜，除遺傳、解剖、內(nèi)分泌、環(huán)境等因素外，近年來(lái)發(fā)現(xiàn)，人巨細(xì)胞病毒(human cytomegalovirus，HCMV)等病毒感染也極易導(dǎo)致胚胎停育[7]。而TNF-α和IL-8與HCMV感染的發(fā)生與擴(kuò)散有非常密切的關(guān)系。

TNF-α既是一種多功能細(xì)胞因子，也是一種強(qiáng)有力的誘導(dǎo)劑；它不僅對(duì)中性粒細(xì)胞具有趨化作用，也對(duì)細(xì)胞具有吞噬作用，還能促進(jìn)IL-8的合成及釋放，適量的TNF-α有利于調(diào)節(jié)滋養(yǎng)層細(xì)胞正常增殖、分化和凋亡，這對(duì)于懷孕女性能量代謝，提高孕激素及絨毛促性腺激素的合成，繼而植入胎盤(pán)、促進(jìn)胚胎發(fā)育，維持妊娠有較大的促進(jìn)作用[8]。但TNF-α水平過(guò)高又會(huì)激活促凝血酶原，使胎盤(pán)滋養(yǎng)血管素沉積、血栓形成，尤其是激發(fā)Th1型免疫反應(yīng)，排斥胚胎組織[9]。在本研究中，確診為胚胎停育的研究組患者TNF-α平均水平幾乎為對(duì)照組的5倍，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，這進(jìn)一步證明，胚胎停育的發(fā)生與孕婦體內(nèi)TNF-α的水平有密切的關(guān)聯(lián)性，在女性妊娠的初期，體內(nèi)TNF-α等細(xì)胞因子對(duì)妊娠的維持可起到極其重要的作用，水平過(guò)高或過(guò)低都會(huì)影響胎盤(pán)和胚胎的正常生長(zhǎng)[10]。尤其是TNF-α水平超高有利于HCMV的感染及擴(kuò)散，形成負(fù)性調(diào)節(jié)，加重孕母“免疫抑制”狀態(tài)，破壞了機(jī)體正常凋亡平衡，影響胚胎的營(yíng)養(yǎng)吸收和供給，出現(xiàn)胚胎停育[11]。

IL-8是一種受到機(jī)體內(nèi)多種因素調(diào)節(jié)的炎性細(xì)胞因子，在妊娠及女性生殖內(nèi)分泌、胚泡著床與胚胎生長(zhǎng)發(fā)育等環(huán)節(jié)扮演了重要角色[12]。有研究表明，IL-8通過(guò)介導(dǎo)體液免疫參與同種異體免疫耐受過(guò)程是相當(dāng)復(fù)雜的[13-14]。IL-8能刺激機(jī)體β細(xì)胞產(chǎn)生抗體及細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞分化，增強(qiáng)粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)活性，抑制母體的免疫排斥反應(yīng)，非常有利于胚泡植入和胚胎生長(zhǎng)發(fā)育；另一方面，IL-8作為T(mén)h2型細(xì)胞因子具有抗炎作用，也有利于妊娠。在本研究中，研究組患者外周血中IL-8水平明顯低于對(duì)照組(P<0.01)。筆者分析，其中的原因在于IL-8可使Th1/Th2保持平衡，母體對(duì)胚胎產(chǎn)生免疫耐受，能保證妊娠進(jìn)程的延續(xù)[15]，而研究組IL-8水平過(guò)低，母體免疫系統(tǒng)會(huì)對(duì)胚胎產(chǎn)生排斥，造成胚胎停育。

孕酮是卵巢分泌的具有生物活性的主要孕激素，給胚胎生長(zhǎng)及發(fā)育提供支持和保障。有研究[16]表明，滋養(yǎng)細(xì)胞中生存素的表達(dá)下降通過(guò)抑制滋養(yǎng)細(xì)胞增殖、分化，胎盤(pán)與子宮內(nèi)膜血管受阻，導(dǎo)致胚胎細(xì)胞凋亡，停止發(fā)育產(chǎn)生稽留流產(chǎn)，這其中，是否與血清中的IL-8有關(guān)還有待于進(jìn)一步的研究。

總之，導(dǎo)致胚胎停育的因素較多，相關(guān)病理也非常復(fù)雜，TNF-α水平增高，血清孕酮和IL-8水平降低是否可作為胚胎停育的預(yù)測(cè)指標(biāo)還需要進(jìn)一步進(jìn)行大樣本研究。本研究結(jié)果顯示，胚胎停育患者與正常早孕女性體內(nèi)孕酮、IL-8和TNF-α的水平相比較差異明顯，可以證實(shí)，IL-8和TNF-α作為多效性細(xì)胞因子，在維持胚胎正常發(fā)育過(guò)程中扮演了重要角色，IL-8和TNF-α都可改變?cè)袐D的免疫狀態(tài)和細(xì)胞因子的表達(dá)，通過(guò)凋亡異常相互作用影響胚胎正常發(fā)育[17]，為今后防治胚胎停育，尋找阻斷免疫因子作用的新療法提供了重要參考。

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