XpertMtb/RIF技術(shù)對(duì)結(jié)核病以及耐藥結(jié)核病的診斷應(yīng)用價(jià)值

張永強(qiáng),劉蘭瑞,張 雁,李京華,趙鳳芹,孫福強(qiáng)

(1.保定市疾病預(yù)防控制中心 結(jié)防科，河北 保定071000；2.保定市第五醫(yī)院 外科)

據(jù)WHO統(tǒng)計(jì)，我國(guó)是全球22個(gè)結(jié)核病流行嚴(yán)重的高負(fù)擔(dān)國(guó)家之一，結(jié)核病患病人數(shù)高居全球第2位，同時(shí)也是全球27個(gè)耐多藥結(jié)核病流行嚴(yán)重的高負(fù)擔(dān)國(guó)家之一，耐多藥結(jié)核病患者的估計(jì)人數(shù)高居全球第1位[1]。而傳統(tǒng)的診斷標(biāo)準(zhǔn)是抗酸桿菌染色法和結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)藥敏法，抗酸染色法敏感度較差，陽(yáng)性率低，固體培養(yǎng)藥敏技術(shù)培養(yǎng)周期很長(zhǎng)，延緩診斷和治療。隨著結(jié)核病實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)的不斷發(fā)展，新型的分子檢測(cè)方法Xpert MTB/ RIF(利福平) 已經(jīng)受到廣泛關(guān)注。作為一種全新的結(jié)核病快速檢測(cè)新方法，該方法既能檢測(cè)結(jié)核分枝桿菌，又能確定是否對(duì)利福平耐藥，本文采用Xpert MTB/ RIF技術(shù)檢測(cè)1736份初診疑似肺結(jié)核患者痰標(biāo)本，用以探討在結(jié)核病及耐藥結(jié)核病診斷中的臨床應(yīng)用價(jià)值。報(bào)告如下。

1 對(duì)象與方法

1.1對(duì)象以2014.7-2016.6本地結(jié)核病定點(diǎn)醫(yī)院1736例初診疑似肺結(jié)核患者為研究對(duì)象，將初診患者痰標(biāo)本同時(shí)做涂片鏡檢、固體培養(yǎng)和XpertMtb/RIF檢測(cè)。

1.2材料XpertMtb/RIF檢測(cè)試劑(Cepheid，USA)；抗酸染色液、羅氏培養(yǎng)基(珠海貝索生物技術(shù)有限公司)

1.3方法

1.3.1痰涂片檢查依據(jù)《中國(guó)結(jié)核病防治規(guī)劃痰涂片鏡檢標(biāo)準(zhǔn)化手冊(cè)》標(biāo)準(zhǔn)化操作執(zhí)行。

1.3.2固體培養(yǎng)、比例法藥敏依據(jù)《結(jié)核菌培養(yǎng)藥敏標(biāo)準(zhǔn)化操作及質(zhì)量保證手冊(cè)》標(biāo)準(zhǔn)化操作執(zhí)行。

1.3.3XpertMtb/RIF檢測(cè) 取1 ml痰標(biāo)本加入前處理管,視標(biāo)本性狀加入1-2倍標(biāo)本體積的處理液,渦旋振蕩15-30 s,靜置15 min。打開(kāi)反應(yīng)盒,吸取2 ml處理后標(biāo)本緩慢加入反應(yīng)盒,放入檢測(cè)模塊,儀器自動(dòng)檢測(cè)并報(bào)告結(jié)果。

1.3.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 將所有數(shù)據(jù)進(jìn)行分析和統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，采用EpiData 3.02建立數(shù)據(jù)庫(kù)，應(yīng)用SPSS13.0軟件進(jìn)行一般描述性分析和χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1XpertMtb/RIF對(duì)Mtb的檢測(cè)

以固體培養(yǎng)結(jié)果為參考標(biāo)準(zhǔn)，涂片法檢測(cè)Mtb的敏感度為79.81%(344/431)，特異度為99.25%(659/664)，XpertMtb/RIF檢測(cè)Mtb的敏感度為98.61%(425/431)，特異度為99.55%(661/664)；兩種方法的敏感度相比較，差異有顯著性(χ2=79.08，P<0.01)，特異度相比較，差異無(wú)顯著性(χ2=0.13，P>0.05)。詳見(jiàn)表1。

表1 三種方法檢測(cè)痰標(biāo)本抗酸桿菌結(jié)果(以培養(yǎng)法為參考標(biāo)準(zhǔn))

2.2XpertMtb/RIF對(duì)RIF的檢測(cè)

以比例法藥敏結(jié)果為參考標(biāo)準(zhǔn)， XpertMtb/RIF檢測(cè)RIF的敏感度為97.92%(47/48)，特異度為99.81%(1045/1047)；見(jiàn)表2。

表2 XpertMtb/RIF檢測(cè)利福平結(jié)果(以比例法藥敏試驗(yàn)為參考標(biāo)準(zhǔn))

3 討論

結(jié)核病是嚴(yán)重危害人民呼吸健康的呼吸道傳染病，被列為我國(guó)重大傳染病之一，我國(guó)結(jié)核病占全球結(jié)核病發(fā)病人數(shù)的14.3%，始終位于甲乙傳染病前列[2]。2007-2008年開(kāi)展的全國(guó)結(jié)核病耐藥性基線調(diào)查結(jié)果顯示，我國(guó)肺結(jié)核患者中耐多藥率為8.3%，據(jù)此估算，我國(guó)每年新發(fā)耐多藥患者12萬(wàn)例，占全球每年新發(fā)總數(shù)的24.0%，位列全球第二位[3]。

結(jié)核病診斷的金標(biāo)準(zhǔn)是標(biāo)本中發(fā)現(xiàn)結(jié)核分枝桿菌[4]，在痰標(biāo)本中檢出結(jié)核分枝桿菌是實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的主要目的。而理想的結(jié)核菌檢測(cè)技術(shù)應(yīng)具有快速、準(zhǔn)確、特異、敏感、方法簡(jiǎn)便的特點(diǎn)，這是長(zhǎng)期以來(lái)研究的主要方向。2010年12月，WHO首次向國(guó)際社會(huì)推薦了一種被稱(chēng)為“Xpert MTB/RIF”的結(jié)核病和利福平耐藥快速檢測(cè)。這種被WHO結(jié)核病防控專(zhuān)家稱(chēng)為近百年來(lái)在結(jié)核病診斷領(lǐng)域具有“里程碑”意義的分子檢測(cè)，能夠在2個(gè)小時(shí)內(nèi)，完成對(duì)結(jié)核桿菌和利福平耐藥的同時(shí)甄別[5]。

本研究利用Xpert MTB/RIF技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果顯示Xpert MTB/RIF檢測(cè)法的敏感度明顯高于涂片法，差異有顯著性，能提高結(jié)核菌的陽(yáng)性檢出率，與培養(yǎng)法有較好的一致性，一致率為99.18%[(425+661)/1095]，與李妍等[6]的相關(guān)報(bào)道一致，并且能大大提高涂陰患者的診斷；Xpert MTB/RIF檢測(cè)利福平耐藥的靈敏度和特異度均達(dá)到95%以上，與比例法藥敏實(shí)驗(yàn)有較好的一致性，一致率為99.73%[(47+1045)/1095]，與李輝等[7]的相關(guān)報(bào)道一致；丁秀秀等[8]研究表明，利福平耐藥患者81.6%為耐多藥結(jié)核病患者，可作為耐多藥患者的初步判斷。

借助Xpert MTB/RIF檢測(cè)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)結(jié)核和利福平耐藥的同時(shí)診斷。Xpert MTB/RIF檢測(cè)將耐藥結(jié)核的診斷時(shí)間從原來(lái)的2-3個(gè)月，縮短到2個(gè)小時(shí)之內(nèi)，既方便了臨床治療，同時(shí)也減少了患者可能造成的人群感染的風(fēng)險(xiǎn)。Xpert MTB/RIF高效、快速，有很高的靈敏性和特異性，應(yīng)用于結(jié)核病患者檢查，對(duì)基層醫(yī)療單位早期診斷結(jié)核病及耐藥結(jié)核病，控制結(jié)核病流行傳播具有重要意義。

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[7]李 輝，譚耀駒，李洪敏,等.利福平耐藥實(shí)時(shí)熒光定量核酸擴(kuò)增檢測(cè)技術(shù)的診斷效果對(duì)比研究[J].中國(guó)防癆雜志,2014,36(6):472.

[8]丁秀秀，譚守勇，譚耀駒,等.噬菌體法檢測(cè)利福平耐藥在耐多藥肺結(jié)核中的應(yīng)用價(jià)值[J].實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志,2012，28(24)：4088.