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    貴陽市三文魚轉(zhuǎn)基因成分檢測調(diào)查

    2018-04-12 02:24:58孫端方左澤彥田志強(qiáng)
    現(xiàn)代食品 2018年4期
    關(guān)鍵詞:內(nèi)源三文魚外源

    ◎ 孫端方,左澤彥,田志強(qiáng)

    (貴州省產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)院,貴州 貴陽 550016)

    當(dāng)前轉(zhuǎn)基因作物的研發(fā)和種植發(fā)展迅速,轉(zhuǎn)基因作物產(chǎn)品的利弊之爭也是全球熱點(diǎn),而轉(zhuǎn)基因動物卻通常只見于新聞媒體刊載的一些實(shí)驗(yàn)室先進(jìn)成果報道、分子生物學(xué)科普文章等。在2015年,美國FDA批準(zhǔn)AquaBounty Technologies公司的AquAdvantage轉(zhuǎn)基因三文魚上市;2017年,該公司完成了該三文魚的首次規(guī)模銷售,由此標(biāo)志著轉(zhuǎn)基因動物產(chǎn)品已開始進(jìn)入市場;截至當(dāng)前,市售轉(zhuǎn)基因動物產(chǎn)品也僅此三文魚一種。

    本文完稿時,未見我國農(nóng)業(yè)部批準(zhǔn)該三文魚進(jìn)入國內(nèi)市場。但目前跨國貿(mào)易蓬勃發(fā)展、進(jìn)口商品可謂海量,也常有漏網(wǎng)之魚悄然在市場銷售。為確保消費(fèi)者的知情權(quán)、了解相關(guān)產(chǎn)品情況、面向省內(nèi)開展實(shí)踐相關(guān)檢測技術(shù),對市售進(jìn)口三文魚食品進(jìn)行轉(zhuǎn)基因成分檢測的抽樣調(diào)研。

    1 材料與方法

    1.1 取樣、制樣

    樣品均為市場隨機(jī)抽樣,抽樣范圍為餐飲、散裝、包裝各10批次,分別編為1~10號樣品。樣品的取樣和前處理按SN/T 1194-2014執(zhí)行,進(jìn)行雙平行檢測。

    1.2 DNA提取

    DNA提取試劑盒為TaKaRa MiniBEST Universal Genomic DNA Extraction Kit Ver.5.0。樣品DNA提取后,用Thermofisher NanoDrop One進(jìn)行DNA純度和濃度測定,若1.6<OD260/280<1.8則進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn),否則重新進(jìn)行DNA提取。濃度若低于20 ng/μL,則用Millipore Microcon DNA fast flow (PCR grade)濃縮DNA濃度至20 ng/μL以上,若高于50 ng/μL,用ddH2O稀釋至50 ng/μL以下。

    1.3 檢測方法

    熒光PCR所用引物和探針根據(jù)AquAdvantage公開序列進(jìn)行設(shè)計,包括內(nèi)源基因和外源基因各一對。熒光PCR試劑為TaKaRa Premix Ex Taq (Probe qPCR),ROX plus,熒光PCR體系配置及反應(yīng)參數(shù)按上述試劑盒說明書,用熒光PCR儀ABI One step plus檢測。

    2 結(jié)果與分析

    餐飲、散裝、包裝中1號樣品的內(nèi)源和外源基因的熒光信號如圖1所示,內(nèi)源基因20<Ct值<30,熒光信號有明顯S型曲線;外源基因Ct值≥40,熒光信號無S型曲線;其余樣品與上述示例情況相同。陽性對照、陰性對照、空白對照的檢測結(jié)果均符合要求(圖略)。由上可知,未檢出含有轉(zhuǎn)基因成分的樣品批次。

    圖1 熒光PCR圖譜圖

    3 討論

    3.1 檢出率

    本次實(shí)驗(yàn)未檢出轉(zhuǎn)基因三文魚批次,表明當(dāng)前轉(zhuǎn)基因三文魚及相關(guān)產(chǎn)品尚未流入貴陽市場。

    3.2 檢測方法

    隨著基因工程在食品研究中的深入運(yùn)用,轉(zhuǎn)基因食品的市場化將從微生物、植物領(lǐng)域拓展到動物方面。目前,主流PCR檢測技術(shù)以基因序列為主要檢測對象,能夠滿足未來轉(zhuǎn)基因動物產(chǎn)品的基礎(chǔ)定性檢測需求,但目前仍有標(biāo)準(zhǔn)方法更新慢、深加工產(chǎn)品難檢測等常見問題。

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