姜黃素通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激信號(hào)通路誘導(dǎo)肝癌SMMC-7721細(xì)胞凋亡的作用研究

徐新明，陳健，陸榮柱，劉瑞文，馮浩，張明華

(1.江蘇大學(xué)附屬昆山醫(yī)院 肝膽外科，江蘇 蘇州　215300；2.江蘇大學(xué) 醫(yī)學(xué)院，江蘇 鎮(zhèn)江　212013)

1　材料與方法

1.1　材料

1.2　方法

1.3　統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

本實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，使用SPSS 16.0軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，多組樣本之間的比較采用單因素方差(ANOVA)分析，以P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)　　果

2.1　姜黃素對(duì)肝癌SMMC-7721細(xì)胞增殖的影響

2.2　姜黃素對(duì)肝癌SMM 7721細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白表達(dá)的影響

2.3　姜黃素對(duì)肝癌SMM 7721細(xì)胞凋亡的影響

姜黃素作用結(jié)束后，流式細(xì)胞儀檢測(cè)各組細(xì)胞凋亡情況。結(jié)果顯示，隨姜黃素濃度的增加，細(xì)胞凋亡率逐漸升高(圖5)。當(dāng)濃度為20 μM時(shí)，與對(duì)照組相比，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，在姜黃素濃度為50 μM時(shí)，細(xì)胞凋亡率最高(P<0.001)(圖5)。

3　討　　論

肝癌是一種惡性程度高、進(jìn)展迅速、預(yù)后差的惡性腫瘤，其全球發(fā)病率和死亡率分別為所有腫瘤的第七位和第四位[8]。因此，尋找低毒、高效的肝癌化療藥物成為中晚期肝癌治療的熱點(diǎn)。近年來(lái)，中草藥在腫瘤的治療中得到了進(jìn)一步的應(yīng)用，其在延緩病情進(jìn)展、提高患者的生存質(zhì)量中發(fā)揮著重要作用。姜黃素作為傳統(tǒng)的中草藥成分是從姜科植物的根莖中提取出的一種多酚類化合物，具有抗氧化、抗炎、抗動(dòng)脈粥樣硬化、抗微生物、抗突變等作用[9]。姜黃素不僅具有傳統(tǒng)中草藥的藥理活性，還具有獨(dú)特的抗腫瘤作用。研究顯示，姜黃素對(duì)多種腫瘤細(xì)胞有明顯的抑制作用，如對(duì)肝癌、乳腺癌、宮頸癌、肺癌等癌細(xì)胞均有增殖抑制作用[10]。

內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)(endoplasmic reticulum stress，ERS)是指內(nèi)質(zhì)網(wǎng)因藥物作用、鈣離子代謝紊亂、氧化應(yīng)激、缺血再灌注、營(yíng)養(yǎng)缺乏等體內(nèi)外多種因素，使ER的功能失調(diào)、內(nèi)環(huán)境發(fā)生紊亂而引起的一種應(yīng)激性反應(yīng)[15]。ERS可通過多條信號(hào)通路誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡(圖6)。其中GRP78是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上的特異性伴侶蛋白，與蛋白質(zhì)折疊修飾關(guān)系密切，其表達(dá)量的上調(diào)提示ERS的發(fā)生，是ERS發(fā)生的標(biāo)志性蛋白[16]。caspase-12位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔內(nèi)，是ERS誘導(dǎo)凋亡的中心環(huán)節(jié)[17]。CHOP為一種細(xì)胞應(yīng)激相關(guān)蛋白，在細(xì)胞增殖和分化中發(fā)揮重要作用。研究發(fā)現(xiàn)，CHOP在細(xì)胞正常的生理?xiàng)l件下幾乎不表達(dá)，而在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激時(shí)呈高表達(dá)狀態(tài)，高表達(dá)的CHOP參與調(diào)節(jié)下游細(xì)胞的凋亡相關(guān)基因和蛋白[18]。由圖6可以看出，caspase-12和CHOP的高表達(dá)，均可直接誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。

圖6內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激信號(hào)通路圖

[參考文獻(xiàn)]

[3] MENON L G,KUTTAN R,KUTTAN G.Inhibition of lung metastasis in mice induced by B16F10 melanoma cells by polyphenolic compounds[J].Cancer Lett,1995,95(1-2):221-225.

[5] 邱偉,劉陽(yáng),曹衛(wèi),等.姜黃素抑制肝癌細(xì)胞系HepG2的增殖、侵襲及其機(jī)制[J].現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué),2015(22):3221-3225.