李杰,覃智芳,顏彥,何成龍,何沙金
(遵義市第一人民醫(yī)院 心內科,貴州 遵義 563000)
選擇健康4~6月齡SHR Wistar鼠和正常大鼠(WKY)各40只,雌雄不限,SHR鼠體重350~400 g,平均(375.6±25.4)g,購自第三軍醫(yī)大學大坪醫(yī)院試驗動物中心;正常大鼠體重355~395 g,平均(373.8±31.2)g,購自第三軍醫(yī)大學實驗動物中心。所有大鼠分籠飼養(yǎng),適應環(huán)境1周后進行實驗。
大鼠隨機分成4組,分別為SHR對照組、SHR手術組、WKY對照組和WKY手術組,其中SHR對照組和WKY對照組均為假手術組,SHR手術組和WKY手術組接受RSD手術。RSD手術:術前禁食12 h,不禁水。腹腔注射水合氯醛0.35 mg·g-1麻醉后,大鼠俯臥位于固定臺上,從脊柱旁右側順肋骨緣切開皮膚,分離皮下組織和腰背筋膜,切開內斜肌,推開背長肌,暴露右腎,在手術顯微鏡下分離出腎動脈交感神經,采用同樣方法從左側分離左腎動脈交感神經,離斷交感神經。SHR對照組和WKY對照組行假手術,即不行離斷交感神經,逐層縫合皮下組織及皮膚。
1.3.1血壓于術前和術后4、8、16和24周采用全自動無創(chuàng)血壓測量系統(tǒng)測量鼠尾收縮壓和舒張壓,分別測量3次取平均值。檢測4組大鼠尾動脈收縮壓和舒張壓。
采用SPSS 20.0軟件進行統(tǒng)計分析,計量資料以均數±標準差表示,兩組間比較采用獨立樣本t檢驗,多組間比較采用單因素ANOVA分析,術前后不同時間點數據比較采用整體重復測量的方差分析;P<0.05認為差別有統(tǒng)計學意義。
SHR對照組、SHR手術組、WKY對照和WKY手術組術前、術后4周、8周、16周和24周收縮壓和舒張壓比較,采用重復檢測數據的方差分析,結果:(1) 不同時間點的收縮壓有差別;(2) 不同時間點的舒張壓有差別;(3) SHR對照組與SHR手術組的收縮壓和舒張壓有差別,SHR手術組的收縮壓和舒張壓較低;(4) WKY對照和WKY手術組的收縮壓和舒張壓有差別,WKY手術組的收縮壓和舒張壓較低。見表1。
表1手術前后不同組別大鼠血壓水平的比較
Tab1Comparisonofbloodpressurelevelindifferentgroupsofratsbeforeandafteroperation
參數時間SHR對照組SHR手術組WKY對照組WKY手術組F值P值收縮壓(mmHg)術前152.9±9.7153.6±8.696.4±7.296.9±7.0317.7440.000術后4周154.2±7.9132.9±7.5?97.1±7.490.1±6.7?335.4680.000術后8周153.7±8.1111.5±6.7?#96.8±6.887.4±6.5?345.8110.000術后16周153.9±8.695.4±6.2?#&97.5±6.486.3±6.0?400.1250.000術后24周159.4±9.294.2±6.4?#&97.2±7.185.1±5.7?#443.7600.000F值1.783256.1560.07210.819--P值0.1390.0000.9910.000--舒張壓(mmHg)術前115.5±7.0115.6±6.472.6±4.872.8±4.7362.4540.000術后4周116.2±6.792.7±5.1?73.1±4.871.5±4.5306.1630.000術后8周115.8±6.574.6±5.0?#72.8±4.970.2±4.6335.3590.000術后16周116.9±6.071.6±4.9?#&72.4±4.568.9±4.0?440.2330.000術后24周115.4±5.772.1±4.7?#&72.6±4.667.8±3.9?#440.8480.000F值0.182262.4150.0634.195--P值0.9470.0000.9930.004--
與術前比,*P<0.05,與術后4周比,#P<0.05,與術后8周比,&P<0.05
SHR對照組、SHR手術組、WKY對照和WKY手術組術前、術后4周、8周、16周和24周miR-150、miR-155、miR-124、miR-135a和miR-143/145比較,采用重復檢測數據的方差分析,結果:(1) 不同時間點的miR-150、miR-155、miR-124、miR-135a和miR-143/145有差別;(2) SHR對照組和SHR手術組的miR-150、miR-155、miR-124、miR-135a和miR-143/145有差別,SHR手術組的miRNAs較低;(3) WKY對照和WKY手術組的miR-150、miR-155、miR-124、miR-135a和miR-143/145無統(tǒng)計學意義。見表2和圖1。
表2手術前后不同組別大鼠血清miRNAs水平的比較
Tab2ComparisonofserummiRNAslevelsindifferentgroupsofratsbeforeandafteroperation
參數時間SHR對照組SHR手術組WKY對照組WKY手術組F值P值miR?150術前0.76±0.150.75±0.150.48±0.140.49±0.1423.1200.000術后4周0.75±0.160.65±0.16?0.47±0.150.49±0.1514.8580.000術后8周0.78±0.170.48±0.16?#0.49±0.160.48±0.1716.1650.000術后16周0.77±0.140.49±0.14?#0.51±0.130.46±0.1322.4570.000術后24周0.76±0.160.46±0.16?#0.50±0.150.47±0.1516.9300.000F值0.10613.7340.2330.159--P值0.9800.0000.9190.959--miR?155術前0.65±0.120.65±0.120.30±0.110.32±0.1158.2640.000術后4周0.66±0.130.52±0.12?0.32±0.120.31±0.1237.9260.000術后8周0.67±0.130.34±0.13?#0.34±0.130.34±0.1233.4560.000術后16周0.62±0.110.33±0.11?#0.31±0.130.32±0.1527.7040.000術后24周0.64±0.130.32±0.12?#0.31±0.120.33±0.1234.1650.000F值0.47930.0140.3080.167--P值0.7510.0000.8720.955--miR?124術前0.78±0.160.75±0.150.34±0.110.35±0.1557.0420.000術后4周0.75±0.150.53±0.11?0.36±0.130.36±0.1438.4810.000術后8周0.81±0.160.34±0.16?#0.35±0.140.34±0.1251.1420.000術后16周0.74±0.150.33±0.13?#0.34±0.130.34±0.1147.5930.000術后24周0.73±0.150.35±0.14?#0.33±0.140.35±0.1041.8040.000F值0.88433.9180.1530.089--P值0.4760.0000.9610.986--miR?135a術前0.72±0.160.76±0.150.27±0.110.26±0.1183.5320.000術后4周0.73±0.150.42±0.11?0.26±0.130.25±0.1554.2340.000術后8周0.72±0.190.29±0.16?#0.28±0.140.27±0.1339.4840.000術后16周0.76±0.150.29±0.12?#0.29±0.130.26±0.1267.8010.000術后24周0.75±0.160.27±0.14?#0.27±0.140.24±0.1162.6530.000F值0.25246.5000.1580.173--P值0.9080.0000.9590.952--miR?143/145術前0.52±0.080.57±0.050.25±0.040.24±0.06172.6710.000術后4周0.53±0.090.39±0.06?0.26±0.050.26±0.0579.5210.000術后8周0.56±0.070.25±0.07?#0.25±0.060.27±0.0893.3000.000術后16周0.54±0.090.26±0.05?#0.27±0.050.24±0.04110.0680.000術后24周0.55±0.070.24±0.06?#0.26±0.070.25±0.06106.1960.000F值0.772116.7840.4640.960--P值0.5460.0000.7620.433--
與術前比,*P<0.05,與術后4周比,#P<0.05
圖1各組大鼠術前血清miRNAs水平
Fig1SerummiRNAslevelinratsbeforeoperation
表3各組大鼠主動脈組織miRNAs表達水平的比較
Tab3ComparisonoftheexpressionlevelofmiRNAsintheaortaofratsineachgroup
參數SHR對照組SHR手術組WKY對照組WKY手術組F值P值miR?1500.61±0.120.37±0.110.38±0.100.37±0.1123.0860.000miR?1550.60±0.130.48±0.120.49±0.110.48±0.124.7400.004miR?1240.54±0.110.25±0.090.23±0.070.24±0.0760.1780.000miR?135a0.65±0.130.26±0.080.25±0.060.24±0.05109.0250.000miR?143/1450.42±0.090.23±0.070.20±0.050.22±0.0643.9440.000F值11.74024.33644.86433.600--P值0.0000.0000.0000.000--
綜上所述,RSD可降低SHR血壓,可能與降低主動脈組織和循環(huán)血清miRNAs表達有關,但可能機制還需進一步研究。
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