有柄石韋的化學(xué)及藥理研究進展

亓 雪,李 蘭,張穎穎*

(1.山東中醫(yī)藥大學(xué) 藥學(xué)院，山東 濟南 250355； 2.山東中醫(yī)藥大學(xué) 中醫(yī)學(xué)院，山東 濟南 250355)

有柄石韋[Pyrrosiapetiolosa(Christ) Ching]屬于水龍骨科(Polypodiaceae)石韋屬(Pyrrosia)，多年生常綠草本，又名長柄石韋、小石韋、石茶等。在我國主要分布于長江以南各省區(qū)、西南和華北等溫暖地帶[1]。生于巖石或樹干上。與其近緣種相比，有柄石韋在葉顯微和超微特征上存在明顯的區(qū)別，可以此進行進行區(qū)分[2]。國內(nèi)外化學(xué)成分和藥理作用研究表明，有柄石韋的主要活性成分為多糖、黃酮類、三萜類、揮發(fā)油類和多酚類等，其藥理作用包括降低血糖、抗氧化、抗炎利尿、護腎、增強免疫、促進傷口愈合、鎮(zhèn)咳祛痰、抑菌等。有柄石韋全草入藥，性甘、苦，微寒，有利尿、通淋、清濕熱的效用。臨床主要用于治療腎炎、肺熱喘咳、淋痛、小便不通等[3]。故此，本文就國內(nèi)外有柄石韋化學(xué)成分及藥理活性相關(guān)文獻進行系統(tǒng)總結(jié)，分析其研究現(xiàn)狀，探討深入闡明其化學(xué)成分及藥理活性的研究方向。

1 化學(xué)成分

1.1 多糖

多糖類有降低血糖、調(diào)節(jié)免疫、抗炎等[4-5]藥理活性。目前，國內(nèi)外主要對有柄石韋總多糖含量、提取工藝等方面做了一定研究。高麗麗等[6]研究了不同類別石韋總多糖含量，結(jié)論為廬山石韋的總多糖含量最高，有柄石韋次之。程丹丹[7]用正交試驗法優(yōu)化了有柄石韋中多糖成分的提取工藝，選用苯酚-硫酸法[8-9]測定了其多糖含量，研究其多糖的最佳提取方法。李春磊等[10]研究發(fā)現(xiàn)，不同地區(qū)和不同部位中，有柄石韋總多糖含量有所不同。總多糖含量最高的樣品產(chǎn)自山東膠東，市售藥材中含量最低；各部位中葉總多糖含量較高，根莖總多糖相對較低。

1.2 黃酮類

當(dāng)前研究顯示，石韋屬中黃酮類主要為黃酮、黃酮醇、二氫黃酮及苷元類[11]。其中苷元類主要包括槲皮素(Quercetin)、柚皮素(Naringenin)、木犀草素(Luteolin)和棉皮素(Gossypetin)等[12-14]。張起超等[15]研究表明，在不同地域中，產(chǎn)自昆明的有柄石韋總黃酮含量最高；各部位中葉的總黃酮含量最多。黃酮類物質(zhì)具有抗氧化、抗炎和促進傷口愈合等多種藥效作用，有柄石韋中黃酮類含量較為豐富，因此有效提取與利用有柄石韋中的黃酮類成分對臨床藥用研究具有重要意義。劉靜等[16]對有柄石韋總黃酮大孔樹脂分離純化工藝進行了正交實驗篩選優(yōu)化，董倩倩[17]和韓晨晨[18]也分別進行了類似總黃酮提取工藝優(yōu)化。

1.3 三萜類

目前從石韋、廬山石韋和有柄石韋中提取到的三萜類成分主要有達瑪烷、何柏烷和環(huán)阿屯烷等[11]。從有柄石韋中主要分離得到的三萜類化合物為里白烯[19-20]。此外，在其全草中還分離得到環(huán)阿屯烷型三萜24-亞甲基-24-9,19-環(huán)羊毛甾-3β-乙酸酯和環(huán)桉烯醇[20]。

1.4 揮發(fā)油類

薛愧玲等[21]對有柄石韋葉以頂空固相微萃取和氣-質(zhì)聯(lián)用技術(shù)進行了分析研究，發(fā)現(xiàn)含有39種揮發(fā)油成分。其中的壬醛和2,6-二叔丁基對甲苯酚兩種成分在各領(lǐng)域應(yīng)用較廣。壬醛香味濃郁，可調(diào)制香精。2,6-二叔丁基對甲苯酚是常用的抗氧化劑之一，在食品、藥品和化妝品等各領(lǐng)域被廣泛應(yīng)用[22]。

1.5 多酚類

目前從有柄石韋中分離得到的多酚物質(zhì)主要包括綠原酸、咖啡酸、香草酸和α-生育酚等。多酚類物質(zhì)具有多種活性，其藥用價值較高，其中的綠原酸等物質(zhì)為《中國藥典》指定指標(biāo)成分，國內(nèi)文獻研究較多。程丹丹等[23]優(yōu)化了有柄石韋總多酚的提取方法。邵尉[24]采用HPLC法同時測定有柄石韋中綠原酸、原兒茶酸、咖啡酸等的含量，高貝等[25]也利用HPLC法對有柄石韋中綠原酸的含量進行測定，上述研究均為藥用有柄石韋成分檢測及品質(zhì)控制提供了重要依據(jù)。

2 藥理作用

2.1 降低血糖

王兵等[4]通過以NIH小鼠注射四氧嘧啶建立糖尿病模型進行試驗，發(fā)現(xiàn)石韋多糖作用后，正常小鼠血糖值無明顯變化，但可有效降低四氧嘧啶糖尿病小鼠的血糖值、血清及胰腺組織過氧化脂質(zhì)含量，增強糖尿病小鼠負(fù)荷糖耐量。石韋多糖作用后正常小鼠血糖水平無顯著變化，說明該多糖對胰島素分泌無刺激作用，可能通過其他途徑降低血糖。

2.2 抗氧化

丁文慧等[26]研究了有柄石韋醇提物的抗氧化活性。結(jié)果顯示，有柄石韋醇提物的總抗氧化能力和還原能力較強，高于抗壞血酸，顯示了較好的抗氧化活性。陳沖[27]等研究了有柄石韋酯提物抗氧化活性，并分析了其活性物質(zhì)，發(fā)現(xiàn)其酯提物亦有較好抗氧化活性，可有效清除DPPH自由基，且清除作用與其濃度成正比。此外，GC-MS數(shù)據(jù)表明，有柄石韋酯提物抗氧化活性成分主要是糖苷類和酚類。

2.3 抗炎利尿

程丹丹等[28]用二甲苯致小鼠耳腫脹模型，分析了有柄石韋提取物的抗炎活性，發(fā)現(xiàn)有柄石韋乙醇提取物可有效降低二甲苯引起的小鼠耳腫脹，最高抑制率達到67%。童玉懿等[29]的實驗結(jié)果證實，有柄石韋在灌胃量為2g/kg時，4h利尿作用明顯。

2.4 護腎

邵紹豐等[30]研究表明，石韋屬植物能有效預(yù)防大鼠產(chǎn)生腎結(jié)石。石韋作用后，發(fā)現(xiàn)模型大鼠腎集合系統(tǒng)內(nèi)草酸鈣結(jié)晶的堆積顯著降低，結(jié)晶趨于疏松，故更易排出，有效降低了模型大鼠腎組織中草酸鈣含量，其藥效近似于西藥枸櫞酸鉀。

2.5 增強免疫

多糖類成分的抗補體作用可有效抑制補體系統(tǒng)的過度激活，進而維護機體免疫防御系統(tǒng)的免疫功能[5]。課題組前期研究發(fā)現(xiàn)，有柄石韋多糖在體外可顯著促進小鼠脾臟細(xì)胞和Raw264.7巨噬細(xì)胞增殖，分析其可能有一定的免疫增強作用。此外，有柄石韋中黃酮類含量較為豐富，黃酮類化合物具有一定的免疫調(diào)節(jié)功能，可通過對巨噬細(xì)胞、NK細(xì)胞等的作用和影響胸腺進行免疫調(diào)節(jié)[31]。

2.6 促進傷口愈合

孔祥耀等[32]以小鼠全層切除模型研究了有柄石韋孢子葉水提物傷口愈合的影響。實驗結(jié)果顯示，有柄石韋能加速小鼠傷口的愈合，但作用效果低于云南白藥。民間通常將有柄石韋用作刀傷藥以促進傷口愈合且療效顯著。

2.7 鎮(zhèn)咳祛痰

上海第一醫(yī)學(xué)院的研究表明，兩種廬山石韋提取物對小鼠均有明顯的鎮(zhèn)咳作用。其主要有效成分主要包括異芒果甙和咖啡酸，其中的咖啡酸還有祛痰作用[33]。此外，有柄石韋提取液也有一定鎮(zhèn)咳作用[34]。

2.8 抑菌

龐榮等[35]運用平板稀釋法對有柄石韋活性成分的抑菌作用進行了研究，進行抗菌活性實驗，結(jié)果表明：有柄石韋對金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、銅綠假單胞菌等多種病原菌均有一定抑制效果，產(chǎn)生抑菌作用的主要物質(zhì)是黃酮類。李姝等[36]通過對一株石韋內(nèi)生真菌S-34的鑒定及其代謝物檢測與分析，發(fā)現(xiàn)有柄石韋內(nèi)生真菌S-34的代謝產(chǎn)物中含有較為豐富的抑菌活性物質(zhì)。楊小帆等[37]篩選出兩株有柄石韋內(nèi)生細(xì)菌(L. sphaericus C3-41 和B. amyloliquefaciens FZB42)，發(fā)現(xiàn)其對創(chuàng)傷傷口感染和食源性污染主要病原菌有明顯的抑制作用。

3 結(jié)論

在我國，有柄石韋具有悠久的藥用歷史，藥用價值較高，是傳統(tǒng)的藥用植物。有柄石韋資源分布廣泛，近緣種較多，在開發(fā)與利用時應(yīng)加強對有柄石韋及其近緣種的區(qū)別。有柄石韋含多糖、黃酮、揮發(fā)油、萜類等多種藥用成分，不斷優(yōu)化有效成分提取工藝，對提高藥物的有效利用率具有重要意義。

目前國內(nèi)外對石韋屬植物的研究較多，但對有柄石韋的研究相對較少，具體的化學(xué)成分和藥理作用研究不夠深入?？傮w看來，一方面現(xiàn)有有柄石韋化學(xué)成分研究對象多為總成分，如總多糖、總黃酮及總揮發(fā)油，其具體有效成分尚未充分闡明；另一方面，藥理作用研究亦多集中于總多糖、總黃酮等粗提取物，其中具體活性成分尚未確定，且相關(guān)組分的作用機制也沒有得到具體闡釋。故此，今后的有柄石韋研究中，應(yīng)深入開展有效成分研究，對其多糖、黃酮、揮發(fā)油等各種組分進一步分離純化，探明有柄石韋藥效作用中主要單一組分或單體；在分子細(xì)胞水平深入開展機制研究，探究有效成分作用的信號通路及其關(guān)鍵靶點，為深入開發(fā)有柄石韋的藥用價值，研制臨床新型中藥提供依據(jù)。