芒柄花黃素對阿爾茨海默病小鼠學(xué)習(xí)記憶能力及海馬β—淀粉樣蛋白前體蛋白的影響

費洪新　沈博　陳玉琦　潘思文　明玥　張英博

【摘要】目的 探討芒柄花黃素（FMN）對阿爾茨海默?。ˋD）小鼠學(xué)習(xí)記憶及海馬β-淀粉樣蛋白前體蛋白（APP）的影響。方法 小鼠隨機分成對照組、模型組、多奈哌齊組（1 mg/kg）、FMN高劑量組（30 mg/kg）、FMN中劑量組（15 mg/kg）、FMN低劑量組（7.5 mg/kg）。采用β-淀粉樣蛋白

1-42（80pmol/?L）雙側(cè)腦室注射的方法誘導(dǎo)AD模型，連續(xù)治療40天后取材。采用Morris水迷宮檢測AD小鼠學(xué)習(xí)記憶能力，采用酶聯(lián)免疫吸附檢測AD小鼠海馬APP含量。結(jié)果 與對照組比較，模型組小鼠潛伏期明顯延長（P<0.05）；與模型組比較，F(xiàn)MN高劑量組（30 mg/kg）和FMN中劑量組（15mg/kg）小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力明顯改善（P<0.05），包括潛伏期明顯縮短（P<0.05），游泳距離明顯減少（P<0.05），目標(biāo)停留時間明顯延長（P<0.05），跨平臺次數(shù)明顯增加（P<0.05），游泳軌跡多為直線型和趨化型，并且海馬APP水平明顯降低（P<0.05）。結(jié)論 FMN能改善AD模型小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力，F(xiàn)MN能夠通過抑制APP在AD治療中發(fā)揮重要的作用。

【關(guān)鍵詞】芒柄花黃素；阿爾茨海默??；學(xué)習(xí)記憶；β-淀粉樣蛋白前體

【中圖分類號】R28 【文獻標(biāo)識碼】B 【文章編號】ISSN.2095-6681.2017.35..02

阿爾茨海默病是一種常見的機體神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病之一，其病理特征為腦組織神經(jīng)元外沉積β-淀粉樣蛋白，而β-淀粉樣蛋白來源于β-淀粉樣蛋白前體蛋白，APP經(jīng)過一系列的剪切、修飾后可以形成β-淀粉樣蛋白，β-淀粉樣蛋白異常積累后還可以誘發(fā)機體學(xué)習(xí)記憶能力減退，進而引起行為學(xué)異常，由此分析，AD因為APP含量增加致使β-淀粉樣蛋白異常積累出現(xiàn)學(xué)習(xí)記憶能力減退是具有理論依據(jù)的。課題組前期研究顯示，補陽還五湯（黃芪、當(dāng)歸、赤芍、川芎、地龍、紅花、桃紅）對AD模型形態(tài)學(xué)、學(xué)習(xí)記憶、細胞凋亡、血腦屏障、核轉(zhuǎn)錄因子-κBp65[1]等有改善作用，補陽還五湯含藥血清或補陽還五湯對肝纖維化模型具有改善作用。

1 材料與方法

（1）安排好實驗儀器、實驗試劑、實驗動物、復(fù)制模型

分組給藥，包括對照組、模型組、多奈哌齊組、FMN高劑量組、FMN中劑量組、FMN低劑量組，每組8只，共48只。對照組和模型組小鼠給予生理鹽水灌胃，多奈哌齊組小鼠給予多奈哌齊1 mg/kg灌胃，F(xiàn)MN高劑量組、FMN中劑量組、FMN低劑量組小鼠分別給予FMN 30、15、

7.5 mg/kg灌胃，各組小鼠灌胃給藥40天。

（2）FMN對AD小鼠學(xué)習(xí)能力、記憶能力的影響

各組小鼠灌胃結(jié)束后，經(jīng)過1天的休整期，采用Morris水迷宮系統(tǒng)訓(xùn)練和測定各組小鼠學(xué)習(xí)能力。

（3）統(tǒng)計FMN對AD小鼠學(xué)習(xí)記憶保持能力的影響，F(xiàn)MN對AD小鼠海馬APP的影響。

（4）統(tǒng)計學(xué)分析

采用SPSS19.0統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進行分析，計數(shù)資料以百分數(shù)（%），例（n）表示，采用x2檢驗，計量資料以“x±s”表示，采用t檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 FMN對AD小鼠學(xué)習(xí)能力、記憶能力的影響

與對照組比較，模型組小鼠潛伏期明顯延長（P<0.05），游泳距離明顯增加（P<0.05）；與模型組比較，多奈哌齊組，F(xiàn)MN高、中劑量組小鼠潛伏期明顯縮短（P<0.05），游泳距離明顯減少（P<0.05），而FMN低劑量組小鼠潛伏期、游泳距離改變不明顯（P>0.05）。

2.2 FMN對AD小鼠學(xué)習(xí)記憶保持能力的影響

小鼠學(xué)習(xí)記憶保持能力使用目標(biāo)停留時間和跨平臺次數(shù)表示，實驗結(jié)果表明，與對照組比較，模型組小鼠目標(biāo)停留時間明顯縮短和跨平臺次數(shù)明顯減少（P<0.05）；與模型組比較，多奈哌齊組，F(xiàn)MN高、中劑量組小鼠目標(biāo)停留時間明顯延長和跨平臺次數(shù)明顯增加（P<0.05），而FMN低劑量組小鼠目標(biāo)停留時間和跨平臺次數(shù)改變不明顯（P>0.05）。

2.3 FMN對AD小鼠學(xué)習(xí)記憶綜合能力的影響

模型組、FMN低劑量組小鼠游泳軌跡多為邊緣型，說明小鼠的學(xué)習(xí)記憶綜合能力較差，而對照組、多奈哌齊組、FMN高劑量組、FMN中劑量組小鼠游泳軌跡多為趨化型、直線型，說明小鼠的學(xué)習(xí)記憶綜合能力較好。

2.4 FMN對AD小鼠海馬APP的影響

結(jié)果表明，與對照組比較，模型組小鼠海馬APP明顯升高（P<0.05）；與模型組比較，多奈哌齊組，F(xiàn)MN高、中劑量組小鼠海馬APP明顯降低（P<0.05），而FMN低劑量組小鼠海馬APP改變不明顯（P>0.05）。

3 討 論

AD表現(xiàn)為學(xué)習(xí)能力、記憶能力的減退，其與β-淀粉樣蛋白明顯增多密切相關(guān)，而β-淀粉樣蛋白的前體成分就是APP，基于此，本實驗主要開展對小鼠學(xué)習(xí)記憶能力和APP水平的測定。

本實驗表明，模型組小鼠潛伏期及游泳距離增加，伴有目標(biāo)停留時間縮短和跨平臺次數(shù)減少，同時游泳軌跡多為邊緣型，經(jīng)過補陽還五湯主要成分FMN治療后，F(xiàn)MN高、中劑量可以促使AD小鼠較快尋找到Morris水迷宮系統(tǒng)水下平臺，尋找水下平臺難度降低。

綜上所述，F(xiàn)MN通過抑制APP改善AD小鼠模型學(xué)習(xí)記憶能力，以此在AD治療中發(fā)揮重要的作用。

參考文獻

[1] 費洪新，韓玉生，杜 徽，等.補陽還五湯對阿爾茨海默病小鼠海馬形態(tài)學(xué)和β淀粉樣蛋白水平的影響[J].中國實驗方劑學(xué)雜志，2014（20）：23.

本文編輯：李 豆