p53、Fas和TNF-α表達(dá)水平與宮頸癌的浸潤和轉(zhuǎn)移的相關(guān)性研究

陳翠蘭

宮頸癌是一種常見的婦科惡性腫瘤，多發(fā)于中老年女性，發(fā)病率較高，且近年來發(fā)病人群有年輕化的趨勢，嚴(yán)重威脅著人們的生命健康[1]。宮頸癌的致死率較高，且非常容易發(fā)生浸潤和轉(zhuǎn)移，雖然近些年婦科普查的廣泛開展、水平提高和宮頸細(xì)胞學(xué)篩查的普遍應(yīng)用使得其發(fā)病率和致死率明顯下降，但其仍然是目前威脅女性健康的主要疾病之一，而如何能在早期從分子生物學(xué)的角度尋找病變發(fā)生發(fā)展的分子標(biāo)記物對宮頸癌的診斷和治療具有重要的意義[2-3]。有研究表明[4]，腫瘤的發(fā)生發(fā)展與眾多癌基因、抑癌基因有關(guān)，其中腫瘤抑制基因(p53)、細(xì)胞凋亡信號受體蛋白(Fas)、腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor，TNF-α)等細(xì)胞凋亡因子在這一過程中發(fā)揮著重要的作用。為了進(jìn)一步探討p53、Fas和TNF-α表達(dá)水平與宮頸癌浸潤和轉(zhuǎn)移的相關(guān)性，本研究對宮頸癌患者和健康成年女性的p53、Fas和TNF-α表達(dá)水平進(jìn)行了分析比較，同時觀察了不同臨床病理特征患者以上指標(biāo)之間的差異，以期為臨床提供理論依據(jù)。

對象與方法

1.對象：選取2012年3月—2014年8月在本院接受治療的宮頸癌患者為研究對象。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)年齡≥18周歲；(2)經(jīng)病理診斷確診為宮頸癌者；(3)無其他系統(tǒng)嚴(yán)重疾病者。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)合并其他部位原發(fā)腫瘤者；(2)術(shù)前直腸功能和性功能障礙者；(3)不愿參與本項研究者。根據(jù)納入排除標(biāo)準(zhǔn)共納入宮頸癌患者80例，年齡37～68歲，平均(51.4±5.0)歲，鱗癌65例，非鱗癌15例，Ⅰ期35例，Ⅱ期32例，Ⅲ期13例；同期在本院進(jìn)行體檢的健康成年女性80例為對照組，年齡40～69歲，平均(51.5±6.4)歲。兩組年齡比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義，具有可比性。本項研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會評審?fù)ㄟ^，且所有患者均知情同意。

2.檢測方法：采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測研究對象血清中p53、Fas和TNF-α的表達(dá)水平，具體方法如下：所有入試者抽取空腹靜脈血約10 ml，加抗凝劑后以3 000 r/min離心10 min后取上層血清，以酶標(biāo)儀(德國拜發(fā)儀器公司，型號為880)檢測p53、Fas和TNF-α的表達(dá)水平，各檢測試劑盒均購自北京中金杉生物公司，具體檢測步驟嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。

3.評價指標(biāo)：觀察兩組p53、Fas和TNF-α表達(dá)水平，觀察不同臨床病理特征的宮頸癌患者p53、Fas和TNF-α表達(dá)水平的差異，分析影響宮頸癌患者浸潤和轉(zhuǎn)移的因素。

結(jié)果

1.兩組p53、Fas和TNF-α表達(dá)水平的比較

宮頸癌組血清p53、Fas和TNF-α表達(dá)水平均明顯低于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 兩組p53、Fas和TNF-α表達(dá)水平的比較±s)

注：與對照組比較，*P<0.05

2.不同臨床病理特征的宮頸癌患者p53、Fas和TNF-α表達(dá)水平的比較

臨床分期為Ⅲ期、組織學(xué)分級為中、低分化、有浸潤、發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和合并HPV感染的宮頸癌患者p53、Fas和TNF-α表達(dá)水平較低，而不同年齡的宮頸癌患者上述指標(biāo)水平無差異，見表2。

項目例數(shù)p53(ng/L)Fas(ng/L)TNF?α(ng/L)年齡 ≥30歲5234±1041±1642±13 <30歲2835±0940±1541±11臨床分期 Ⅰ、Ⅱ期6741±12?42±13?42±14? Ⅲ期1328±0731±0933±11組織學(xué)分級 高分化4538±11?41±12?43±12? 中、低分化3529±1031±1038±11浸潤 有3228±08?29±09?36±10? 無4839±1140±1044±11淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移 有3527±08?31±09?35±10? 無4539±1242±1345±12HPV感染 有3826±09?29±10?33±09? 無4241±1139±1145±11

注：因素內(nèi)比較，*P<0.05

3.影響宮頸癌患者p53、Fas和TNF-α表達(dá)水平的因素

臨床分期、有無浸潤、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和是否合并HPV感染是影響宮頸癌患者血清p53、Fas和TNF-α水平的因素，見表3。

表3宮頸癌患者p53、Fas和TNF-α表達(dá)水平的影響因素分析

變量OR值95%CIp53 臨床分期465145?1496 有無浸潤690243?1963 有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移415107?1227 是否合并HPV感染701143?2242Fas 臨床分期512100?1526 有無浸潤641205?2019 有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移492156?1524 是否合并HPV感染625253?1598TNF?α 臨床分期475135?1468 有無浸潤516142?1535 有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移425125?1352 是否合并HPV感染612212?1602

注：自變量賦值如下：臨床分期(0=Ⅰ、Ⅱ期，1=Ⅲ期)、組織學(xué)分級(0=高分化，1=中低分化)、浸潤(0=無，1=有)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(0=無，1=有)、合并HPV感染(0=無，1=有)，各變量均以取值為“0”組為參照組。

討論

宮頸癌也稱子宮頸癌，主要是指發(fā)生在子宮陰道部及宮頸管的惡性腫瘤，是女性常見的惡性腫瘤之一。宮頸癌的發(fā)病率較高，在發(fā)展中國家是僅次于乳腺癌居第2位的常見惡性腫瘤，宮頸癌每年新發(fā)病例大約有50萬例，80%的病例在發(fā)展中國家，而我國就達(dá)13.15萬，約占世界宮頸癌新發(fā)病例的28.8%。且致死率高，根據(jù)WHO數(shù)據(jù)顯示，每年有50萬新增宮頸癌病例，25萬人死于宮頸癌[6-7]，但其發(fā)病原因目前尚不清楚，多認(rèn)為與早婚、早育、多產(chǎn)及性生活紊亂等有關(guān)，而高危型HPV感染、沙眼衣原體、單純皰疹病毒Ⅱ型、滴蟲等病原體的感染與宮頸癌的發(fā)生和發(fā)展也有著密切的關(guān)系[8]。宮頸癌患者的臨床表現(xiàn)多為陰道流血、陰道排液，而晚期患者可出現(xiàn)尿頻、尿急、便秘、下肢腫痛、輸尿管梗阻、腎盂積水及尿毒癥等癥狀，甚至出現(xiàn)惡病質(zhì)等全身衰竭癥狀危及生命[9]。

早期宮頸癌患者常無明顯癥狀和體征，宮頸可光滑或難于宮頸柱狀上皮異位區(qū)別，臨床上常常發(fā)生漏診或誤診，而隨著病情的發(fā)展，癌細(xì)胞可直接蔓延或經(jīng)淋巴轉(zhuǎn)移至鄰近器官，進(jìn)而導(dǎo)致各種癥狀的發(fā)生[10]。因此，從分子生物學(xué)角度對宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展、浸潤和轉(zhuǎn)移機(jī)制進(jìn)行研究，將對宮頸癌的正確診斷和治療具有重要的意義。已有研究表明[11-12]，腫瘤的發(fā)生與細(xì)胞凋亡及其調(diào)控基因的異常有密切關(guān)系，p53、Fas、TNF-α等多種凋亡因子在腫瘤的發(fā)生和發(fā)展過程中發(fā)揮著重要的作用。Fas是一種膜蛋白，屬于腫瘤壞死因子/神經(jīng)生長因子受體家族，可通過與Fas配體或抗Fas抗體結(jié)合并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[13]；而TNF-α是由巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的一個多效性的細(xì)胞因子，在細(xì)胞的發(fā)熱、休克、組織損傷及腫瘤壞死等反應(yīng)過程中發(fā)揮著重要作用，并能導(dǎo)其他細(xì)胞因子、免疫調(diào)節(jié)因子參與細(xì)胞的增生、分化與凋亡過程[14]。p53基因作為一種腫瘤抑制基因，其可抑制細(xì)胞繁殖并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，進(jìn)而發(fā)揮抗癌的作用[15]。

為了探討p53、Fas和TNF-α表達(dá)水平與宮頸癌浸潤和轉(zhuǎn)移的相關(guān)性，本研究對本院接受治療的80例宮頸癌患者的臨床資料進(jìn)行了回顧性分析，并與健康成年女性的p53、Fas和TNF-α表達(dá)水平進(jìn)行了分析比較，同時還觀察了不同臨床病理特征的宮頸癌患者p53、Fas和TNF-α表達(dá)水平的差異，并分析了影響宮頸癌患者浸潤和轉(zhuǎn)移的因素。

研究結(jié)果表明，宮頸癌組患者血清p53、Fas和TNF-α表達(dá)水平均明顯低于對照組，提示p53、Fas和TNF-α與宮頸癌的發(fā)生和發(fā)展有著密切的聯(lián)系，三種因子的下調(diào)可明顯促進(jìn)細(xì)胞的增殖并抑制細(xì)胞的凋亡，進(jìn)一步促進(jìn)腫瘤的發(fā)生和發(fā)展。同時發(fā)現(xiàn)，臨床分期為Ⅲ期、組織學(xué)分級為中、低分化、有浸潤、發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和合并HPV感染的宮頸癌患者p53、Fas和TNF-α表達(dá)水平較低，提示p53、Fas和TNF-α表達(dá)水平與宮頸癌的嚴(yán)重程度密切相關(guān)，且與癌細(xì)胞的浸潤和轉(zhuǎn)移相關(guān)，而p53、Fas和TNF-α的下調(diào)可能參與了宮頸癌的浸潤和轉(zhuǎn)移過程。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，臨床分期、有無浸潤、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和是否合并HPV感染均影響宮頸癌患者血清p53、Fas和TNF-α水平的因素，進(jìn)一步證實了p53、Fas和TNF-α與宮頸癌的發(fā)生發(fā)展、浸潤和轉(zhuǎn)移有著密切的關(guān)系，而通過監(jiān)測三者的水平可成為宮頸癌判斷預(yù)后和治療用藥的重要指標(biāo)。但本研究限于研究樣本的不足，對于p53、Fas和TNF-α水平影響宮頸癌發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移的機(jī)制仍需作進(jìn)一步的深入研究。

綜上所述，p53、Fas和TNF-α在宮頸癌患者血清中水平較低，且與是否浸潤、轉(zhuǎn)移和合并HPV感染密切相關(guān)，而通過檢測三者水平可為宮頸癌的診斷和治療提供重要的指標(biāo)。

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