“中亞生血”

秦玲　楊日明　薛薔　曹丹　張曉舟　謝勇

摘要：右旋糖酐鐵是由氫氧化鐵與右旋糖酐絡(luò)合形成的絡(luò)合物，右旋糖酐鐵注射液為深褐色的膠體溶液，pH5.2～6.5，可用于防治仔豬缺鐵性貧血。但目前絕大部分市場在售的右旋糖酐鐵注射液都存在刺激性強(qiáng)，可導(dǎo)致仔豬注射部位充血、水腫、硬結(jié)、變性或壞死等；另外，絕大部分市場在售的右旋糖酐鐵注射液在仔豬體內(nèi)吸收差，往往在注射部位肌肉上出現(xiàn)深深的褐色沉積。國外研究證實(shí)，右旋糖酐鐵注射液由于右旋糖酐鐵的分子量和蛋白質(zhì)、重金屬等雜質(zhì)含量過高，導(dǎo)致仔豬過敏反應(yīng)和鐵吸收差。沈陽中亞獸藥業(yè)有限公司科研中心通過2年科研攻關(guān)及升級生產(chǎn)工藝，采用納米制藥工藝和納濾精制技術(shù)制成“中亞生血”右旋糖酐鐵注射液（10%和5%）。本研究通過臨床實(shí)踐證實(shí)，“中亞生血”右旋糖酐鐵注射液具有吸收好、對肌肉刺激性小、安全性強(qiáng)，及促進(jìn)仔豬生長、預(yù)防白痢和提高成活率等優(yōu)點(diǎn)。

關(guān)鍵詞：右旋糖酐鐵注射液；中亞生血；納米制藥；納濾技術(shù)

仔豬缺鐵性貧血1月齡以內(nèi)（特別是2～3周以內(nèi)的），初生仔豬每天需要15毫克鐵，但每天從母乳中最多可獲得1毫克鐵，如果不及時(shí)補(bǔ)鐵便可出現(xiàn)貧血癥。患貧血癥的哺乳仔豬血紅蛋白水平降低、精神萎靡、生長停滯、食欲減退、皮膚和粘膜蒼白、被毛粗亂、輕度腹瀉，且免疫力減弱易生病，嚴(yán)重者死亡。根據(jù)筆者臨床經(jīng)驗(yàn)，哺乳仔豬缺鐵性貧血的發(fā)病率約40%、死亡率約18%。

右旋糖酐鐵是由氫氧化鐵與右旋糖酐絡(luò)合形成的絡(luò)合物，右旋糖酐鐵注射液為深褐色的膠體溶液，pH5.2～6.5，可用于防治仔豬缺鐵性貧血。在臨床實(shí)踐中，通常選用右旋糖酐鐵注射液給予7日齡仔豬深部肌肉注射1～2毫升；缺鐵嚴(yán)重的仔豬，可在間隔7天后再肌肉注射1次。但讓養(yǎng)殖者困惑的是，絕大部分市場在售的右旋糖酐鐵注射液都存在刺激性強(qiáng)，可導(dǎo)致充血、水腫、硬結(jié)、變性或壞死等；另外，絕大部分市場在售的右旋糖酐鐵在仔豬體內(nèi)吸收差，往往在肌肉注射部位出現(xiàn)深深的褐色沉積。Critchley等國外學(xué)者通過研究發(fā)現(xiàn)，右旋糖酐鐵注射液由于右旋糖酐鐵分子量和蛋白質(zhì)、重金屬等雜質(zhì)含量過高是導(dǎo)致仔豬過敏反應(yīng)和鐵吸收差的主要因素。因此，改進(jìn)右旋糖酐鐵注射液生產(chǎn)工藝，降低蛋白質(zhì)、重金屬和高分子質(zhì)量右旋糖酐鐵的含量是降低仔豬過敏發(fā)生率和提高鐵吸收率的關(guān)鍵。針對上述問題，沈陽中亞獸藥業(yè)有限公司科研中心通過2年科研攻關(guān)及升級生產(chǎn)工藝和數(shù)十次的臨床試驗(yàn)，“中亞生血”（10%或5%右旋糖酐鐵注射液）成功上市。

1材料與方法

1.1“中亞生血”大白兔局部刺激實(shí)驗(yàn)

受試藥品：10%“中亞生血”右旋糖酐鐵注射液和市售普通的右旋糖酐鐵注射液（10%）。

試驗(yàn)設(shè)計(jì)：將18只年齡、體重相近的雄性健康大白兔隨機(jī)分為6個(gè)處理組，每組3只，將其中3個(gè)處理組的大白兔分別肌內(nèi)注射1倍劑量（1毫升）、2倍劑量（2毫升）和5倍劑量（5毫升）的“中亞生血”右旋糖酐鐵注射液（10%）；另外3個(gè)處理組分別肌內(nèi)注射1倍劑量（1毫升）、2倍劑量（2毫升）和5倍劑量（5毫升）的市售H品牌右旋糖酐鐵注射液（10%）。肌內(nèi)注射刺激試驗(yàn)在右側(cè)股四頭肌注入，并在左側(cè)股四頭肌注入等體積的滅菌生理鹽水作對照。注射后每間隔6小時(shí)觀察1次皮膚表面的反應(yīng)及變化。48小時(shí)后處死，剖開背部皮膚和股四頭肌，觀察注射部位的反應(yīng)情況，按表1的評分標(biāo)準(zhǔn)確定反應(yīng)級數(shù)，檢查注射部位是否產(chǎn)生充血、水腫、硬結(jié)、變性或壞死等局部刺激性反應(yīng)。

1.2“中亞生血”大白兔注射部位未吸收Fe含量測定

體重約2公斤健康大白兔12只，6只注射“中亞生血”右旋糖酐鐵注射液（10%），另6只注射市售H品牌右旋糖酐鐵注射液（10%）。剪去后腿內(nèi)側(cè)毛，消毒注射部位，自半腱肌遠(yuǎn)側(cè)末端插入針頭，穿過縫匠肌注入股內(nèi)肌中，每只家兔一側(cè)后腿注射供試品，另一側(cè)作為對照，劑量按每公斤體重注射含鐵10毫克的供試品。給藥7天后，處死大白兔，切開給藥側(cè)后腿皮膚，仔細(xì)檢查注射部位的褐色沉積程度。取出注射部位呈色的股內(nèi)??；對照側(cè)后腿，取出與給藥側(cè)后腿相應(yīng)部位與大小的股內(nèi)肌分別勻漿后，移至1000毫升燒杯中，加2摩爾/升氫氧化鈉溶液75毫升和水適量，使沒過肌肉，加蓋煮沸至無固體物存在，放冷，小心加硫酸50毫升，加熱至沸，分次滴加硝酸約10毫升，至無炭化物出現(xiàn)加熱除去過量硝酸，放冷，轉(zhuǎn)移至250毫升量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，分別作為供試品溶液與對照溶液標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精密量取鐵單元素標(biāo)準(zhǔn)貯備液（每1毫升中含鐵100毫克）0毫升、0.5毫升、2毫升、3毫升，分別置100毫升量瓶中，加20%構(gòu)櫞酸溶液10毫升、巰基乙酸溶液1毫升，搖勻，滴加濃氨溶液至紫紅色不再加深，用水稀釋至刻度。以0管為空白，照紫外可見分光光度法在530納米波長處測定吸光度，以含鐵量（毫克）與相應(yīng)的吸光度計(jì)算直線回歸方程測定法精密量取供試品溶液和對照溶液各5毫升，分別加硫酸3毫升，加熱至發(fā)煙，加硝酸適量繼續(xù)加熱至溶液呈無色，放冷，加水20毫升，煮沸3分鐘，放冷，加20%酸溶液10毫升、巰基乙酸溶液1毫升，滴加濃氨溶液至紫紅色不再加深，轉(zhuǎn)移至100毫升量瓶中，用水稀釋至刻度，分別作為供試品測定溶液與對照測定溶液，以標(biāo)準(zhǔn)曲線項(xiàng)下0管為空白，照紫外可見分光光度法在530納米的波長處分別測定注藥腿肌的吸光度An與對照腿肌的吸光度A對。由直線回歸方程查得鐵樣和鐵對的含量，求出平均值，按下式計(jì)算：注射部位未吸收鐵含量=（鐵樣鐵對）÷注射量（鐵）×50×100%。

1.3“中亞生血”對仔豬增重、發(fā)病率及死亡率的影響

本試驗(yàn)于沈陽市畜牧獸醫(yī)科學(xué)研究所科研種豬場進(jìn)行，選擇67頭3日齡三元育肥豬，并將每窩仔豬隨機(jī)區(qū)分試驗(yàn)組（偶數(shù)）與對照組（奇數(shù)）。供試仔豬統(tǒng)一編制耳號、分組記錄，對試驗(yàn)組仔豬（33只）逐頭注射“中亞生血”右旋糖酐鐵注射液（10%）1毫升/頭，對對照仔豬（34只）逐頭注射市售H品牌右旋糖酐鐵注射液（10%）1毫升/頭。在相同的飼養(yǎng)管理?xiàng)l件下，記錄各組發(fā)?。ò琢。?、死亡頭數(shù)、體重，廢棄記錄不全、中途死亡的個(gè)體數(shù)，并用血紅蛋白檢測儀測定21日齡仔豬血液血紅蛋白（Hb）含量。

2試驗(yàn)結(jié)果

2.1“中亞生血”無刺激作用

1倍劑量（1毫升）、2倍劑量（2毫升）和5倍劑量三組大白兔皮下注射和肌內(nèi)注射“中亞生血”后48小時(shí)內(nèi)健康狀況均良好且活動(dòng)正常，皮膚表面也未見異常反應(yīng)，刺激反應(yīng)級數(shù)和對照組（滅菌生理鹽水）相同均為0級（給藥部位無明顯反應(yīng)），注射部位藥液吸收良好，注射局部無充血、水腫、硬結(jié)、變性或壞死等現(xiàn)象。市售H品牌右旋糖酐鐵注射液呈2級刺激反應(yīng)（給藥部位中度充血，直徑在1.0厘米以下）。實(shí)驗(yàn)證明，“中亞生血”右旋糖酐鐵長效注射液在推薦劑量下肌內(nèi)注射具有良好的安全性。

2.2“中亞生血”鐵吸收效果佳

“中亞生血”大白兔注射部位未吸收Fe含量平均為8.42%，市售H品牌大白兔注射部位未吸收鐵含量平均為22.28%，兩組差異極顯著（p<0.0001），詳見表2。

2.3“中亞生血”預(yù)防仔豬貧血、促進(jìn)增重、減少發(fā)病率及死亡率

27日齡和54日齡時(shí)，“中亞生血”組仔豬體重比市售H品牌組分別多增加0.55公斤、2.08公斤，提高11.39%、19.53%，證實(shí)“中亞生血”右旋糖酐鐵注射液有顯著的促生長作用。27日齡和54日齡時(shí)，“中亞生血”組仔豬的Hb含量比市售H品牌組分別增加17.98克/升和19.46克/升，證實(shí)“中亞生血”右旋糖酐鐵注射液能有效預(yù)防仔豬貧血。27日齡和54日齡時(shí)，“中亞生血”組仔豬的白痢發(fā)生率比市售H品牌組分別減少26.12%、8.56%，證實(shí)“中亞生血”右旋糖酐鐵注射液能有效防治仔豬白痢。試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，“中亞生血”組仔豬死亡2頭，成活率為93.94%，而市售H品牌組仔豬死亡7頭，成活率為79.41%，證實(shí)“中亞生血”右旋糖酐鐵注射液能提高仔豬免疫力和成活率。

3討論

鐵是仔豬造血和防治營養(yǎng)性貧血的必需元素，參與血紅蛋白與肌蛋白合成，進(jìn)而加快體內(nèi)氧循環(huán)和提高增重速度。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，出生時(shí)仔豬體內(nèi)僅含約50毫克鐵，每天每頭仔豬至少需要7毫克才能避免貧血，但母豬乳汁中含鐵量很少（約2毫克/升），仔豬每天僅能從母乳中獲得1毫克鐵的補(bǔ)充。右旋糖酐鐵因毒副作用小、性質(zhì)穩(wěn)定、溶解性好、鐵含量高等優(yōu)點(diǎn)而被當(dāng)作首選的補(bǔ)鐵劑應(yīng)用于養(yǎng)豬生產(chǎn)中。從表3看出，“中亞生血”組仔豬體重比對照組提高19.53%，證實(shí)“中亞生血”右旋糖酐鐵注射液有顯著的促生長作用。7～10日齡仔豬體內(nèi)鐵含量開始下降，開始出現(xiàn)拉白痢、貧血、消瘦等營養(yǎng)性疾病，發(fā)育緩慢、停滯或死亡。表3結(jié)果證實(shí)，3日齡注射后至27日齡時(shí)，“中亞生血”組仔豬的白痢發(fā)生率比對照組減少26.12%，且仔豬毛皮光亮滑潤、活潑好動(dòng)。

高分子質(zhì)量右旋糖酐鐵超標(biāo)會(huì)增加仔豬發(fā)生過敏的概率，限制了右旋糖酐鐵在養(yǎng)豬業(yè)中的應(yīng)用。所以，提高生產(chǎn)工藝水平，減少右旋糖酐鐵中蛋白質(zhì)、重金屬和高分子質(zhì)量右旋糖酐含量，是降低臨床過敏發(fā)生率的關(guān)鍵。沈陽中亞獸藥業(yè)有限公司科研中心通過2年科研攻關(guān)及升級生產(chǎn)工藝，采用納米制藥工藝減少高分子質(zhì)量右旋糖酐含量，采用納濾技術(shù)精制注射液和去除其中的無機(jī)鹽、蛋白質(zhì)和重金屬等雜質(zhì)，除鹽和濃縮同時(shí)完成。通過表1和表2數(shù)據(jù)證實(shí)，“中亞生血”通過上述工藝升級，實(shí)現(xiàn)了鐵吸收效果好、對肌肉刺激性小、安全性強(qiáng)的臨床效果。