KiSS1蛋白和MMP-2在宮頸癌組織中的表達(dá)及診斷價值

李 穎,王 瑚

(錦州市中心醫(yī)院 婦產(chǎn)科,遼寧 錦州121000)

宮頸癌(ICC)是女性常見的生殖道惡性腫瘤，隨著人們生活方式的改變及人口的高齡化，發(fā)病率明顯上升，且日趨年輕化。早期ICC無明顯癥狀，術(shù)后易復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移，早期診斷能夠明顯提高治愈率[1]，降低死亡率。臨床亟待尋找敏感性高、特異性強(qiáng)的檢測方法，以早期診斷，提高治愈率，提高患者的生活質(zhì)量。本文檢測宮頸組織(NCE)、宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN)及ICC組織中的KiSS1和MMP-2的表達(dá)，以便指導(dǎo)臨床診療。

1 材料與方法

1.1標(biāo)本選取2016年3月-6月我院治療存檔的宮頸組織蠟塊78例，宮頸癌38例，平均年齡(45.61±4.27)歲，根據(jù)2003年FIGO標(biāo)準(zhǔn)，Ia期14例，Ib期12例，Ⅱ期12例；22例深層浸潤，16例淺層浸潤；淋巴轉(zhuǎn)移8例，無淋巴轉(zhuǎn)移30例；29例分化為中、低級，9例分化為高級。同期22例行切除術(shù)CIN患者，平均年齡(44.73±4.55)歲。同期行子宮肌瘤切除術(shù)的NCE患者18例，平均年齡(45.39±4.53)歲。

1.2免疫組化試劑[2]南京德泰生物科技公司生產(chǎn)的MMP-2多克隆抗體、KiSS1蛋白兔抗人單克隆抗體，武漢默沙克生物科技有限公司生產(chǎn)的SP試劑盒。

1.3方法采用免疫組化SP法,宮頸組織的存檔蠟塊78例，38例ICC、22例CIN，18例NCE。石蠟包埋，每隔100 μm切取4 μm切片2張，分別用抗KiSS1蛋白抗體及抗MMP-2抗體染色，一抗陰性對照為PBS液。

1.4結(jié)果判定[3]由兩名病理科醫(yī)師采用盲法觀察。(A)染色強(qiáng)度評分：強(qiáng)染色為3分，中等染色為2分，無色為0分，弱染色為1分；(B)染色陽性細(xì)胞比例評分：<5%為0分，5%-25%為1分，26%-50%為2分，>50%為3分；陽性表達(dá)為總分(A+B)≥3分，陰性表達(dá)<3分。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)分析應(yīng)用SPSS11.0軟件分析，分析KiSS1蛋白和MMP-2在宮頸癌組織中的診斷價值，均數(shù)比較采用t檢驗(yàn)，采用Fisher精確檢驗(yàn)，統(tǒng)計(jì)陽性率，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義時P<0.05。

2 結(jié)果

2.1KiSS1、MMP-2表達(dá)KiSS1在NCE、CIN、ICC的陽性表達(dá)率依次降低(86.36%vs77.78%vs44.74%)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。MMP-2在NCE、CIN、ICC的陽性表達(dá)率依次升高(16.67%vs31.82%vs63.16%)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

2.2KiSS1、MMP-2與ICC病理相關(guān)性KiSS1蛋白與MMP-2的陽性表達(dá)率與ICC浸潤深度、組織學(xué)分級、臨床分期密切相關(guān)(P<0.05)。見表2。

表1 KiSS1蛋白和MMP-2在NCE、CIN及ICC中的表達(dá)

表2 ICC中二者的表達(dá)與病理相關(guān)性

3 討論

KiSS1屬于單纖絲蛋白，與GPR54受體結(jié)合后降低基質(zhì)金屬蛋白酶活性，上調(diào)鈣離子水平，抑制腫瘤細(xì)胞的趨化、增殖、轉(zhuǎn)移[4]。KiSS1在正常組織中高表達(dá)，在癌細(xì)胞中往往表達(dá)過低或缺失，臨床較常用的檢測微轉(zhuǎn)移非侵入性的標(biāo)記物，對于早期診斷ICC具有重要臨床價值。本研究中KiSS1蛋白在ICC組織中的陽性率44.74%，明顯低于其余二種組織的陽性表達(dá)，提示可能是ICC發(fā)生初期，隨著疾病的惡化程度加大下降更加明顯。ICC進(jìn)展中的浸潤深度、組織學(xué)分級及臨床分期與其表達(dá)水平具有相關(guān)性，隨著病情程度加深表達(dá)下降[5]。表明KiSS1蛋白的低表達(dá)發(fā)生在癌變早期階段，其低水平表達(dá)促進(jìn)了ICC的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移，發(fā)揮類似癌基因樣作用，提示可將KiSS1蛋白的表達(dá)情況作為ICC的臨床分期指標(biāo)，并用于判斷預(yù)后[6]。

MMP-2是一種非糖化的明膠酶，癌細(xì)胞要穿越基底膜侵入周圍組織，MMP-2在機(jī)體內(nèi)降解細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)中Ⅳ型膠原，在腫瘤的侵潤、轉(zhuǎn)移中作用重大[7]。在ICC的發(fā)生發(fā)展過程中，促進(jìn)癌細(xì)胞大量增殖，導(dǎo)致腫瘤發(fā)生，最終患者死亡，MMP-2高表達(dá)能夠促進(jìn)腫瘤形成新生血管，降解ECM速度加快，癌細(xì)胞順利穿越基底膜向遠(yuǎn)處侵襲、轉(zhuǎn)移[8]。MMP-2在各種腫瘤中的異常表達(dá)及其分子機(jī)制逐漸被闡釋，腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移需要蛋白酶類降解ECM，破壞基底膜的完整性，提供侵襲“通道”[9]。MMP-2表達(dá)率可以區(qū)分正常細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞，評估癌細(xì)胞增殖、侵襲程度，已作為一種特異的腫瘤標(biāo)志物應(yīng)用于臨床，可以作為判定癌浸潤及轉(zhuǎn)移的重要指標(biāo)。臨床治療采取對MMP-2的降解功能進(jìn)行阻斷，使其減少對ECM的降解，抑制腫瘤穿越基底膜進(jìn)行轉(zhuǎn)移[10]。

本研究中發(fā)現(xiàn)ICC組織中MMP-2的陽性率明顯高其它組織，隨著臨床分期、腫瘤分級、浸潤深度的加深而增加，這表明MMP-2參與了惡性腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移[11]，MMP-2的高表達(dá)促進(jìn)了惡性腫瘤的發(fā)生進(jìn)展，其還預(yù)示著患者預(yù)后不良[12]，檢測MMP-2的表達(dá)水平可做為高風(fēng)險腫瘤的標(biāo)志物，有效評估患者的預(yù)后[13]。

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