ICP-MS測定魚腥草中14種重金屬元素

李雅萌，王亞茹，楊娜，周柏松，劉金平，李平亞

（吉林大學(xué)藥學(xué)院，長春 130021）

魚腥草（Houttuynia cordata Thunb.）為三白草科蕺菜屬植物，又名蕺菜、臭菜、側(cè)耳根。新鮮植株破碎后有刺鼻的腥臭味，《本草綱目》載：“其葉腥氣，故俗稱魚腥草?！濒~腥草味辛，性微寒，全草入藥，具有清熱解毒、消癰排膿、利尿通淋等功能[1]，被譽為“中藥中的廣譜抗生素”。魚腥草主產(chǎn)于我國浙江省、江蘇省、安徽省、福建省、河南省等地區(qū)[2]。魚腥草為藥、食兩用植物，我國西南地區(qū)人民常作蔬菜或調(diào)味品。魚腥草中含有維生素、糖、脂肪和蛋白質(zhì)等豐富的營養(yǎng)成分，是一類營養(yǎng)價值較高的食品，已被國家衛(wèi)生部正式確定為“既是藥品，又是食品”的極具開發(fā)潛力的植物資源之一[3]?，F(xiàn)代研究表明，魚腥草含有多種化學(xué)成分[4，5]，主要含有揮發(fā)油[6]、黃酮類、有機酸、生物堿[7]、維生素等[8]有機物質(zhì)及一些有益的無機物質(zhì)，其主要活性成分為揮發(fā)油[9]和黃酮類化合物[10]。此外，植物類藥材中還含有來自于防治病蟲害的農(nóng)藥殘留、受污染生產(chǎn)環(huán)境（土壤和水）中的重金屬以及來自于受污染和（或）植物本身所產(chǎn)生的生物毒素等有毒有害物質(zhì)。藥材中的重金屬及有害元素主要有鉛（Pb）、汞（Hg）、鎘（Cd）、銅（Cu）、銀（Ag）、鉍（Bi）、鈦（Ti）、錫（Sn）、砷（As）等[11]。重金屬在人體內(nèi)代謝緩慢，容易積累，對人體產(chǎn)生危害[12]，因此，考察魚腥草中重金屬含量，可以為魚腥草的應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)，以確保用藥安全。

1 材料

1.1 試驗材料

魚腥草藥材產(chǎn)自貴州省遵義市，由吉林金寶藥業(yè)股份有限公司提供，經(jīng)吉林大學(xué)藥學(xué)院李平亞教授鑒定為魚腥草的干燥全草。

1.2 儀器與試劑

7500a型電感耦合等離子體質(zhì)譜儀（美國Agilent公司）；AL104型電子天平（瑞士Mettler2Toledo公司）；Milli-Q超純水機（美國Millipore公司）；720電熱板（浙江省諸暨縣馬劍電熱儀器廠）；標準檢驗篩200目篩（浙江上虞市張興紗篩廠）。

14種擬測定重金屬元素的標準溶液（分別為10mg/L），銦（In）、銠（Rh）單元素內(nèi)標溶液（分別為50mg/L），鋰（Li）、釔（Y）、鈷（Co）、鉍（Bi）質(zhì)譜調(diào)諧液（分別為 10mg/L）（美國安捷倫公司）；超純水為18.2M/cm，硝酸為優(yōu)級純，氫氟酸為色譜純。試驗用器皿均用10%硝酸浸泡過夜，用超純水沖洗后備用。本實驗所用各種酸均經(jīng)亞沸騰2次蒸餾后使用。

2 方法

2.1 儀器工作參數(shù)

用Li、Y、Co、Bi調(diào)諧液對儀器進行最佳工作條件的選擇，使儀器的各項參數(shù)均達到測量指標，條件參數(shù)見表1。

表1 儀器工作條件參數(shù)Tab.1 Working condition parameter of instrument

2.2 供試品溶液的制備

精密稱取魚腥草細粉（過200目篩）0.2g，于5mL聚四氟乙烯溶樣彈中，加入1.0mL硝酸及0.5mL雙氧水，在120℃的電熱板上對樣品進行預(yù)處理，待液體蒸至濕鹽狀，加入1.4mL氫氟酸、1.6mL硝酸，將溶樣彈加蓋及鋼套密閉，放入恒溫干燥箱，190℃保持48h。在箱內(nèi)自然冷卻至室溫后，在120℃的電熱板上，蒸至溶液剩余至濕鹽狀，冷卻，加50%硝酸3.0mL，將溶樣彈加蓋及鋼套密閉，放入恒溫干燥箱，150℃保持12h。冷卻后，用高純水將消解液移至聚氯乙烯樣品瓶，定容至50mL，搖勻備用，隨行試劑空白。

2.3 標準溶液的制備

精密吸取14種元素標準溶液，分別用3%HNO3溶液逐級稀釋成各系列濃度的標準溶液。

2.4 內(nèi)標溶液的制備

精密吸取In、Rh標準溶液，用3%HNO3溶液稀釋制成1g/L的內(nèi)標溶液。

3 結(jié)果與討論

3.1 線性關(guān)系與檢出限

在“2.1”項下儀器工作條件下，取“2.3”項下各元素標準溶液，以各元素濃度（g/L）為橫坐標（X）、各元素與內(nèi)標溶液響應(yīng)值的比值為縱坐標（Y）繪制標準曲線，結(jié)果見表2。精密吸取3%HNO3空白溶液，在相同條件下連續(xù)測定10次，以測定結(jié)果的3倍標準偏差（3）所對應(yīng)的濃度值為各個元素的儀器檢出限，結(jié)果見表2。

表2 線性關(guān)系及檢出限Tab.2 Linear relationship and Detection limit (g/L)

3.2 精密度試驗

同一標準品溶液平行測定6次，所測各元素RSD為0.87%～1.60%，表明儀器精密度良好。

3.3 重復(fù)性試驗

取魚腥草粉末6份，按“2.2”項下方法平行制備，“2.1”項下儀器條件進行測定，6次重復(fù)進樣測定，各元素RSD為1.20%～3.15%，表明重復(fù)性良好。

3.4 加樣回收試驗

精密稱取已知含量的魚腥草粉末0.2g，共3份，按“2.2”項下方法制備高、中、低3個濃度的供試品溶液，分別加入適量的混合標準溶液，測定各元素的加樣回收率，加樣回收率為97.6%～103.8%。結(jié)果見表3。

表3 加樣回收率Tab.3 Recovery of sample

3.5 樣品測定結(jié)果

將“2.2”項下制備的各供試品溶液按“2.1”項下儀器條件進行測定，結(jié)果見表4。

表4 魚腥草中重金屬元素含量測定結(jié)果Tab.4 Determination of Heavy Metal Elements in H.cordata Thunb.

4 結(jié)論

藥理作用研究顯示，魚腥草具有抗菌[13]、抗病毒[14]、抑制神經(jīng)性疼痛[15]、抗高血糖[16]、抗炎[17]、抗腫瘤[18]等多種生物學(xué)活性，具有極高的食用及藥用價值。當(dāng)魚腥草中的重金屬元素超過一定濃度時，則會對人體產(chǎn)生危害。我國《藥用植物及制劑進出口綠色行業(yè)標準》[19]中限 定 重 金 屬 含 量 Pb≤5.0g/g、Cd≤0.3g/g、Hg≤0.2g/g、As≤2.0g/g、Cu≤20.0g/g。本實驗通過電熱板濕法消解法對樣品進行前處理，建立的ICPMS法具有良好的精密度、重復(fù)性和準確性，測得元素回歸方程相關(guān)系數(shù)r＞0.99，檢測限為0.002g/L～5.120g/L，精密度RSD＜3.15%，加標回收率為97.6%～103.8%。并測定了魚腥草中 Mn、Zn、Cu、Co、Ti、Sn、Sb、Ba、Cr、Ni、As、Pb、Hg、Cd 14 種重金屬元素的含量，Pb、Cd、Hg、As、Cu 5種有害金屬含量均低于限量值。

[1]王桃林，蘇東，朱流財.魚腥草化學(xué)成分及藥理作用研究進展[J].世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘，2013，(8):278.

[2]吳衛(wèi).魚腥草的研究進展[J].中草藥，2001，32(4):367-368.

[3]周歡歡，劉同祥，耿少華，等.魚腥草的研究進展[J].醫(yī)學(xué)信息旬刊，2011，32(8):4125.

[4]王利勤，趙友興，周露，等.魚腥草的化學(xué)成分研究[J].中草藥，2007，38(12):1788-1790.

[5]杜向群，陳敏燕，許穎.魚腥草成分、藥理的研究進展[J].江西中醫(yī)藥，2012，43(2):66-68.

[6]Yang Z N，Luo S Q，Ma J，et al.GC-MS analyses of the volatiles of Houttuynia cordata Thunb[J].Pakistan Journal of Pharmaceutical Sciences，2016，29(5)：1591-1600.

[7]陳少丹，高昊，盧傳堅，等.魚腥草中生物堿和酰胺類成分的研究[J].沈陽藥科大學(xué)學(xué)報，2013，(11):846-850.

[8]胡汝曉，肖冰梅，譚周進，等.魚腥草的化學(xué)成分及其藥理作用[J].中國藥業(yè)，2008，17(8):23-25.

[9]吳艷霞.魚腥草揮發(fā)油化學(xué)成分分析[J].黑龍江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014，(4):105-106.

[10]彭麗華.魚腥草指紋圖譜研究及其中黃酮類成分分離制備[D].長沙:中南大學(xué)，2012.

[11]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典:第四部[K].北京:中國醫(yī)藥科技出版社，2015.

[12]Zhu M，Jiang Y，Cui B，et al.Determination of the Heavy Metal Levels in and the Implications for Human Health Risk Assessment[J].Human&Ecological Risk Assessment An International Journal，2015，21(5):1218-1229.

[13]Liu L，Li C，Xia W，et al.Inhibition effects of Houttuynia cordata Thunb.on Microcystis aeruginosa[J].Journal of Hygiene Research，2014，43(3):483.

[14]Li T，Liu L，Wu H，et al.Anti-herpes simplex virus type 1 activity of Houttuynoid A，a new flavonoid from Houttuynia cordata Thunb[J].Antiviral Research，2017，144:273.

[15]Wan C F，Zheng L L，Liu Y，et al.Houttuynia cordata Thunb reverses oxaliplatin-induced neuropathic pain in rat by regulating Th17/Treg balance[J].American Journal of Translational Research，2016，8(3):1609.

[16]Kumar M，Prasad S K，Krishnamurthy S，et al.Antihyperglycemic Activity of Houttuynia cordata Thunb.in Streptozotocin-Induced Diabetic Rats[J].Advances in Pharmacological Sciences，2014，(8):1-12.

[17]Jun L I，Zhao F.Anti-inflammatory functions of Houttuynia cordata Thunb.and its compounds:A perspective on its potential role in rheumatoid arthritis[J].Experimental&Therapeutic Medicine，2015，10(1):2579-2591.

[18]Kim J M，Hwang I H，Jang I S，et al.Houttuynia cordata Thunb Promotes Activation of HIF-1A-FOXO3 and MEF2A Pathways to Induce Apoptosis in Human HepG2 Hepatocellular Carcinoma Cells[J].Integrative Cancer Therapies，2016，16(3):360-372.

[19]WM2-2001，藥用植物及制劑進出口綠色行業(yè)標準[S].