茶多酚納米載體制備技術(shù)及其藥理活性研究進(jìn)展

林清霞，楊軍國(guó)，宋振碩，王麗麗，陳 林

(福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院茶葉研究所，福建 福安 355015)

茶多酚系茶葉中最主要的生物學(xué)活性成分，其主要組分為兒茶素類，研究表明其具有抗氧化、抗腫瘤、抗炎抗菌、降血糖、防輻射等多種保健功效，是一類具有廣泛應(yīng)用價(jià)值的功能因子[1-3]。然而，因其易被氧化、堿性條件不穩(wěn)定、生物系統(tǒng)內(nèi)代謝率高等問(wèn)題，導(dǎo)致茶多酚生物利用度低，限制了茶多酚由實(shí)驗(yàn)室向?qū)嶋H應(yīng)用領(lǐng)域的拓展[4-7]。國(guó)內(nèi)外學(xué)者探索研究多種方法提高茶多酚的藥理活性表達(dá)，諸如基團(tuán)修飾[8]、膠囊化[9]、納米顆粒[10]、與其它成分協(xié)同使用[11-12]等，尤以納米包埋技術(shù)發(fā)展前景最為廣闊[13]。納米包埋茶多酚技術(shù)已開(kāi)展了廣泛的研究，多類降解材料可被用于制備茶多酚的納米載體，在改善茶多酚穩(wěn)定性及提高生物學(xué)活性表達(dá)方面展現(xiàn)了顯著的作用效果。本文結(jié)合近年來(lái)納米包埋茶多酚研究的相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道，主要對(duì)茶多酚納米包埋技術(shù)及其生物學(xué)活性表達(dá)的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1 茶多酚的納米載體研究

納米技術(shù)就是將藥物包埋于納米粒子內(nèi)部或吸附于納米粒子表面，使藥物或食品功能因子免受胃腸環(huán)境的影響，從而達(dá)到延緩釋放、減少藥物用量和提高生物活性的目的[14]。目前，國(guó)內(nèi)外學(xué)者針對(duì)茶多酚包埋載體材料已開(kāi)展了廣泛的研究，改善茶多酚穩(wěn)定性效果顯著。

1.1 脂質(zhì)體

脂質(zhì)體作為一種新型的運(yùn)載體系，因其具有生物可降解性、生物相容性、靶向性、無(wú)毒性等特性，被廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥、化妝品等領(lǐng)域[15-16]。脂質(zhì)體是由磷脂和膽固醇組成的一種類似生物膜的自組裝膠束微粒，其獨(dú)特的雙親性結(jié)構(gòu)可以同時(shí)包埋親水性和親油性藥物。采用脂質(zhì)體制備藥物載體，可以提高易氧化藥物在體內(nèi)外的穩(wěn)定性，降低被包埋藥物的毒性、促進(jìn)腸道對(duì)被包埋物質(zhì)的吸收，提高其生物利用率[17]。

脂質(zhì)體作為包埋茶多酚的載體材料確實(shí)具有許多優(yōu)點(diǎn)和特點(diǎn)，但就目前情況來(lái)看，仍舊存在一些限制性因素，例如(1)貯存穩(wěn)定性欠佳，易發(fā)生聚集、融合、乳化等，包裹率低、在體外被包埋物易于從脂質(zhì)體中滲漏[20]；(2)磷脂雙鍵被氧化、酯鍵水解，使脂質(zhì)體的結(jié)構(gòu)發(fā)生不可逆變化，并且水解產(chǎn)物對(duì)人體存在一定的毒性[21]；(3)脂質(zhì)體在體內(nèi)吸收過(guò)程中，易被巨噬細(xì)胞吞噬，降低其包封藥物的藥效等[22]。針對(duì)傳統(tǒng)脂質(zhì)體存在的問(wèn)題，國(guó)內(nèi)外學(xué)者通過(guò)化學(xué)合成或生物合成的方法，對(duì)脂質(zhì)體進(jìn)行修飾，其常見(jiàn)的修飾劑有殼聚糖、海藻酸鹽、聚乙二醇、二氧化硅等[23]。

郝曉幀[24]選取不同的表面活性劑對(duì)茶多酚(TP)脂質(zhì)體進(jìn)行修飾，發(fā)現(xiàn)表面活性劑的種類及用量對(duì)TP脂質(zhì)體的粒徑及穩(wěn)定性有顯著影響，采用表面活性劑司盤80能夠提高TP脂質(zhì)體的透皮性能。劉珍[25]利用乙醇注入結(jié)合動(dòng)態(tài)高壓微射流方法制備了茶多酚納米脂質(zhì)體(TPN)，在此基礎(chǔ)上對(duì)脂質(zhì)體進(jìn)行修飾，制備了殼聚糖-脂質(zhì)體(CH-TP)和二氧化硅-殼聚糖-脂質(zhì)體(S-CH-TPN)，試驗(yàn)顯示，修飾劑的存在影響了脂質(zhì)體膜結(jié)構(gòu)的剛性和抗應(yīng)變能力，修飾后的脂質(zhì)體穩(wěn)定性、緩釋效果以及DPPH自由基清除能力均顯著提高，例如，二氧化硅的引入讓體系的分布更為細(xì)膩和均勻，分散系數(shù)表現(xiàn)為最小值0.22±0.01，而未修飾的TPN分散系數(shù)為0.29±0.01。TPN在85，100，125 μg·mL-1的DPPH自由基清除能力分別為53.28%±1.8%，60.38%±2.1%和64.29%±1.0%，CH-TPN的DPPH自由基清除能力分別為65.46%±3.9%，71.03%±3.3%和72.19%±3.7%，高于TPN所示值，而S-CH-TPN則表現(xiàn)出80.14%±1.9%，81.38%±2.1%，88.89%±1.1%的DPPH自由基清除能力，明顯高于TPN和CH-TPN自由基清除值。體外消化試驗(yàn)和單獨(dú)的腸液消化試驗(yàn)表明，CH-TPN和S-CH-TPN在胃液環(huán)境下始終保持高穩(wěn)定性，對(duì)茶多酚表現(xiàn)出良好的體外消化保護(hù)效果。Radhakrishnan等[26]采用乳化劑揮發(fā)法將EGCG包封在脂質(zhì)體納米粒中，制備出EGCG-SLN。EGCG-SLN在血清中表現(xiàn)出高穩(wěn)定性和高耐電解質(zhì)誘導(dǎo)性。以磷脂、乙醇、水制備的納米懸浮液是一類新型的脂質(zhì)載體，由于乙醇與脂質(zhì)雙層的交叉作用以及乙醇的加入增加了角質(zhì)層中脂質(zhì)的流動(dòng)性，則該類納米懸浮液載體可顯著提高藥物的透皮性，然而納米懸浮液的穩(wěn)定性問(wèn)題一直是目前研究的關(guān)鍵。Zhang等[27]認(rèn)為蔗糖酯(SE)可以改善納米懸浮液的穩(wěn)定性，并探究了不同酯化程度的SE對(duì)EGCG納米懸浮液穩(wěn)定性影響情況，發(fā)現(xiàn)酯化的SE可提高納米懸浮液的ZeTa電位，從而改善其物理穩(wěn)定性，酯化程度越高，ZeTa電位越大。以高度酯化的棕櫚蔗糖酯(PSE)作為穩(wěn)定劑制備的EGCG納米粒懸浮液表現(xiàn)出高穩(wěn)定性，并且其抗UVB引起的皮膚損傷比天然的EGCG效果更優(yōu)。

1.2 殼聚糖

殼聚糖具有良好的生物相容性、微生物降解性、安全無(wú)毒等優(yōu)良性能[28-29]，其分子表面豐富的功能基團(tuán)可與粘液中的糖蛋白形成氫鍵，吸附到黏膜表面，延長(zhǎng)被包封藥物或活性物質(zhì)在人體腸道中的保留時(shí)間，持續(xù)釋放，提高被包封物質(zhì)的生物利用度[30-31]。殼聚糖納米粒子諸多優(yōu)良特性使之成為理想的口服遞送載體[32-33]，殼聚糖納米粒子包封茶多酚常用自主裝和離子凝膠化兩類方法[34]。張茵等[35]通過(guò)自主裝法制備茶多酚-明膠-殼聚糖(TP-Gel-Cs)納米粒，在最優(yōu)條件下制備的納米粒平均粒徑971.5 nm，分散指數(shù)0.22，載藥量為26.82%，包封率為90.42%。該納米粒能夠保護(hù)茶多酚，提高其在空氣中的穩(wěn)定性。模擬口腔環(huán)境，發(fā)現(xiàn)TP-Gel-Cs納米粒能夠緩慢釋放，并且具有一定的生物黏附性。Zou[36]等采用層層自主裝法將EGCG包埋在涂覆有葡聚糖硫酸鹽的殼聚糖納米粒(100～200 nm)中，包封率高達(dá)90%～95%，24 h內(nèi)累積釋放量達(dá)70%，可大大減緩EGCG在胃腸道中的降解速度。Liang等[37]以葉酸改性羧甲基殼聚糖和殼聚糖鹽酸鹽為壁材，通過(guò)離子凝膠化方法制備納米茶多酚，所制備的納米茶多酚顯示了較強(qiáng)的緩釋性能，在pH為7.4的PBS緩沖溶液中納米粒的體外釋放時(shí)間可長(zhǎng)達(dá)48 h。Liang等[38]以玉米醇溶蛋白涂覆殼聚糖納米粒子負(fù)載EGCG成功制備了zein/CS-NPs納米粒，玉米醇溶蛋白的使用，顯著降低了殼聚糖納米粒的粒徑，提高ZeTa電位，大大提高納米粒的控釋性能和EGCG的抗氧化活性。

1.3 蛋白質(zhì)

蛋白質(zhì)具有生物相容性、可降解性、低毒、價(jià)格低廉等優(yōu)點(diǎn)，被廣泛應(yīng)用于納米膠囊領(lǐng)域[39]。乳球蛋白、酪蛋白、明膠、大豆蛋白等都是常用的蛋白質(zhì)載體材料，其中以β-乳球蛋白應(yīng)用最為廣泛[40]。β-乳球蛋白是反芻動(dòng)物乳清蛋白的主要成分，其水解產(chǎn)生的蛋白肽具有殺菌、降低膽固醇、抑制血管緊張素轉(zhuǎn)換酶活性等[41]。β-乳球蛋白是一類高度結(jié)構(gòu)化的蛋白質(zhì)，具有較強(qiáng)的配體結(jié)合能力，能與茶多酚以多種方式結(jié)合[42]。黃美蓉等[43]采用熱誘導(dǎo)法制備的EGCG-Vc-β-乳球蛋白納米，能更好的保護(hù)EGCG的活性。杜文凱[41]以β-乳球蛋白為納米載體包埋EGCG，當(dāng)溶液pH為6.4～7.0，熱激溫度為70～85℃，所制備的納米粒粒徑小(<10 nm)、體系穩(wěn)定(Zeta電位<-30 mV)、包埋率高(>5%)，所制備納米粒能更好控制EGCG的釋放。祖元?jiǎng)偟萚44]采用去溶劑法制備葉酸介導(dǎo)的EGCG白蛋白納米粒(FA-EGCG-BSANP)，平均粒徑為200 nm，EGCG的包封率可達(dá)(81.5±1.8)%，載藥量為(29.3±0.6)%，制備的納米粒能顯著提高EGCG對(duì)前列腺癌細(xì)胞(PC-3)的靶向效果。近年來(lái)，學(xué)者們通過(guò)化學(xué)修飾手段提高β-乳球蛋白(β-LG)與多酚的親和度，從而提高茶多酚的活性。例如，Wu等[45]將β-LG進(jìn)行熱修飾后共組裝制備β-LG-EGCG(Eβ-NPs)納米粒，熱改性的β-LG與EGCG的酚羥基通過(guò)氫鍵結(jié)合，使EGCG與熱修飾的β-LG的親和力大于未修飾的β-LG。以熱改性的β-LG包裹的EGCG顯著提高對(duì)癌細(xì)胞的抑制作用，Eβ-NPs對(duì)試驗(yàn)中的11種癌細(xì)胞系的生長(zhǎng)抑制作用均顯著高于單純的EGCG，并且對(duì)正常細(xì)胞無(wú)毒副作用。Yang等[46]以3-巰基-1-己醇(3MH)作為穩(wěn)定劑，將熱修飾的β-LG與EGCG通過(guò)共組裝方法制備MEβ-NPs納米粒。受3MH的保護(hù)，MEβ-NPs納米粒中EGCG的抗氧化活性比β-NPs和單純的EGCG活性都更高，穩(wěn)定性更好。Fan等[47]通過(guò)自由基誘導(dǎo)接枝方法將β-乳球蛋白(β-BLG)與氯原酸(CA)共軛耦聯(lián)制備β-LG-CA-EGCG綴合物，研究發(fā)現(xiàn)，CA能保護(hù)β-LG免受消化酶影響，且熱處理后的β-LG與CA共軛耦聯(lián)，使蛋白質(zhì)暴露出更多的疏水基團(tuán)，EGCG中更多的基團(tuán)與β-LG相結(jié)合，從而EGCG在β-LG-CA納米顆粒中的化學(xué)穩(wěn)定性顯著高于β-LG。β-LG-CA納米粒中釋放的EGCG比β-LG更緩慢，β-LG-CA共軛耦聯(lián)后DPPH清除力顯著提高，且隨著CA濃度增加，DPPH自由基清除能力提高。

1.4 其他

金屬納米粒子是指在形態(tài)上被縮小至納米程度(5～100 nm)的金屬顆粒，這種新型納米材料表面可以引入很多特殊功能的基團(tuán)，進(jìn)行功能化修飾。金納米藥物載體除了可以提高被包封藥物的生物活性，其材料本身還具有清除自由基的能力[48]，10 nm以下的金納米可以在血管中自由流動(dòng)，將之注入到血液中輸送到人體各個(gè)部位，可作為監(jiān)測(cè)和診斷疾病的手段[49]。Mukherje等[50]采用綠色納米技術(shù)一步合成綠茶多酚-金納米粒(直徑<50 nm)，其納米粒表現(xiàn)出卓越的穩(wěn)定性。Yuan等[51]使用巖藻糖-羧甲基殼聚糖(FU-CMC)與金納米粒接枝制備FU-CMC-EGCG-GNPs納米粒，顯著提高EGCG的生物利用度。變性淀粉在提高藥物穩(wěn)定性方面表現(xiàn)出良好的應(yīng)用前景，其來(lái)源廣泛，能夠穩(wěn)定供給并且價(jià)格便宜、無(wú)毒無(wú)味，常被作為口服制劑的壁材[52]。多孔二氧化硅是一類很有前途的新型載體材料，具有巨大的比表面積和體積，負(fù)載量大，易于表面功能化，還具有尺寸和孔徑可調(diào)的優(yōu)點(diǎn)，可控制藥物釋放速度等[53-55]。許多文獻(xiàn)報(bào)道[56-58]以多孔二氧化硅成功包埋布洛芬、紫杉醇、姜黃素等藥物并表現(xiàn)出卓越的療效潛力，然而目前還未發(fā)現(xiàn)以上述材料包封茶多酚的報(bào)道，未來(lái)可致力于多孔二氧化硅包埋茶多酚的相關(guān)研究。

2 茶多酚納米顆粒的藥理活性研究

茶多酚不穩(wěn)定，易受溫度、光、氧、pH等因素影響，發(fā)生氧化、聚合和縮合等反應(yīng)，改變了其原有的結(jié)構(gòu)和活性，從而失去其功效[59]。有研究表明，茶多酚口服后利用度不超過(guò)5%[60]，且易在胃腸環(huán)境中發(fā)生降解和聚合、易發(fā)生甲基化、硫酸化、葡萄糖醛酸化等生物轉(zhuǎn)化、易受體內(nèi)酶和其他營(yíng)養(yǎng)成分的影響，從而無(wú)法充分發(fā)揮其功效[61]。茶多酚中生物活性最高的EGCG在血液環(huán)境(pH=7.4)也很不穩(wěn)定，到達(dá)作用靶點(diǎn)前已發(fā)生降解。因此，茶多酚的納米包埋技術(shù)，成為其生物學(xué)活性高表達(dá)的一條有效途徑。

2.1 抗氧化

劉珍[25]制備的殼聚糖-脂質(zhì)體-茶多酚(CH-TP)納米粒和二氧化硅-殼聚糖-脂質(zhì)體-茶多酚(S-CH-TPN)納米粒的DPPH自由基清除能力較單純茶多酚均顯著增強(qiáng)。杜文凱[41]以β-乳球蛋白作為納米載體包埋茶多酚，能較好保護(hù)茶多酚的抗氧化活性，延緩其抗氧化活性的降低。Bao等[62]制備了茶多酚-殼聚糖納米粒的抗氧化明膠膜，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在貯藏期間，實(shí)現(xiàn)了明膠膜中茶多酚的釋放，顯著提高了明膠膜的自由基清除活性，延長(zhǎng)了抗氧化時(shí)間。Xiang等[63]通過(guò)一種“綠色”化學(xué)合成途徑制備一系列不同粒徑的茶多酚納米粒，這些納米粒由于壁材的保護(hù)，DPPH清除率均顯著提高。李乙文等[64]發(fā)明一種抗氧化聚茶多酚納米材料，所制備的納米粒(100～300 nm)是以茶多酚和茶堿為原料，不添加其他外源添加劑，且該納米材料在清除自由基方面表現(xiàn)優(yōu)異，有望作為綠色抗氧藥物和安全無(wú)毒的食品添加劑。Kulandaivelu[65]等以明膠包封茶多酚制備了茶多酚納米粒，可以延長(zhǎng)茶多酚的作用時(shí)間，改善茶多酚的生物利用度。綜合來(lái)看，茶多酚納米顆粒提高抗氧化活性表達(dá)可歸結(jié)為兩方面：其一是納米顆粒形成粗糙的疏水核或特殊網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，限制了茶多酚的遷移，實(shí)現(xiàn)了茶多酚的緩慢釋放，延長(zhǎng)了抗氧化時(shí)間，從而提高抗氧化活性；其二是形成聚合物壁，將茶多酚包裹在內(nèi)部，降低茶多酚的氧化降解速率，從而達(dá)到保護(hù)茶多酚的效果。

2.2 抗腫瘤

茶多酚在體外模型、動(dòng)物模型的多個(gè)癌癥位點(diǎn)研究中均被證實(shí)具有抗癌活性。它通過(guò)改變癌細(xì)胞的氧化還原狀態(tài)，抑制癌細(xì)胞生長(zhǎng)，引發(fā)癌細(xì)胞凋亡，同時(shí)憑借其抗氧化性使正常細(xì)胞免受損傷。然而由于茶多酚在胃腸環(huán)境中極不穩(wěn)定，生物利用度低，低劑量的藥物濃度無(wú)法達(dá)到抗癌效果。目前體內(nèi)外的抗癌研究所用的茶多酚濃度高達(dá)10～200 μM，而這個(gè)濃度遠(yuǎn)高于藥物水平[13]。另一方面，小腸上皮細(xì)胞缺少特殊的受體將茶多酚帶入細(xì)胞，限制了細(xì)胞對(duì)茶多酚的攝取。通過(guò)納米包埋手段，可以克服茶多酚的不穩(wěn)定性、腸道運(yùn)輸不良、吸收率低等問(wèn)題。納米介導(dǎo)遞送系統(tǒng)確保了茶多酚在胃腸條件下的物理穩(wěn)定性、靶向性、緩釋性，增加了細(xì)胞對(duì)茶多酚的攝取從而提高茶多酚的生物利用度，實(shí)現(xiàn)了低劑量的藥物濃度即可達(dá)到抗癌效果。

Siddiqui等[66]研究發(fā)現(xiàn)載有EGCG的殼聚糖納米粒子能顯著誘導(dǎo)人類黑素瘤Mel928細(xì)胞的凋亡和抑制細(xì)胞增值，在小鼠模型中也證實(shí)其抗癌活性，并且該納米制劑比單純使用EGCG的抗癌效果高出8倍。Liang等[37]以腫瘤細(xì)胞HepG2為細(xì)胞模型，以移植瘤H22小鼠為動(dòng)物模型，探討葉酸改性羧甲基殼聚糖和殼聚糖鹽酸鹽制備的納米茶多酚的抗腫瘤效果，研究發(fā)現(xiàn)，該納米粒在體內(nèi)外均有較強(qiáng)的抗腫瘤效果，對(duì)表面具有大量葉酸受體的癌細(xì)胞具有更強(qiáng)的腫瘤抑制作用。張昀[67]在杜文凱及其他實(shí)驗(yàn)室成員的研究基礎(chǔ)上，以β-乳球蛋白作為納米載體，釆用熱誘導(dǎo)法制備了4種EGCG-β-乳球蛋白納米粒(20～30 nm)，采用MTT法研究了4種納米粒在不同濃度和不同時(shí)間下對(duì)人體黑色素瘤細(xì)胞(A375)、人肺腺癌細(xì)胞(SPC-A-1)、人宮頸癌細(xì)胞(Hela)、人結(jié)直腸癌細(xì)胞(CaCao-2)等14種腫瘤細(xì)胞活性抑制效果，結(jié)果顯示，這些納米粒均比單純的EGCG有更強(qiáng)的抗腫瘤活性。祖元?jiǎng)偟萚44]制備葉酸介導(dǎo)的EGCG白蛋白納米粒(FA-EGCG-BSANP)，顯著提高了EGCG對(duì)前列腺癌細(xì)胞(PC-3)的致死作用，同等濃度下FA-EGCG-BSANP對(duì)PC-3細(xì)胞的抑制率為82.8%，而EGCG溶液為58.6%。

納米包埋可以提高EGCG的穩(wěn)定性，而近來(lái)的研究又發(fā)現(xiàn)EGCG可以提高納米粒的穩(wěn)定性，以EGCG-納米顆粒作為藥物載體具有很大的發(fā)展前景。Liao等[68]分別以EGCG-納米粒和普通納米粒負(fù)載多西紫杉醇(DT)，發(fā)現(xiàn)嫁接有EGCG的納米顆粒比普通納米粒穩(wěn)定性更高，外觀更平滑，結(jié)構(gòu)更緊湊。納米粒嫁接EGCG后可顯著提高DT藥物的透皮性，EGCG-納米粒和普通-納米粒負(fù)載DT后對(duì)A-375人黑素瘤細(xì)胞的腫瘤抑制率分別為92.25%、73.2%。Zhang等[69]以茶多酚納米粒負(fù)載阿霉素，提高阿霉素在腫瘤部位的有效積累，以茶多酚構(gòu)建的納米粒裝載藥物可同時(shí)發(fā)揮藥物和茶多酚的功能，從而提高茶多酚和所載藥物的生物利用度。學(xué)者們?cè)谘芯苛瞬瓒喾蛹{米粒的抗腫瘤效果的基礎(chǔ)上，又進(jìn)一步探究了其抗腫瘤機(jī)制。Wu等[70]探究了Eβ-NPs納米粒誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡機(jī)制，研究發(fā)現(xiàn)，Akt蛋白質(zhì)發(fā)揮了關(guān)鍵作用，通過(guò)降低Akt磷酸化水平，影響促凋亡蛋白或抗凋亡蛋白的表達(dá)。Eβ-NPs比單純的EGCG更有效的介導(dǎo)Akt活化水平的降低，促進(jìn)Capase-3、Capase-9裂解，降低Bcl-2基因表達(dá)，提高Bax基因表達(dá)，從而阻斷腫瘤抗凋亡信號(hào)通路，此外Akt活化減少也引起了p21蛋白上調(diào)，進(jìn)一步抑制cyclin E蛋白和CDK蛋白的表達(dá)，導(dǎo)致細(xì)胞周期停滯和細(xì)胞增殖減少。

2.3 抗菌抗炎

Zhang等[71]通過(guò)離子凝膠技術(shù)包裹兒茶素(CAT)或兒茶素-Zn復(fù)合物(CAT-Zn)制備不同粒徑的β-殼聚糖納米粒子(β-CS)并評(píng)價(jià)其抗菌活性。研究表明，相比于未包裹的CAT和CAT-Zn，β-CS包裹的CAT(β-CS-CAT)或CAT-Zn(β-CS-CAT- Zn)具有更強(qiáng)的抗菌活性，并且粒徑越小的納米?？咕钚栽胶?。β-CS-CAT-Zn的抗菌活性優(yōu)于β-CS-CAT，前者對(duì)乳桿菌和大腸桿菌的最小抑菌濃度和最小殺菌濃度分別為0.031和0.063 mg·mL-1以及0.063和0.125 mg·mL-1。Lin等[72]研究發(fā)現(xiàn)，游離的EGCG穩(wěn)定性差，常常無(wú)法到達(dá)抗菌活性的目標(biāo)位置就已發(fā)生降解，而制備的巖藻糖-殼聚糖/明膠-EGCG納米粒，有良好的靶向作用，可直接作用于幽門螺旋桿菌感染部位的細(xì)胞，對(duì)幽門螺桿菌有顯著的清除效果，并可有效減少該菌引起的胃竇炎。侯紹云[73]以殼聚糖(CS)和聚天冬胺酸(PAA)作為納米載體裝載茶多酚(TP)，所制備的TP-CS-PAA納米粒對(duì)三隔鐮孢菌、尖孢炭疽菌、互隔交鏈孢霉、可可毛色二孢菌、葡萄座腔菌5種病原真菌的菌絲生長(zhǎng)和孢子萌發(fā)均有抑制作用，且抑制作用與濃度呈正相關(guān)。相同濃度下，TP-CS-PAA納米粒對(duì)病原真菌的抑制效果顯著優(yōu)于單純茶多酚，TP-CS-PAA納米粒對(duì)上述5種病原真菌菌絲生長(zhǎng)抑制的有效中濃度EC50分別為0.220、0.437、0.235、0.171、0.190，而非納米粒的有效中濃度EC50依次為0.337、0.608、0.321、0.282、0.299。

2.4 其他

Smith[74]等在小鼠試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，EGCG納米脂質(zhì)的體內(nèi)口服利用度比游離EGCG提高2倍，包封的EGCG可使誘導(dǎo)神經(jīng)元SweAPP N2a細(xì)胞產(chǎn)生α-分泌酶的能力提高91%，促進(jìn)淀粉樣前體蛋白(APP)的非淀粉樣蛋白合成，防止腦β-淀粉樣斑塊形成，從而提高阿爾茨海默病和HIV相關(guān)性癡呆的治療效果。Kumar等[75]給試驗(yàn)小鼠喂食殼聚糖-茶多酚納米制劑，3天后將之暴露在輻射環(huán)境，發(fā)現(xiàn)封裝的茶多酚比單純的茶多酚顯示出更高的防輻射效力，降低了輻射誘導(dǎo)的致死率。張俊等[76]利用茶多酚作為還原劑和穩(wěn)定劑制備納米銀，所得茶多酚納米銀溶液對(duì)直接藍(lán)15(一種染料)的催化降解率高達(dá)91%，而沒(méi)加茶多酚納米銀，相同時(shí)間內(nèi)直接藍(lán)15的降解率僅有35%。Zheng等[77]以殼聚糖-酪蛋白磷酸肽(CS-CPP)包埋甲基化的表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯(EGCG3”Me)，所制備的CS-CPP-EGCG3”Me納米?？擅黠@改善EGCG3”Me生物活性并顯示出良好的抗肥胖作用和腸道微生物菌群調(diào)節(jié)作用。Zhang等[78]在EGCG納米粒表面靶向結(jié)合CD36受體，所制備的納米粒表面的CD36受體能有效的將EGCG遞送至巨噬細(xì)胞內(nèi)，提高巨噬細(xì)胞對(duì)EGCG的親和力和攝取，從而提高EGCG的抗動(dòng)脈粥樣硬化活性。

3 展望

納米材料因其特有的小尺寸效應(yīng)和量子效應(yīng)，已在醫(yī)藥、食品及化妝品領(lǐng)域中展現(xiàn)出廣闊的應(yīng)用前景。采用納米技術(shù)包埋茶多酚可保護(hù)其免受外界環(huán)境或胃腸道中氧化、降解，提高其穩(wěn)定性，且在提高茶多酚生物利用度、緩釋、靶向效應(yīng)等方面具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)，然而茶多酚納米粒想要從實(shí)驗(yàn)室到實(shí)際應(yīng)用還需要進(jìn)一步的研究。

(1)納米包埋技術(shù)在提高茶多酚穩(wěn)定性和生物利用度已取得較大進(jìn)展，然而各載體材料均存在一定的缺陷。脂質(zhì)體生產(chǎn)重現(xiàn)性差、貯存穩(wěn)定性欠佳、包封率低、在體外被包埋物易于從脂質(zhì)體中滲漏，或在體內(nèi)未到達(dá)靶組織，脂質(zhì)體就發(fā)生滲漏；殼聚糖分子中存在氨基和羥基等官能團(tuán)，易受到體系酸堿性的干擾，不能在相對(duì)酸性的環(huán)境下存在；金納米制備成本高、產(chǎn)率產(chǎn)量低；無(wú)機(jī)材料在安全性、質(zhì)量評(píng)價(jià)等方面仍面臨著較多問(wèn)題。(2)茶多酚納米粒的生物活性與藥物水平尚有一定差距。(3)已有的細(xì)胞和動(dòng)物試驗(yàn)結(jié)果尚缺乏臨床試驗(yàn)驗(yàn)證。人體環(huán)境復(fù)雜，離子、pH、胃腸道中的消化酶和粘液層等因素，均會(huì)影響納米粒子遞送系統(tǒng)的穩(wěn)定性，體外細(xì)胞模型以及體內(nèi)動(dòng)物模型的結(jié)果不能代表人體療效，需要進(jìn)行臨床試驗(yàn)驗(yàn)證。未來(lái)研究可以從以下幾方面入手：(1)通過(guò)功能團(tuán)修飾提高壁材的穩(wěn)定性；(2)挖掘開(kāi)發(fā)新的載體材料；(3)開(kāi)發(fā)適于口服給藥的茶多酚納米制劑；(4)在體內(nèi)外試驗(yàn)已取得進(jìn)展的茶多酚納米制劑，需進(jìn)行系統(tǒng)的毒性驗(yàn)證，并進(jìn)行臨床試驗(yàn)。