鹿壞死桿菌病的病原學(xué)檢疫及其治療

王秀弟，張國龍

（吉林省通榆縣邊昭鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站137200）

鹿壞死桿菌病為鹿的一種慢性傳染病，其病原體是嚴(yán)格厭氧性壞死桿菌。在獸醫(yī)臨床上主要表現(xiàn)為蹄部、四肢皮膚和深部組織以及消化道黏膜壞死性病變。本病在我國各鹿場流行較廣，是危害鹿最嚴(yán)重的的一種傳染病[1-2]。

1 病原特點

壞死梭桿菌命名變化很大，在不同時期稱為壞死桿菌、壞死梭菌、壞死絲球菌等。名稱的多樣性反映了該菌最初分類學(xué)位置的不穩(wěn)定性。目前列為擬桿菌科梭桿菌屬成員。

該病原菌為專性厭氧菌，多形態(tài)，在培養(yǎng)物中表現(xiàn)為球菌狀、短或長桿狀以及長絲狀。在幼齡培養(yǎng)物和活性病變中部分呈長絲狀，表現(xiàn)紡錘形或圓形隆起，直徑可達(dá)1.8 μm。細(xì)胞形態(tài)取決于培養(yǎng)基年齡、病原菌株和培養(yǎng)基。在葡萄糖肉湯中，細(xì)菌直徑0.5～0.7 μm，隆起部位可達(dá)1.8 μm。細(xì)菌長度從球狀到長絲狀，超過100 μm。細(xì)菌兩端或圓形或錐形。幼齡培養(yǎng)物以異染顆粒狀內(nèi)含物的長絲狀形式存在居多，特別是液體培養(yǎng)基。而球菌和桿菌在固體培養(yǎng)基老齡培養(yǎng)基上多見。異染顆粒是該病原菌的一個特征，染色涂片時呈現(xiàn)“串珠樣”外觀。本菌為革蘭氏陰性菌，無鞭毛和芽孢。易著染所有普通的苯胺染料。

2 流行情況

傳染源主要是患病鹿及帶菌鹿，不同品種和各種年齡的鹿均可感染。皮膚損傷是主要感染途徑，也可通過消化道創(chuàng)傷、鋸茸的損傷、產(chǎn)道傷口以及臍帶炎而感染。另外，生活環(huán)境不良，如地面潮濕泥濘，凹凸不平、氣候悶熱潮濕，也易于此病的發(fā)生。本病一年四季均可發(fā)生，多于夏秋季節(jié)流行。

3 病原性檢疫

病料的采集和處理。麻醉待檢鹿：用鹿眠寶3號通過嘴吹式噴槍將其麻倒。先用75%酒精棉擦拭待檢鹿的壞死部位，后剪取病變部位的小塊組織，接種于運送培養(yǎng)基；最好用滅菌鉑金耳鉤取病變部組織（應(yīng)盡量避開血液）接種到運送培養(yǎng)基。在采集病料時，由于小量組織或膿汁極易干燥，導(dǎo)致厭氧菌死亡，因此通常用棉拭子進(jìn)行采樣，并將采樣的棉拭子放入運送培養(yǎng)基，這樣可以保證病原菌的存活率。采集病料的病料須置于4℃的保溫瓶中，盡快送回實驗室進(jìn)行培養(yǎng)。若不能立即培養(yǎng)，應(yīng)置于4℃的冰箱中保存。采集的病料于7 d內(nèi)病原菌分離效果最好。

病原分離培養(yǎng)基。心腦浸液血液瓊脂培養(yǎng)基、Eugon?broth培養(yǎng)基及蛋白胨酵母肉湯標(biāo)本運送培養(yǎng)基。

病原分離方法。采集的組織塊或臟器塊，分別用無菌環(huán)取樣，在厭氧培養(yǎng)基上做劃線培養(yǎng)。沾有膿汁的棉拭子從運送培養(yǎng)基取出后，直接浸泡于10 mL新鮮配制的EY（Eugonbroth+酵母）肉湯中，1∶100以上稀釋樣本，迅速將稀釋液0.1 mL涂布于厭氧分離培養(yǎng)基表面，每個稀釋度做2板。培養(yǎng)基放入?yún)捬豕迏捬跖囵B(yǎng)48～72 h后觀察。

分離培養(yǎng)物的鑒定。培養(yǎng)特性該菌培養(yǎng)適溫為37.0℃。含5%～10%CO2、80%～90%N2、5%～10%H2的混合氣體為最適的厭氧氣體培養(yǎng)條件，在pH7.5～8.5之間有利于生長。生化特性能形成靛基質(zhì)，能使牛乳凝固并胨化，液化明膠不定，多數(shù)菌株產(chǎn)生酯酶，在血瓊脂平板上毒力菌株呈β型溶血；非毒力菌株或弱毒株呈α型溶血或不溶血，能轉(zhuǎn)化蘇氨酸為丙酸鹽。多數(shù)菌株在培養(yǎng)中大量產(chǎn)氣，但也有產(chǎn)氣不多者。菌落和菌體形態(tài)在含馬血或兔血的心腦浸液瓊脂平板培養(yǎng)48～72 h，毒力菌株形成圓形，直徑2～4 mm，平坦、光滑、灰白且亮或微黃色，呈波狀邊緣的菌落，菌落微凸或中央凸起，呈典型的β型溶血；非毒力菌株表現(xiàn)菌落1～2 mm，凸起，邊緣整齊，黃色，呈α型溶血。在鹿肢蹄部位壞死深層組織及膿汁涂片可見到典型長絲狀革蘭氏陰性桿菌。將培養(yǎng)基上生長的菌落涂片，染色鏡檢，可見有多形態(tài)的革蘭氏陰性桿菌，從球桿狀到長絲狀桿菌不一，單個或成堆排列，許多呈“L”型存在。在液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)24 h后，多數(shù)呈短桿狀或球桿狀。許多短桿狀菌著色不均，有異染顆粒。新鮮菌株培養(yǎng)易出現(xiàn)典型的長絲狀“串珠樣”桿狀形態(tài)。

動物試驗。將病料用滅菌生理鹽水制成混懸液，分別給家兔、小白鼠皮下注射。被接種動物逐漸消瘦，接種局部壞死，經(jīng)8～27 d死亡，個別在10周內(nèi)死亡。內(nèi)臟有轉(zhuǎn)移性壞死灶，取病料進(jìn)行細(xì)菌學(xué)檢查。也可采用家兔耳背面包埋法，即先將兔耳背面皮膚切一小口，然后伸進(jìn)刀柄剝離皮膚，做成一個人工皮囊，將被檢病料包埋其中，用火棉膠封口觀察。家兔通常逐漸消瘦，包埋部形成壞死，多數(shù)約10～30 d死亡，個別2個月內(nèi)死亡。死后剖檢會發(fā)現(xiàn)內(nèi)臟有轉(zhuǎn)移性壞死灶，同時可分離到壞死梭桿菌。

4 治療方法

徹底清除患部壞死組織和膿汁充分暴露創(chuàng)面，將病灶周圍洗凈，剪毛，涂擦碘酊，然后用3%～5%的雙氧水溶液，或0.1%～0.2%高錳酸鉀溶液沖洗創(chuàng)口，為防止患部創(chuàng)口污染，用維氏流膏、魚石脂或純焦油浸漬的紗布繃帶包扎創(chuàng)口，繃帶包扎時，應(yīng)采取多道包扎打結(jié)，以防脫落。視病情一般2～3 d處理1次，直到創(chuàng)口痊愈。必要時采用全身療法。

[1] 衛(wèi)澤珍.鹿壞死桿菌病的流行病學(xué)、臨床癥狀、實驗室檢驗及其防治[J].現(xiàn)代畜牧科技,2017(8)：63.

[2] 趙偉.鹿壞死桿菌病的診治[J].中國畜禽種業(yè),2016,12(4)：110.