HPLC法檢驗(yàn)骨刺消痛膠囊中非法添加西藥吡羅昔康的探討

(平頂山市食品藥品檢驗(yàn)所，河南 平頂山 467000)

抗風(fēng)濕類的藥物中經(jīng)常被不良商家添加非法的西藥成分，通常非法添加的藥品主要分兩大類[1-2]，分別是抗炎鎮(zhèn)痛類的西藥(吡羅昔康、布洛芬、奧沙普嗪等)、激素類西藥(磷酸地塞米松、強(qiáng)的松等)?；颊呷绻L(zhǎng)期服用這些非法添加的藥品，會(huì)誤以為該藥品有長(zhǎng)期的療效，能很好的緩解自己的癥狀，但實(shí)際會(huì)造成藥源性疾病[3]。為了有效控制制劑的質(zhì)量，打擊假藥，保障百姓的生命財(cái)產(chǎn)安全，筆者對(duì)骨刺消痛膠囊采用HPLC法檢測(cè)非法添加西藥吡羅昔康的含量，取得了不錯(cuò)的檢驗(yàn)結(jié)果。

1 材料和方法

1.1儀器與藥品 使用的儀器為：島津LC-2010HT高效液相色譜工作站；采用TU-1901可見-紫外分光光度計(jì)做為普析所用的儀器；高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用使用的是安捷倫公司的1100 Series和6320Lon Trap LC/MS。試藥：吡羅昔康標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品由中國(guó)藥品生物制品檢定所供給，采用西安太極藥業(yè)有限公司的吡羅昔康作為抽檢產(chǎn)品。冰乙酸為優(yōu)級(jí)純，乙腈選用的是色譜級(jí)純度的，其他試劑均為分析純，水為超純水。

1.2方法

1.2.1色譜條件 采用島津公司的Shim-pack C18色譜柱進(jìn)行檢驗(yàn)，將檢測(cè)波長(zhǎng)設(shè)置為243 nm，使用60∶40的乙腈-0.5%的冰乙酸作為流動(dòng)相。

1.2.2對(duì)照品溶液的制備 準(zhǔn)確稱量5 mg的吡羅昔康標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品，于50 ml的容量瓶中加入上述高效液相色譜的流動(dòng)相作為溶劑，輔以超聲使其完全溶解，冷卻至室溫后加入上述流動(dòng)相溶液定容至刻度線，充分搖勻待用。

1.2.3試樣溶液的配制 將上述抽檢品使用研缽研細(xì)，準(zhǔn)確稱量300 mg的上述物質(zhì)于50 ml的容量瓶中，加入上述高效液相色譜的流動(dòng)相作為溶劑使其完全的溶解，冷卻至室溫后加入上述流動(dòng)相溶液定容至刻度線，充分搖勻待用。

1.2.4線性關(guān)系考察 取0.1068 mg/ml的吡羅昔康對(duì)照品儲(chǔ)備液，用流動(dòng)相溶液稀釋成以下各種濃度的溶液：1.068、5.34、10.68、16.02、26.70、53.40μg/ml，每種濃度吸取10μl進(jìn)行高效液相的分析，每個(gè)濃度進(jìn)樣3次，取3次的平均值，縱坐標(biāo)為峰面積，橫坐標(biāo)為濃度，做線性圖。

1.2.5精密度試驗(yàn) 將試樣溶液照上述方法，用高效液相色譜儀依法測(cè)定，連續(xù)進(jìn)樣6次，進(jìn)行試驗(yàn)。

1.2.6重復(fù)性試驗(yàn) 取6份抽檢品，每份約0.3 g，精密稱定，參照“1.2.5”的方法，獨(dú)立試驗(yàn)。

1.2.7穩(wěn)定性試驗(yàn) 取試樣溶液參照“1.2.5”的方法，考察0、2、5、8、12、24 h峰面積值的變化，RSD=0.40%。

1.2.8陰性回收率試驗(yàn) 準(zhǔn)確稱取按骨刺消痛膠囊處方的6份陰性樣品細(xì)粉(每份約0.15 g)，分別加入吡羅昔康對(duì)照品，參照“1.2.5”的方法，獨(dú)立試驗(yàn)。

1.2.9加樣回收試驗(yàn) 準(zhǔn)確稱取已知含量的骨刺消痛膠囊處方和制法制備的6份樣品細(xì)粉(每份約0.15 g)，分別加入吡羅昔康對(duì)照品，參照“1.2.5”的方法，獨(dú)立試驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1線性關(guān)系考察 所得的線性回歸方程為：

Y=7.1242×104X+6.0993×103，r2=1

結(jié)果表明，吡羅昔康有著較好的線性關(guān)系。

2.2精密度試驗(yàn) 結(jié)果表明精密度良好，RSD=0.13%。

2.3重復(fù)性試驗(yàn) 平均含量為21%，RSD=1.18%，表明重復(fù)性良好。

2.4穩(wěn)定性試驗(yàn) 測(cè)定結(jié)果表明，在24 h內(nèi)，供試品溶液中吡羅昔康的含量基本穩(wěn)定，說明該方法穩(wěn)定性良好。

2.5陰性回收率試驗(yàn)和加樣回收試驗(yàn) 陰性回收率試驗(yàn)和加樣回收試驗(yàn)的平均回收率為98.7%，RSD=2.1%。結(jié)果進(jìn)一步證明采用本法檢定該類中成藥中含有吡羅昔康是可行的。西藥吡羅昔康對(duì)照品的線性范圍是1.068～53.40 μg/ml，r2=1，平均回收率為98.7%，RSD=2.1%。

3 討論

取吡羅昔康對(duì)照品的流動(dòng)相溶液，進(jìn)行紫外掃描發(fā)現(xiàn)有兩處吸收，參考文獻(xiàn)選擇了243 nm的波長(zhǎng)[4-5]，采用島津公司的Shim-pack C18色譜柱進(jìn)行檢驗(yàn)，使用60∶40的乙腈-0.5%的冰乙酸作為流動(dòng)相，對(duì)骨刺消痛膠囊中非法添加西藥吡羅昔康的含量進(jìn)行檢驗(yàn)。經(jīng)一系列的線性關(guān)系考察、精密度試驗(yàn)、重復(fù)性試驗(yàn)、穩(wěn)定性試驗(yàn)、陰性回收率試驗(yàn)和加樣回收試驗(yàn)[6]。研究結(jié)果進(jìn)一步證明，采用本法檢定該類中成藥中含有吡羅昔康是可行的。所得線性回歸方程為：Y=7.1242×104X+6.0993×103，r2=1，結(jié)果表明，吡羅昔康有著較好的線性關(guān)系；精密度試驗(yàn)結(jié)果表明精密度良好，RSD=0.13%；重復(fù)性試驗(yàn)平均含量為21%，RSD=1.18%,表明重復(fù)性良好；穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果表明，在24h內(nèi)，供試品溶液中吡羅昔康的含量基本穩(wěn)定，說明該方法穩(wěn)定性良好；西藥吡羅昔康對(duì)照品的線性范圍是1.068～53.40 μg/ml，r2=1，平均回收率為98.7%，RSD=2.1%。

綜上所述，采用HPLC法檢驗(yàn)骨刺消痛膠囊中非法添加的西藥吡羅昔康含量，簡(jiǎn)便高效，結(jié)果準(zhǔn)確度高，且成本低廉，可以有效對(duì)制劑的質(zhì)量進(jìn)行控制，保障百姓的生命財(cái)產(chǎn)安全，值得在臨床檢驗(yàn)中推廣應(yīng)用。