竹醋銅制劑對煙草黑脛病菌室內(nèi)抑制效果研究

許靈杰

摘要 為了解竹醋銅制劑對煙草黑脛病菌的抑制效果，采用室內(nèi)抑菌試驗(yàn)研究了竹醋銅制劑對黑脛病的抑制作用。結(jié)果表明，竹醋銅制劑50～200倍液處理對黑脛病病菌的抑制效果較顯著；400倍液處理的抑制效果較差，與未添加竹醋銅制劑的對照處理的差異不明顯。因此，竹醋銅制劑作為一種新型綠色藥劑，對煙草黑脛病菌具有一定的防效。

關(guān)鍵詞 煙草黑脛病；竹醋銅制劑；抑菌效果

中圖分類號 S435.72；S481+.9 文獻(xiàn)標(biāo)識碼 A 文章編號 1007-5739（2018）03-0129-02

Abstract To understand the inhibition effect of bamboo vinegar reunited copper on tobacco black shank，indoor antibacterial test was carried out in this paper.The results showed that 50-200 times treatment had a significant inhibition effect on the black shank.400 times treatment was less effective，and there was no significant difference between it and the control.Therefore，as a new kind of green medicament，bamboo vinegar reunited copper is effective against tobacco black shank.

Key words tobacco black shank；bamboo vinegar reunited copper；inhibition effect

煙草黑脛病屬于土傳真菌性病害[1]，分布廣泛，在我國各大煙區(qū)均有不同程度的發(fā)生，并多與煙草青枯病混合發(fā)生，對煙葉生產(chǎn)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失[2]，僅次于煙草花葉病毒病。據(jù)統(tǒng)計，我國平均每年因其造成的經(jīng)濟(jì)損失達(dá)1億元以上[3]。目前，針對該病大部分煙區(qū)仍然采用化學(xué)藥劑防治手段[4]，盡管通過此種方法在短時間內(nèi)收效明顯，但卻存在諸多弊端，例如長期單一、大量、重復(fù)地使用化學(xué)藥劑，會造成“3R”問題[5]。這不僅會增加后續(xù)防治難度及成本，還會破壞生態(tài)環(huán)境甚至危及人類健康。竹醋液是一種天然無公害制劑[6]，不僅具有殺蟲[7]和抑菌的作用[8]，還可提高藥效[9]。銅制劑具有殺菌效果好、低毒、環(huán)保等優(yōu)點(diǎn)[10]，但卻容易產(chǎn)生毒害，例如當(dāng)硫酸銅形成含水銅大于10 mg/L時會危害作物生長[11]。因此，利用竹醋液對藥劑的增效作用，將硫酸銅與竹醋液混合，能夠有效降低單一銅制劑的用量，避免對作物的傷害，同時又不降低藥效，而且藥劑的原料滿足有機(jī)生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)[12]。據(jù)相關(guān)研究表明，竹醋液復(fù)合銅能有效抑制番茄軟腐病菌絲的生長，治療效果達(dá)到58.63%，而預(yù)防效果則高達(dá)77.72%[13]。竹醋液復(fù)合硅溶液對番茄葉霉病菌絲生長抑制率達(dá)46.57%，防效達(dá)53.45%，顯著高于單一的竹醋液[14]。竹醋銅制劑能夠有效降低其他作物的真菌性病害發(fā)生，關(guān)于煙草上此類病害的研究尚無報道。因此，筆者深入研究竹醋銅制劑對煙草黑脛病菌室內(nèi)抑制效果，旨在尋找有效、經(jīng)濟(jì)的抑制濃度，以期為在煙草病害防治中替代化學(xué)藥劑的篩選提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

培養(yǎng)基：LAB培養(yǎng)基（利馬豆：70 g，瓊脂粉：20 g、去離子水：1 000 mL）。竹醋液：浙江省遂昌縣文照竹炭責(zé)任有限公司生產(chǎn)（密度1.006 g/mL，pH值2.62，醋酸含量4.54%）。硫酸銅：分析純，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。竹醋銅制劑：將硫酸銅與竹醋液在一定工藝條件下螯合形成，其中無機(jī)銅離子濃度為0.1 mol/L。

1.2 試驗(yàn)方法

用去離子水將竹醋銅制劑分別稀釋為50倍液、100倍液、200倍液和400倍液，其無機(jī)銅離子含量分別為20.0、10.0、5.0、2.5 mmol/L。將配制好的LAB培養(yǎng)基裝入三角瓶中，每瓶定容到100 mL，高溫滅菌后待培養(yǎng)基溫度下降到60 ℃左右時，分別從低濃度到高濃度加入50 mL配制好的各濃度藥液（同上），搖勻后制成系列濃度的含藥培養(yǎng)基，將其倒入直徑為9 cm的培養(yǎng)基中，每個處理重復(fù)3次，以加無菌水的處理作空白對照。在無菌條件下用打孔器（10 mm）在LAB平板上培養(yǎng)的煙草黑脛病菌菌落邊緣打出菌餅（培育時間一致）。待上述培養(yǎng)基冷卻后，在每皿中央以菌面朝下接入1個菌餅，然后放入28 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)7 d。用十字交叉法測量菌落直徑，計算其抑制率：

抑制率（%）=[（空白對照菌落直徑-10 mm）-（處理菌落直徑-10mm）]÷（空白對照菌落直徑-10 mm）×100

1.3 數(shù)據(jù)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Microsoft Excel 2003和SPSS.17.0進(jìn)行單因素方差分析。

2 結(jié)果與分析

由表1和圖1均可看出，竹醋銅制劑對黑脛病具有一定的抑制作用，且隨著銅離子濃度的增加抑制作用增強(qiáng)。50倍液處理的抑制作用非常明顯，菌圈直徑較CK減少54.6 mm，差異顯著，抑制率達(dá)到84.54%；但是當(dāng)其大于100倍液時，抑制效果明顯減弱；在400倍液時，與CK無顯著差異。

3 結(jié)論與討論

羅 敏等[15]研究結(jié)果顯示，竹醋液與黃連、厚樸復(fù)配后產(chǎn)生明顯的增效作用；王文杰[16]發(fā)現(xiàn)竹醋液與其他藥物輔配后可產(chǎn)生明顯的增效作用；李德廣[17]試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，氨基酸螯合硫酸銅能夠形成一種具有殺菌和肥料雙重作用的有機(jī)藥肥，對黃瓜霜霉病防效達(dá)到74.88%，對番茄灰霉病防效達(dá)到 84.42%，對番茄晚疫病防效達(dá)到70.15%，均優(yōu)于單一銅制劑；馬建義等[18]研究表明，14%竹醋絡(luò)氨銅制劑300倍液對水稻稻曲病的防效顯著高于20%三唑酮乳劑1 000倍液，說明竹醋液與硫酸銅、氨水絡(luò)合能形成良好的殺菌劑。與本文室內(nèi)抑菌試驗(yàn)得出的竹醋銅制劑50～200倍液對煙草黑脛病有顯著防效的結(jié)果相似。銅制劑屬于一種良好的殺菌劑，以波爾多液為例，其利用銅離子與病原菌體內(nèi)活性集團(tuán)結(jié)合產(chǎn)生銅的絡(luò)合物等，使蛋白變性，從而抑制病菌代謝，致其死亡[19]。同時，竹醋液在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的應(yīng)用已經(jīng)證明，其不僅能促進(jìn)作物生長，而且具有高效的殺菌效果。當(dāng)二者混合后，形成竹醋銅溶液，通過竹醋液增效作用，可以顯著提高殺菌能力。本試驗(yàn)僅探索竹醋銅制劑的室內(nèi)抑菌效果，關(guān)于室外效果尚不清楚。由于外界環(huán)境因素復(fù)雜多變，往往造成與室內(nèi)效果不符合的結(jié)果，降低推廣應(yīng)用的意義。因此，接下來應(yīng)開展盆栽接菌抑制試驗(yàn)以及大田推廣驗(yàn)證試驗(yàn)，以進(jìn)一步探索竹醋銅制劑的促生效果與抗病效果協(xié)同作用最佳的比例。endprint

本試驗(yàn)結(jié)果表明，竹醋銅制劑屬于銅制劑與竹醋液的復(fù)合劑，其對煙草黑脛病有一定的抑制作用，適宜在今后的煙葉生產(chǎn)中試點(diǎn)及推廣。

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