生物活性玻璃和五倍子對釉質(zhì)及變形鏈球菌的影響

張華 王首力

摘 要：選取2019年12月承德市口腔醫(yī)院就診的80名5～7歲重度齲兒童，隨機(jī)分成兩組，每組40例，對兩組患者治療前先采用棉拭子法對患兒口腔內(nèi)變形鏈球菌增殖、產(chǎn)酸以及耐酸等能力實(shí)施檢測，治療后確?；颊呷懒袩o齲后，分別采用生物活性玻璃（觀察組）和五倍子（對照組）實(shí)施全牙列涂擦，且對患兒及其家屬進(jìn)行口腔衛(wèi)生宣教。治療后3個(gè)月后進(jìn)行復(fù)查，再次采用棉拭子法對患兒口腔內(nèi)變形鏈球菌增殖、產(chǎn)酸以及耐酸等能力實(shí)施檢測，對比兩組患者的治療效果。結(jié)果發(fā)現(xiàn)兩組患兒脫礦后和再礦化的釉質(zhì)表面顯微硬度值和脫礦前相比，得到顯著改善，但是組間差異對比P=0.417>0.05，不具備統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;生物活性玻璃和五倍子對釉質(zhì)及變形鏈球菌具有顯著的抑制效果和抗酸性能，治療后觀察組患兒的細(xì)菌培養(yǎng)基中變形鏈球菌菌落數(shù)和對照組相比偏少，但是差異對比P=0.241>0.05，兩者差異不顯著，但是相對來講生物活性玻璃的應(yīng)用效果更佳。

關(guān)鍵詞：生物活性玻璃;五倍子;釉質(zhì)及變鏈球菌

中圖分類號：R781.1 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：1001-5922（2021）08-0058-04

Effects of bioactive glass and Galla Chinensis on Enamel and Streptococcus Mutans

Zhang Hua， Wang Shouli

（Chengde Stomatological Hospital， Chengde 067000， China）

Abstract：A selection of 80 children with severe caries aged 5～7 years in Chengde Stomatological Hospital in December 2019 were randomLy divided into two groups with 40 cases in each group. Before treatment， the two groups of patients were treated with cotton swabs to test the proliferation， acid production， and acid resistance of streptococcus mutans in the oral cavity of the children. After the treatment， after the patients dentition was caries-free， bioactive glass （observation group） and gall （control group） were used to wipe the entire dentition， and children and their families conduct oral hygiene education. Re-examination was carried out 3 months after treatment， and the cotton swab method was used to test the proliferation， acid production， and acid resistance of streptococcus mutans in the oral cavity of the children， and the treatment effects of the two groups of patients were compared. The results showed that the microhardness of the enamel surface after demineralization and remineralization in the two groups was significantly improved compared with that before demineralization， but the difference between the groups was P=0.417>0.05， which was not statistically significant; biological activity glass and gall have a significant inhibitory effect on enamel and streptococcus mutans and acid resistance. After treatment， the number of colonies of streptococcus mutans in the bacterial culture medium of the observation group is less than that of the control group， but the difference is P=0.241> 0.05， the difference between the two is not significant， but relatively speaking， the application effect of bioactive glass is better.

Key words：bioactive glass;gallnut;enamel and streptococcus mutans

當(dāng)前，家長對于乳牙齲病的預(yù)防和微創(chuàng)治療也加大了關(guān)注，但是截止到目前對于再礦化和抗酸材料的選擇還存在一定爭議。氟化物是應(yīng)用中，可以有效阻止牙體脫礦、促進(jìn)再礦化，從多個(gè)途徑實(shí)現(xiàn)對牙體組織的作用，起到良好的礦化和再礦化效果。但是大部分氟化物只能夠應(yīng)用在3歲以上兒童，對于部分易患齲兒童可能已經(jīng)錯(cuò)過最佳預(yù)防時(shí)期，截止到目前對于3歲前光滑面齲預(yù)防還沒有理想方案。與之同時(shí)，大部分氟化物再礦化材料應(yīng)用中，水中和唾液中的易于溶解，容易出現(xiàn)誤吞現(xiàn)象，特別是兒童容易導(dǎo)致出現(xiàn)不良后果，例如慢性氟重度等問題。但是在耐氟變形鏈球菌株研究中發(fā)現(xiàn)，氟化物在應(yīng)用中出現(xiàn)的劣勢越來越多，部分學(xué)者[1]在研究中也開始展開對再礦化和抗酸治療中的安全有效藥物研究。其中生物活性玻璃材料的主要成分是NovaMin，一旦接觸到水溶液或唾液環(huán)境情況下回迅速出現(xiàn)反應(yīng)，進(jìn)而釋放鈉離子，對于局部環(huán)境中的PH值具有提升作用，尤其是在弱堿性環(huán)境中，對于HA形成具有促進(jìn)作用，也會(huì)釋放出鈣磷離子，牙齒表面出現(xiàn)離子沉積后，即會(huì)形成HA，進(jìn)而推動(dòng)硬組織礦化以及重建[2]。另外在牙齒硬組織礦化研究中，中藥五倍子也具有重要應(yīng)用價(jià)值，本身作為一種天然藥物，不但能夠?qū)χ慢x菌產(chǎn)生作用，也可以促進(jìn)牙齒硬組織礦化，尤其是獨(dú)具的抑制釉質(zhì)脫礦、促進(jìn)釉質(zhì)再礦化作用更是得到了人們的普遍關(guān)注。在研究中也發(fā)現(xiàn)，五倍子中的鞣酸集合細(xì)胞外或組織外鈣離子后，能夠形成難溶性的絡(luò)合物[3]。本次為實(shí)現(xiàn)對乳牙釉質(zhì)再礦化和預(yù)防性治療的相關(guān)性研究，特選取2019年12月承德市口腔醫(yī)院就診的80名5～7歲重度齲兒童作為研究對象，通過變形鏈球菌的檢測分析，對比生物活性玻璃材料以及五味子在重度齲兒童治療中的應(yīng)用價(jià)值分析。

1 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容

1.1 樣本選擇和制備

選取2019年6月～2019年10月承德市口腔醫(yī)院就診的80例重度齲兒童，包括要求拔除的無齲牙齒160顆，將其分成4組，每組40顆。在對根部截除后，實(shí)施菌斑清除及著色， 并對其進(jìn)行清洗消毒。在自凝樹脂中包埋離體乳牙，制備成為1cm×1cm×1cm釉質(zhì)樹脂塊，各個(gè)釉質(zhì)塊唇面正中均需要設(shè)置有開窗區(qū)，大小為2cm×2cm，其他部分全部給與耐酸指甲油進(jìn)行涂擦，連續(xù)進(jìn)行3次封閉。在人工唾液中進(jìn)行樣本保存，且將其放置在37℃恒溫箱中以備使用。

選取2019年12月承德市口腔醫(yī)院就診的80名5～7歲重度齲兒童，嚴(yán)格依照相關(guān)排除標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行病例選擇，所有患者均簽署知情同意書，并對其實(shí)施隨機(jī)分組，分成兩組，每組40例，干預(yù)藥物分別為生物活性玻璃（觀察組）和五倍子（對照組）。治療前后均采用棉拭子法取唾液進(jìn)行檢驗(yàn)，并叮囑患者家屬加強(qiáng)口腔衛(wèi)生管理，采用巴氏刷牙法為患者刷牙，每次刷牙保持在3min，早晚各一次。

1.2 入組標(biāo)準(zhǔn)

針對已經(jīng)制備完成的釉質(zhì)塊經(jīng)體視顯微鏡（×10）對其進(jìn)行檢查，確保沒有齲壞、沒有側(cè)裂，沒有釉質(zhì)發(fā)育不全以及氟斑;患兒病例選取中，3個(gè)月內(nèi)沒有采用抗菌藥物或非字體抗炎藥物服用史，未伴隨任何其他口腔病，未出現(xiàn)全身系統(tǒng)性疾病，齲失補(bǔ)牙數(shù)為6個(gè)或以上，患兒可以配合治療，家長對本次研究知情同意，且可以依照指導(dǎo)對患兒進(jìn)行規(guī)范性刷牙。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

不同組樣本在人工拓礦液中實(shí)施脫礦出處理，每天進(jìn)行5次，5min/次，每次脫礦中均需要更換新鮮液體，對采用去離子水對其清洗干凈，且將其在人工唾液中進(jìn)行37℃恒溫保存，確保整個(gè)工作在12h內(nèi)完成，對樣本連續(xù)實(shí)施7d浸泡。完成脫礦實(shí)驗(yàn)后，兩組分別對其涂抹生物活性玻璃材料和五味子提取液，每組連續(xù)涂抹3min，之后采用去離子水進(jìn)行沖洗，繼續(xù)將其放置在人工唾液中進(jìn)行37℃恒溫保存，以上工作每天兩次，連續(xù)7d。

抗酸實(shí)驗(yàn)中，選取兩組樣本分別涂抹生物活性玻璃材料和五味子提取液，每組連續(xù)涂抹3min，之后采用去離子水進(jìn)行沖洗，以上工作每天兩次，連續(xù)7d。最后將其在人工脫礦液中進(jìn)行5min浸泡，取出后采用去離子水實(shí)施沖洗，一天10次操作，連續(xù)7d。

1.4 評價(jià)指標(biāo)

采用維氏顯微硬度計(jì)對樣本脫礦前、脫礦后以及再礦化顯微硬度實(shí)施檢測，每次檢測3次，去平均值作為最終結(jié)果。對比分析兩組細(xì)菌培養(yǎng)基中的變形鏈球菌菌落數(shù)以及不良反應(yīng)發(fā)生率。分別選取治療前后的患者口腔唾液完成細(xì)菌培養(yǎng)基自卑，在BHI瓊脂培養(yǎng)基上進(jìn)行口腔唾液樣本接種，在恒溫厭氧箱中進(jìn)行保存，連續(xù)進(jìn)行24h培養(yǎng)。在5mL BHI培養(yǎng)液試管中對單克隆菌株進(jìn)行轉(zhuǎn)種，在37℃ YQX-III型號恒溫厭氧性中持續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)，連續(xù)進(jìn)行24h培養(yǎng)后，制備菌懸液，并對其濃度進(jìn)行調(diào)整，濃度為100CFU/mL時(shí)即可備用。針對各組變形鏈球菌菌落數(shù)進(jìn)行計(jì)數(shù)，統(tǒng)計(jì)中每組連續(xù)進(jìn)行3次檢測，以平均值為準(zhǔn);針對兩組患兒治療期間的口腔神經(jīng)損傷、氟重度以及氟牙癥等并發(fā)癥發(fā)生率實(shí)施統(tǒng)計(jì)對比。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

本次研究所得數(shù)據(jù)實(shí)施SPSS17.0實(shí)施統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，測量指標(biāo)采用均屬標(biāo)準(zhǔn)差表示，在對其實(shí)施單因素方差分析中，組間數(shù)據(jù)差異對比顯示P<0.05，即為兩組數(shù)據(jù)差異對比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 釉質(zhì)表面顯微硬度值對比

兩組患兒脫礦后和再礦化的釉質(zhì)表面顯微硬度值和脫礦前相比，得到顯著改善，但是組間差異對比P=0.417>0.05，不具備統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。具體數(shù)據(jù)如表1所示。

2.2 治療前后細(xì)菌培養(yǎng)基中變形鏈球菌菌落數(shù)對比

對比發(fā)現(xiàn)，治療前兩組細(xì)菌培養(yǎng)基中的變形鏈球菌菌落數(shù)差異對比P>0.05，不具備統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;治療后，兩組細(xì)菌培養(yǎng)基中的變形鏈球菌菌落數(shù)和治療前相比，均明顯偏低，差異對比P<0.05，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;治療后，觀察組細(xì)菌培養(yǎng)基中的變形鏈球菌菌落數(shù)和對照組相比偏低，但是兩者對比不具備統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.05。具體數(shù)據(jù)如表2所示。

2.3 兩組患者的不良反應(yīng)發(fā)生率對比

兩組患者治療過程中均未出現(xiàn)氟中毒情況，兩者患者的不良反應(yīng)發(fā)生率差異不大，P>0.05，不具備統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。具體數(shù)據(jù)如表3所示。

3 討論

當(dāng)前，齲病是口腔科常見疾病之一，屬于是致病菌等多種影響因素所致慢性進(jìn)行性疾病，多發(fā)于兒童，臨床上認(rèn)為不良飲食習(xí)慣是其主要因素之一。我國居民消費(fèi)中，飲料消耗量在逐漸遞增，尤其是碳酸飲料得到廣大兒童的普遍歡迎，因此出現(xiàn)了越來越嚴(yán)重的低齡兒童口腔問題。針對學(xué)齡前兒童口腔管理中，廣大學(xué)者提出預(yù)防重于治療，但是這一年齡段兒童的牙齒治療接受度存在較大差異，因此非常注重齲病發(fā)生及發(fā)生初期再礦化治療研究。在微創(chuàng)治療理念應(yīng)用下，即為引入藥物，促進(jìn)齲壞牙體組織的自主修復(fù)，所以早期釉質(zhì)齲微創(chuàng)治療再礦化藥物研究成為重點(diǎn)。兒童成長中，出生后6個(gè)月會(huì)長出第一顆乳牙，12歲左右會(huì)脫落最后一顆乳牙，與之同時(shí)也是兒童的迅速生長發(fā)育階段，口腔中的乳牙具有重要作用。齲病的發(fā)生受到多種因素的影響，主要是受到飲食習(xí)慣、唾液流量、糖攝入量以及唾液氟化物水平的影響。乳牙齲病和恒牙具有一定差異，主要為患病率高、進(jìn)展快以及發(fā)病早等，領(lǐng)吧外在治療中兒童的配合度較低，容易影響到治療效果，耽誤最佳治療時(shí)機(jī)。如果牙齒損壞達(dá)到不可逆階段后，將會(huì)對直接影響到患兒整個(gè)身心健康，因此對其人們更加組中預(yù)防，以能夠提高廣大家長對于兒童乳牙的保護(hù)意識[4]。

在早期釉質(zhì)齲非創(chuàng)傷性治療中，常用再礦化藥物目前依舊是氟化物，但是在應(yīng)用中氟化物需要多次使用、濃度和用量在使用中掌控難度較大、容易形成耐氟菌株，與之同時(shí)大部分兒童吞咽功能不夠健全，如果在兒童體內(nèi)攝入大量氟，容易對患兒身體健康造成不良影響。另外研究中發(fā)現(xiàn)，單獨(dú)使用氟化物并不能夠顯著改善早期釉質(zhì)齲治療效果。隨著生物活性骨修復(fù)材料的應(yīng)用和發(fā)展，進(jìn)一步開拓了牙釉質(zhì)再礦化研究方向。例如可以加大對生物活性玻璃材料的應(yīng)用，這一材料主要活性成分為磷硅酸鈉鈣，在將鈣磷離子釋放后對于牙齒硬組織再礦化具有促進(jìn)作用。另外在齲病治療中，中草藥也具有一定應(yīng)用價(jià)值，來源廣泛、毒副作用小等，其中五倍子的主要成分為鞣酸，具有良好釉質(zhì)再礦化效果[5]。以上研究中，即對生物活性玻璃材料和五倍子在乳牙齲中的釉質(zhì)及變形鏈球菌影響展開了分析，以能夠探討兩者應(yīng)用的致酸效果，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)對其應(yīng)用價(jià)值的分析。

在近些年研究中，廣大專家學(xué)者認(rèn)識到了生物活性材料的應(yīng)用潛力。生物活性玻璃屬于是具備修復(fù)、替代以及再生組織材料，在應(yīng)用中可以在人體組織和材料間產(chǎn)生鍵合作用+。截止到目前，這一材料已經(jīng)廣泛發(fā)應(yīng)用在牙科、骨缺損修復(fù)和軟組織損傷愈合等相關(guān)方面，美國FDA、中國國家藥學(xué)監(jiān)督管理局對其應(yīng)用安全性和有效性也給予了肯定。生物活性玻璃材料在和唾液接觸后，會(huì)出現(xiàn)鈣離子和林離子析出并出現(xiàn)沉積，進(jìn)而會(huì)在脫礦釉質(zhì)表面形成類羥基磷灰石，也就可以起到良好的脫礦釉質(zhì)再礦化效果。研究中發(fā)現(xiàn)生物玻璃可以在10min迅速釋放大部分離子，也能夠?qū)⑵渚植凯h(huán)境PH值迅速提到最高值。由于受到較高滲透壓以及PH值得影響，短時(shí)間內(nèi)即可以迅速導(dǎo)致鄰近細(xì)菌大部分或全部喪失活性，取得良好的抑菌效果。

中藥屬于是我國傳統(tǒng)藥物，在應(yīng)用中的主要優(yōu)勢為來源廣泛、使用簡單、療效顯著以及副作用小等。五倍子中的主要成分為鞣質(zhì)，含量可以達(dá)到70%，也可以將其稱為是鞣酸、單寧酸，在我國具有悠久的應(yīng)用歷史，多個(gè)方面均有所應(yīng)用。1978年Tanizaki實(shí)驗(yàn)研究中發(fā)現(xiàn)，五味子中的鞣酸可以實(shí)現(xiàn)和蛋白質(zhì)的結(jié)合進(jìn)而發(fā)生反應(yīng)，對牙本質(zhì)的膠原分解產(chǎn)生抑制作用，進(jìn)而有效抑制牙本質(zhì)齲的進(jìn)展速度，具有良好的病情控制效果;1985年，Matmusura研究中進(jìn)一步證實(shí)鞣酸對于牙本質(zhì)產(chǎn)生具有促進(jìn)修復(fù)作用，再將其應(yīng)用在深齲間接蓋髓中具有重要應(yīng)用價(jià)值。齲病防治中，五倍子借助與自身鞣酸和金屬的結(jié)合特性，得到了廣大學(xué)者的重視。在對其作用分析中，發(fā)現(xiàn)主要為：①抗菌作用，在口腔疾病治療中，五倍子水提取物可以有效抑制口腔中主要致齲菌變形鏈球菌生長、產(chǎn)酸和葡糖基轉(zhuǎn)換酶活性;對于細(xì)菌在羥基磷灰石表面定植以及細(xì)菌間粘附作用也具有一定影響，不但可以將生物膜中的定植活菌消滅，同時(shí)對于細(xì)菌生物膜結(jié)構(gòu)也具有破壞作用[7]。然而相關(guān)研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，五味子無法實(shí)現(xiàn)對釉質(zhì)表面生物膜生長的徹底抑制，依舊存在有細(xì)菌[8];②退礦抑制以及再礦化促進(jìn)作用。通過研究也能夠看出五味子水提取物對脫礦釉質(zhì)礦化作用主要為：第一可以實(shí)現(xiàn)對變形鏈球菌等多種致齲菌產(chǎn)酸起到抑制作用，進(jìn)而有效抑制細(xì)菌生長;第二，鞣酸對于釉質(zhì)齲發(fā)生中的 Ca2+、P043-的溶出量具有抑制作用，與之同時(shí)也可以實(shí)現(xiàn)和鈣離子的融合，在脫礦孔隙中能夠直接達(dá)到病灶深層，也不會(huì)影響到表面礦化效果。③沉淀收斂蛋白作用，脫礦分解過程中，五倍子鞣酸能夠?qū)⒂再|(zhì)分解成蛋白凝固變性，對釉質(zhì)超微孔隙產(chǎn)生阻礙作用，導(dǎo)致釉質(zhì)通透性有所降低。④對于根面齲進(jìn)展具有抑制作用，五倍子可以和牙骨質(zhì)中的有機(jī)質(zhì)和鈣同時(shí)產(chǎn)生作用，最終形成的復(fù)合物，對于再礦化具有促進(jìn)作用。五倍子在研究中，是當(dāng)前發(fā)現(xiàn)的唯一一種可以對致齲細(xì)菌生長產(chǎn)生影響，也可以影響牙齒硬組織礦化的天然藥物，在臨床具有重要的應(yīng)用前景。

在本次研究中，分別采用生物活性玻璃（觀察組）和五倍子（對照組）實(shí)施全牙列涂擦，以此分析生物活性玻璃和五倍子在釉質(zhì)及變形鏈球菌抑制中的應(yīng)用作用，與之同時(shí)也顯著改善患兒的釉質(zhì)表面硬度，結(jié)果顯示生物活性玻璃和五倍子在應(yīng)用中的細(xì)菌培養(yǎng)基中的變形鏈球菌菌落數(shù)治療后差異對比不大，相對來講生物活性玻璃材料中的應(yīng)用效果更佳。與之同時(shí)兩種材料中均不含氟，因此不會(huì)出現(xiàn)氟中毒情況，兩組方法的應(yīng)用藥物不良反應(yīng)差異對比也不大，對治療過程沒有太大的影響作用。

4 結(jié)語

綜上，兒童重度齲治療中，生物活性玻璃材料以及五味子在變形鏈球菌抑制中效果差異不大，均可以取得良好的抑菌效果，但是單純從抑菌效果來看生物活性玻璃材料的應(yīng)用效果更佳。但是在實(shí)際應(yīng)用中，可以結(jié)合實(shí)際情況進(jìn)行合理選擇。

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