相對(duì)離心力對(duì)血凝測(cè)定結(jié)果的影響

林燕莉 黎宇

（廣西柳州市龍?zhí)夺t(yī)院檢驗(yàn)科 廣西 柳州 545005）

血凝檢測(cè)是術(shù)前患者凝血功能篩查的常規(guī)項(xiàng)目，也是出血性疾病的檢測(cè)及抗凝和溶栓治療的重要監(jiān)測(cè)指標(biāo)。在實(shí)際操作中，影響血凝四項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果的因素較多，如標(biāo)本的采集，運(yùn)送時(shí)間，存放時(shí)間和溫度，離心轉(zhuǎn)數(shù)和離心時(shí)間，操作方法等。本文采用40份健康者的血液標(biāo)本在不同離心力的條件下取血漿進(jìn)行血凝四項(xiàng)的測(cè)定。對(duì)比分析不同離心力對(duì)血凝測(cè)定的影響。

1.材料與方法

1.1 一般材料

篩選本院2017年5月6號(hào)送檢的體檢健康者血標(biāo)本40份，所選體檢者身體各項(xiàng)指標(biāo)均正常，無(wú)肝臟疾病病史，無(wú)血栓性疾病，采集標(biāo)本前一周停止服用任何影響止凝血實(shí)驗(yàn)的藥物，且標(biāo)本均無(wú)溶血，脂血及黃疸等異?，F(xiàn)象。

1.2 儀器與試劑

采用低速大容量離心機(jī)，所選儀器為希森美康CS-2000i凝血分析儀，試劑為希森美康配套試劑。

1.3 方法

1.3.1 標(biāo)本采集 室溫下用血凝專用[1]（109mmol/L枸櫞酸鈉抗凝，標(biāo)本：抗凝劑為9:1）真空管采集40個(gè)體檢健康者血樣本，每人3管，每管各2毫升，充分混勻，并及時(shí)送檢。

1.3.2 標(biāo)本處理 將血標(biāo)本分三組分別在800rpm、1500rpm和3000rpm三個(gè)離心力下離心10min，然后在各離心力階段取血漿用于PT、APTT、TT和FIB四項(xiàng)的檢測(cè)。

1.3.3 標(biāo)本檢測(cè) 實(shí)驗(yàn)前做好質(zhì)控，三組標(biāo)本用希森美康CS-2000i凝血分析儀檢測(cè)PT、APTT、TT、FIB，標(biāo)本采集、送檢到測(cè)定需在2h內(nèi)完成。以上操作均嚴(yán)格按照儀器說(shuō)明書(shū)，試劑盒說(shuō)明書(shū)及臨床操作規(guī)程執(zhí)行。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

本次結(jié)果均以組間比較進(jìn)行組間配對(duì)t檢驗(yàn)。

2.結(jié)果

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，3000rpm離心10min（對(duì)照組）組與800rpm組檢測(cè)結(jié)果比較，TT、FIB受影響不大，PATT、PT受影響較大，存在顯著差異，(P＜0.05)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而與1500rpm組的檢測(cè)結(jié)果比較，凝血四項(xiàng)偏差較小，（P＞0.05）不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見(jiàn)下表。

表 不同離心條件下凝血四項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果

3.討論

通過(guò)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，血凝標(biāo)本在三種不同離心條件下測(cè)定PT和APTT結(jié)果差異較明顯，以離心力3000rpm作為對(duì)照組，分別與離心力800rpm和1500rpm兩組結(jié)果比較均存在一定偏差，其中PT、APTT兩項(xiàng)在相對(duì)離心力800rpm離心10min時(shí)檢測(cè)時(shí)間明顯縮短，而在相對(duì)離心力1500rpm時(shí)測(cè)定結(jié)果差異較小。由此可見(jiàn)不同離心力對(duì)血凝四項(xiàng)測(cè)定存在的影響，血凝標(biāo)本離心時(shí)使用低轉(zhuǎn)速分離血漿會(huì)造成PT、APTT檢測(cè)結(jié)果縮短，且APTT縮短較明顯。

各檢測(cè)項(xiàng)目對(duì)血液標(biāo)本離心力要求各不相同，不同的離心力對(duì)血液成分分離有著不同影響。因此要根據(jù)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目來(lái)選擇離心力，血凝測(cè)定對(duì)離心力的要求是須避免離心速度過(guò)高而破壞血細(xì)胞產(chǎn)生溶血血漿及離心速度過(guò)低而分離出富含血小板的血漿對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響。一般APTT對(duì)血漿的要求是貧血小板PLT＜10000/μL血漿，PT要求則低些，TT未見(jiàn)要求離心條件。當(dāng)?shù)退匐x心時(shí)，血漿分離不充分，導(dǎo)致血漿中還有部分血小板殘存[2]。由于血小板暴露大量磷脂表面為內(nèi)外源性凝血途徑提供凝血分子復(fù)合物反應(yīng)的催化場(chǎng)所,增進(jìn)凝血酶和纖維蛋白的形成，釋放凝血因子Ⅴ和纖維蛋白原等均能加速凝血。PT檢測(cè)反映的是外源性凝血途徑功能，APTT檢測(cè)反映內(nèi)源性凝血途徑功能。TT檢測(cè)反映的是共同凝血途徑，測(cè)定時(shí)直接加入外源性凝血酶使纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白，F(xiàn)IB檢測(cè)的是纖維蛋白原的含量，檢測(cè)時(shí)也須加入外源性凝血酶，所以低速離心（離心速度＜1500rpm）分離出殘存較多血小板的血漿會(huì)使PT、APTT檢測(cè)時(shí)間明顯縮短，而TT、FIB檢測(cè)所受影響較小。APTT涉及接觸因子到纖維蛋白形成，比其他試驗(yàn)影響因素更多，須嚴(yán)格控制血漿樣本，離心速度可能對(duì)內(nèi)源性凝血功能檢測(cè)結(jié)果影響更大些。

為提高實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)的準(zhǔn)確性，我們應(yīng)該重視實(shí)驗(yàn)標(biāo)本的前處理。此次實(shí)驗(yàn)表明：室溫下，應(yīng)以離心力3000rpm，離心時(shí)間≥10min，為血凝測(cè)定的最佳離心條件[3]。各醫(yī)院實(shí)驗(yàn)室所使用血凝分析儀及試劑不盡相同，所要求的離心力也不同，建議根據(jù)臨床操作規(guī)程及試劑說(shuō)明書(shū)在檢測(cè)時(shí)考慮以適宜APTT檢測(cè)的離心力為準(zhǔn)，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，提高檢驗(yàn)質(zhì)量，為臨床診療提供準(zhǔn)確數(shù)據(jù)。

[1]王秀明，李志武，孫冀兵，張輝，韓穎.血凝四項(xiàng)檢測(cè)分析前標(biāo)本采集及影響因素[J].河北醫(yī)藥，2013.35(7):14.

[2]費(fèi)亞濤，陳廣鳳.標(biāo)本的分離條件對(duì)PT及APTT的測(cè)定值的影響[J].國(guó)際醫(yī)藥衛(wèi)生導(dǎo)報(bào)，2014，6.

[3]盧淑蘭，王玉紅，程樹(shù)杰.關(guān)于血凝組合項(xiàng)目離心要求的探討[J].中外醫(yī)學(xué)研究，2011，13.