2013—2015年晉江市肺結(jié)核患者結(jié)核桿菌培養(yǎng)結(jié)果分析

詹虎 蔡燕瑜 許雅輝 邱世惠

（福建省晉江市疾病預(yù)防控制中心 福建 晉江 362200）

結(jié)核病是由結(jié)核分枝桿菌感染引起的慢性傳染病，是當(dāng)今世界危害人類安全的重大疾病之一。據(jù)世界衛(wèi)生組織評(píng)估，每年約有870萬(wàn)例新發(fā)肺結(jié)核患者，中國(guó)是世界22個(gè)結(jié)核病高負(fù)擔(dān)國(guó)家之一，每年新患者數(shù)僅次于印度，位居世界第二位[1]。一個(gè)世紀(jì)以來(lái)，人類在結(jié)核病的防治上做了大量工作，有效遏制了肺結(jié)核的傳播。但是隨著耐藥結(jié)核病例的出現(xiàn)，國(guó)內(nèi)結(jié)核病的防控面臨著巨大的挑戰(zhàn)。2012年以后，晉江市疾病預(yù)防控制中心開(kāi)展了結(jié)核桿菌的培養(yǎng)工作。本文對(duì)2013年1月—2015年12月期間在晉江市疾病預(yù)防控制中心培養(yǎng)的440例結(jié)核桿菌進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，了解晉江地區(qū)結(jié)核桿菌培養(yǎng)結(jié)果。

1.材料與方法

1.1 材料

泉州市疾病預(yù)防控制中心統(tǒng)一發(fā)放的珠海BASO生物技術(shù)公司的“萋-尼”抗酸染色試劑盒與改良酸性羅氏培養(yǎng)基。

1.2 標(biāo)本來(lái)源

2013年1月—2015年12月在晉江市疾病預(yù)防控制中心結(jié)防科就診的疑似結(jié)核病人，初診病人取3份痰標(biāo)本（即時(shí)痰、夜間痰和清晨痰），復(fù)診病人取2份痰標(biāo)本（夜間痰和清晨痰）。每份痰標(biāo)本為3～5ml，用“萋-尼”抗酸染色法進(jìn)行染色鏡檢，陽(yáng)性標(biāo)本按照分類納入痰培養(yǎng)對(duì)象。具體分類如下：

1.2.1 新患者從未應(yīng)用過(guò)抗結(jié)核藥物治療或者應(yīng)用抗結(jié)核藥物治療不足1個(gè)月的新病人。

1.2.2 復(fù)發(fā) 過(guò)去明確診斷肺結(jié)核，完成規(guī)定的治療療程后，醫(yī)生診斷已治愈，現(xiàn)痰涂片又出現(xiàn)陽(yáng)性的肺結(jié)核患者。

1.2.3 返回 已確診的患者治療≥1個(gè)月，中斷治療≥2個(gè)月后，再次到結(jié)防機(jī)構(gòu)接受治療的患者。

1.2.4 初治失敗 新涂陽(yáng)患者治療第5個(gè)月末或者療程結(jié)束時(shí)，痰涂片檢查仍是陽(yáng)性的患者。

1.2.5 復(fù)治失敗 復(fù)治第5個(gè)月末或者療程結(jié)束時(shí)，痰涂片檢查陽(yáng)性的患者。

1.2.6 初治2月末或3月末陽(yáng)性患者新涂陽(yáng)患者治療第2月或3月末，痰涂片檢查陽(yáng)性。

1.3 痰培養(yǎng)方法

選擇痰涂片陽(yáng)性級(jí)別高的2份標(biāo)本進(jìn)行培養(yǎng)，方法是改良

與即刻檢測(cè)結(jié)果相比，室溫放置1h、即刻分離血清后-20℃冷凍24、72h后血清LDH、FFA、m-AST水平變化不明顯，組間差異不顯著（P＞0.05）；2～8℃冷藏過(guò)夜、室溫放置3、6h、室溫放置6h再-20℃冷凍24、72h血清LDH、FFA水平均升高，血清m-AST水平降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表。羅氏培養(yǎng)基培養(yǎng)法[2]。培養(yǎng)基采購(gòu)于珠海BASO生物技術(shù)有限公司，由泉州市疾病預(yù)防控制中心驗(yàn)收合格后統(tǒng)一發(fā)放。

1.4 質(zhì)量控制

痰涂片質(zhì)控按照《中國(guó)結(jié)核病防治規(guī)劃痰涂片鏡檢標(biāo)準(zhǔn)化操作及質(zhì)量保證手冊(cè)》[3]進(jìn)行，痰培養(yǎng)新患者的涂陽(yáng)培陰率＜10%，培養(yǎng)污染率＜5%。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

應(yīng)用SPSS13.0 for windows軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析，對(duì)結(jié)果進(jìn)行χ2檢驗(yàn)，取P＜0.025為統(tǒng)計(jì)學(xué)有顯著差異。

2.結(jié)果

自2013年1月—2015年12月，晉江市疾控中心共培養(yǎng)440例，培養(yǎng)陽(yáng)性318例，陰性122例，污染0例，總體培養(yǎng)陽(yáng)性率為72.27%。每例標(biāo)本各接種4管，總共1760管，污染16管，污染率為0.91%。新患者和復(fù)發(fā)的培養(yǎng)陽(yáng)性率分別為95.57%和87.37% ，二者比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=6.28，P＜0.025）。初治失敗和初治2/3月末陽(yáng)性人群的培養(yǎng)陽(yáng)性率是53.49%、41.13%，二者無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=2.04，0.1＜P＜0.25）。把返回和復(fù)治失敗患者合二為一，與復(fù)發(fā)人群相比，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.19，P＞0.5）。具體結(jié)果見(jiàn)表。

表 不同分類患者培養(yǎng)結(jié)果

3.討論

從本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果來(lái)看，新患者的培養(yǎng)陽(yáng)性率高于復(fù)發(fā)患者，且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，證明新患者的菌株很容易在羅氏培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，但復(fù)發(fā)患者，由于之前接受過(guò)抗結(jié)核治療，導(dǎo)致有些菌株是死菌，或者菌株的活性低，具體表現(xiàn)為涂片陽(yáng)性、培養(yǎng)陰性。新患者有6例培養(yǎng)陰性，陰性率4.03%，低于質(zhì)控要求的10%，高于黃曉偉[4]等報(bào)道的泉州地區(qū)的3.05%，可能與實(shí)驗(yàn)者的操作習(xí)慣有關(guān)，如前處理加入NaOH過(guò)多，或者前處理時(shí)間過(guò)長(zhǎng)等，致使菌株不容易存活。初治失敗和初治2/3月末陽(yáng)性的患者培養(yǎng)陽(yáng)性率比較低，推測(cè)抗結(jié)核藥物的使用，使化療患者痰標(biāo)本的活力低，導(dǎo)致涂片陽(yáng)性培養(yǎng)陰性和陽(yáng)性生長(zhǎng)時(shí)間滯后[5]。返回和復(fù)治失敗者，與復(fù)發(fā)患者一樣，由于已經(jīng)服用抗結(jié)核藥，所以培養(yǎng)陽(yáng)性率，一般都低于新患者。

本次實(shí)驗(yàn)污染0例，有16管污染，因此以后的實(shí)驗(yàn)中，還需要更加嚴(yán)格操作，合理安排同批次的標(biāo)本，嚴(yán)格控制NaOH的量和前處理時(shí)間。

在以后的痰培養(yǎng)工作中，還需加強(qiáng)醫(yī)生與就診病人的溝通，特別是“初治失敗”和“初治2/3月末陽(yáng)性”患者，指導(dǎo)留取合格的痰標(biāo)本[6]。同時(shí)，未使用完的痰標(biāo)本及時(shí)冷凍保存，出現(xiàn)陰性或者污染時(shí)再次培養(yǎng)，提高培養(yǎng)陽(yáng)性率。

[1] World Health Organization.Global tuberculosis report 2012 [R].Geneva:World Health Organization,2012:11.

[2]中國(guó)防癆協(xié)會(huì)基礎(chǔ)專業(yè)委員會(huì).結(jié)核病診斷實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)規(guī)程[M].北京:中國(guó)教育文化出版社，2006:33-37.

[3]中國(guó)疾病預(yù)防控制中心.中國(guó)結(jié)核病防治規(guī)劃痰涂片鏡檢標(biāo)準(zhǔn)化操作及質(zhì)量保證手冊(cè)[M].北京:中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)出版社，2009:7-34.

[4]黃曉偉，吳艷紅.878例肺結(jié)核患者痰培養(yǎng)結(jié)果分析[J].現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2016，43(8):762-764.

[5]嚴(yán)碧涯.結(jié)核病學(xué)[M].北京:北京出版社，2003:14.

[6]李永紅.痰培養(yǎng)標(biāo)本不合格原因分析及對(duì)策[J].現(xiàn)代臨床護(hù)理，2014，13(5):21-23.