對話徐宏軍博士：搞科研如同在跑馬拉松

本刊編輯/薛惠莉

走上科研道路是順理成章的事

本刊：據(jù)了解，徐博士一直致力于豬用疫苗的研究，從事這樣一份工作您認(rèn)為最大的樂趣是什么？在最初的時(shí)候是怎么走上疫苗研發(fā)這條道路的，會不會感覺研發(fā)工作很枯燥很無聊？

徐宏軍：我個人比較喜歡技術(shù)研究工作，在大學(xué)和研究生學(xué)習(xí)階段就讀的是獸醫(yī)學(xué)、免疫微生物和傳染病相關(guān)技術(shù)領(lǐng)域，畢業(yè)后也一直在國內(nèi)動物疫苗制造企業(yè)工作，從事動物用生物制品的研究開發(fā)、工藝升級、品質(zhì)提升工作就自然而然了。目前從事動物疫苗的研發(fā)工作也有15年的時(shí)間了，最大的樂趣在于可以在動物疫苗技術(shù)創(chuàng)新與生產(chǎn)實(shí)踐的交匯點(diǎn)上實(shí)現(xiàn)一些新的、有實(shí)際意義和應(yīng)用價(jià)值的技術(shù)突破，比如病毒抗原的細(xì)胞懸浮培養(yǎng)工藝、抗原工業(yè)化純化工藝、耐熱凍干工藝的開發(fā)等等。這些技術(shù)上的突破可以從一些點(diǎn)或面上改變我國動物疫苗生產(chǎn)技術(shù)與工藝現(xiàn)狀，提升動物疫苗制造的質(zhì)量和效率，為養(yǎng)殖戶的疫病防控提供更好、更有效的疫苗產(chǎn)品的同時(shí)，也能促進(jìn)我國動物疫苗產(chǎn)業(yè)的發(fā)展和技術(shù)進(jìn)步。不但沒有感覺到枯燥和無聊，反而比起剛剛進(jìn)入這個行業(yè)從事研發(fā)工作之初，更覺得這個領(lǐng)域的樂趣、挑戰(zhàn)和新奇，發(fā)現(xiàn)了更多的現(xiàn)存的可以通過技術(shù)創(chuàng)新來解決的生產(chǎn)實(shí)踐中的問題。比如：我國動物疫苗的臨床免疫副反應(yīng)發(fā)生率相對較高，活疫苗的保存條件高，產(chǎn)品劑型不能差異化等等問題。都需要進(jìn)一步的改善和解決并與國際接軌。同時(shí)新技術(shù)、新疫病變化的出現(xiàn)也給當(dāng)前的動物疫苗產(chǎn)業(yè)提出更多的要求和挑戰(zhàn)。任重而道遠(yuǎn)，時(shí)不我待，路漫漫其修遠(yuǎn)兮，吾將上下而求索！

疫苗的研發(fā)需要不斷攻克，不斷創(chuàng)新

本刊：目前市場上疫苗種類較多，按照所含病原不同主要可以分為基因工程疫苗和全病毒疫苗。您認(rèn)為我國目前基因工程苗的研發(fā)技術(shù)是否已經(jīng)成熟？主要存在的困難有哪些？

徐宏軍：隨著DNA重組技術(shù)的出現(xiàn)和快速發(fā)展，基因工程疫苗作為一種嶄新的疫苗，為疫苗技術(shù)的發(fā)展帶來了新的突破。基因工程疫苗包括亞單位疫苗、重組活載體疫苗、核酸疫苗等，因?yàn)榛蚬こ桃呙绯ゲ≡w中無效和致病成分，只保留能引物免疫保護(hù)的成分，具有安全穩(wěn)定、能產(chǎn)生良好的保護(hù)性免疫反應(yīng)，成本低的優(yōu)點(diǎn)。原核表達(dá)系統(tǒng)是目前掌握的比較成熟的表達(dá)系統(tǒng)，但原核表達(dá)系統(tǒng)缺少像真核表達(dá)系統(tǒng)那樣的重組蛋白表達(dá)后的修飾能力，不能產(chǎn)生正確的二硫鍵，表達(dá)的重組蛋白的可溶性較差，在表達(dá)重組蛋白的過程中會產(chǎn)生脂多糖或內(nèi)毒素成分。因此如何利用大腸桿菌進(jìn)行顆粒性抗原的表達(dá)和組裝是難題之一。

再比如現(xiàn)在病毒樣顆粒疫苗（VLPs疫苗）是一種新興的疫苗，它是亞單位苗的一種，VLPs作為傳染病和非傳染病疫苗的候選具有極大的優(yōu)勢。VLPs在沒有傳統(tǒng)免疫佐劑的存在下自身即可激發(fā)有效的免疫應(yīng)答。VLPs具有和宿主細(xì)胞天然的親和能力，具有細(xì)胞靶向作用的潛能。迄今，雖然已經(jīng)有數(shù)十種的VLPs在實(shí)驗(yàn)室中成功制備，但只有極少數(shù)能夠在疫苗中取得突破，獲得合適的放大制備工藝、組裝工藝和制劑工藝組合是目前阻礙其發(fā)展的重要原因。

總體而言，我國目前基因工程疫苗的研發(fā)技術(shù)已經(jīng)比較成熟，并且在個別產(chǎn)品上體現(xiàn)出了較大的優(yōu)勢，代表了疫苗技術(shù)的未來發(fā)展趨勢。但同時(shí)也存在很多需要進(jìn)一步攻克和解決的技術(shù)難點(diǎn)。比如：表達(dá)后的蛋白高級結(jié)構(gòu)的改變，免疫原性的缺失或降低，下游工藝技術(shù)的提升等等。

本刊：目前對基因工程疫苗的研發(fā)投入增加，全病毒疫苗相比基因工程疫苗來說有什么優(yōu)勢和劣勢？

徐宏軍：全病毒疫苗包括滅活疫苗和弱毒活疫苗。是指利用人工變異或從自然界篩選獲得的減毒或無毒的活的病原微生物制成的制劑或者用理化方法將病原微生物殺死制備的生物制劑，用于人工免疫以保護(hù)人或動物產(chǎn)生免疫力。先來說一下活疫苗，活疫苗的免疫效果好，接種后在動物體內(nèi)有一定的生長繁殖能力，機(jī)體猶如發(fā)生一次輕微的感染，所以活疫苗用量較少，而機(jī)體獲得的免疫力比較堅(jiān)強(qiáng)而持久；接種途徑比較多，像滴鼻、點(diǎn)眼、飲水、口服和噴霧等途徑都可以。一般來說活疫苗弱毒株的遺傳性狀比較穩(wěn)定，但由于反復(fù)接種傳代，也可能會出現(xiàn)病毒毒力返強(qiáng)現(xiàn)象，造成產(chǎn)品不安全。滅活疫苗是選用免疫性良好的病原微生物經(jīng)人工培養(yǎng)后，用物理或化學(xué)方法將其滅活，使其傳染因子被破壞而仍保留其免疫原性所制成的疫苗，它的優(yōu)點(diǎn)就是安全性能好，不會存在散毒和毒力返強(qiáng)的危害，缺點(diǎn)是接種途徑較少，主要通過皮下或肌肉注射進(jìn)行，產(chǎn)生免疫保護(hù)需要的時(shí)間長，通常在2～3周才能產(chǎn)生免疫力，不適于作緊急接種。

基因工程疫苗上一個問題已經(jīng)簡單介紹了它的優(yōu)點(diǎn)，比如產(chǎn)量高、成本低，可以大批生產(chǎn)、安全性高等，但是也存在缺點(diǎn)，比如免疫效果較差，像亞單位疫苗的抗原決定簇種類較為單一，不能誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生針對所有抗原表位的抗體，降低免疫效果；對于基因工程載體疫苗來說，如果已經(jīng)人工或自然免疫載體微生物，由于載體抗體的存在，會導(dǎo)致疫苗免疫失敗。再比如核酸疫苗可能會具有潛在的致癌風(fēng)險(xiǎn)。

總體而言，基因工程疫苗是發(fā)展趨勢，目前尚不能完全替代全病毒疫苗。

本刊：目前國內(nèi)豬場用聯(lián)苗的多還是用單苗的多？這兩類疫苗哪個更安全些？

徐宏軍：首先疫苗屬于生物制劑的一種，國家對疫苗的管控是非常嚴(yán)格的，不管是單苗還是聯(lián)苗都必須通過農(nóng)業(yè)部的審批檢驗(yàn)后才能夠進(jìn)入市場銷售，正規(guī)途徑銷售的疫苗是安全可以放心使用的。

多聯(lián)苗可以用于無法確定確切病原的傳染病，也可作為同時(shí)預(yù)防多種傳染病的一種簡便方法。有些人擔(dān)心給動物注射混合抗原疫苗可能存在抗原間的競爭，降低保護(hù)作用或增加不良反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)，但這是缺乏事實(shí)依據(jù)的。在國家最初審批疫苗時(shí)，會要求多聯(lián)苗中每一種的免疫效果不低于該成分的單苗效果，其次多聯(lián)苗可以避免對動物多次注射造成更多的動物應(yīng)激及注射反應(yīng)，減少動物痛苦。所以多聯(lián)疫苗的研發(fā)越來越多，其免疫效果也確實(shí)是很有保障的。

當(dāng)然，在某些特定的情況下，由于免疫環(huán)境的需要，有的是需要單苗的。比如在某一種疾病污染環(huán)境中的動物，免疫此種疾病的單苗能給予動物更好的保護(hù)。所以在聯(lián)苗和單苗的使用中要視免疫環(huán)境等因素具體情況而定。從安全的角度看，聯(lián)苗和單苗并無本質(zhì)上的差異，優(yōu)劣主要看免疫效果。

蔚藍(lán)生物技術(shù)聯(lián)合升級促進(jìn)產(chǎn)品品質(zhì)提升

本刊：目前蔚藍(lán)生物覆蓋了哪些豬用產(chǎn)品？在2018年，蔚藍(lán)生物有哪些豬用新產(chǎn)品上市？

徐宏軍：蔚藍(lán)生物的豬用病毒類疫病疫苗產(chǎn)品主要有豬瘟活疫苗（瘟易清）、豬偽狂犬病活疫苗（偽易凈）、豬圓環(huán)病毒滅活疫苗（助圓康）等。豬用細(xì)菌類疫病疫苗產(chǎn)品主要有豬多殺性巴氏桿菌病活疫苗、豬敗血性鏈球菌病活疫苗、仔豬副傷寒活疫苗等。蔚藍(lán)生物豬用疫苗產(chǎn)品均在2016-2017年間通過多項(xiàng)技術(shù)的聯(lián)合升級（懸浮培養(yǎng)工藝、抗原深度純化、定量檢測技術(shù)、耐熱保護(hù)技術(shù)等）實(shí)現(xiàn)了產(chǎn)品品質(zhì)的革命性提升。產(chǎn)品內(nèi)控質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)已經(jīng)遠(yuǎn)高于國家標(biāo)準(zhǔn)，抗原含量、雜蛋白含量，內(nèi)毒素殘留量、耐老化能力等多項(xiàng)產(chǎn)品質(zhì)量指標(biāo)已能與部分進(jìn)口同類產(chǎn)品媲美，獲得了較好的市場認(rèn)可和較高的行業(yè)影響力。

2018年我們會有豬流行性腹瀉—傳染性胃腸炎二聯(lián)滅活疫苗（助腹康）的上市以及一些耐熱保護(hù)劑產(chǎn)品和純化疫苗產(chǎn)品的上市。

豬流行性腹瀉—傳染性胃腸炎二聯(lián)滅活疫苗已經(jīng)獲得獸藥產(chǎn)品批準(zhǔn)文號，該產(chǎn)品是轉(zhuǎn)讓中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所的產(chǎn)品，經(jīng)過了多年的臨床應(yīng)用實(shí)踐，安全性和效力均有很好的驗(yàn)證。半成品抗原含量可達(dá)108．0TCID50/0．1 mL，接種 2 周后可產(chǎn)生保護(hù)水平的抗體，豬只免疫攻毒均可達(dá)90%以上保護(hù)。在此基礎(chǔ)上，我們也根據(jù)現(xiàn)有的疾病流行情況，對產(chǎn)品進(jìn)行了改良，可以保護(hù)現(xiàn)有的流行毒株。

耐熱保護(hù)劑的系列產(chǎn)品我們會采用無明膠無蛋白的耐熱保護(hù)劑新配方，可在2～8 ℃保存，便于運(yùn)輸，避免因運(yùn)輸溫度導(dǎo)致疫苗效價(jià)的下降，無蛋白源可避免蛋白對豬產(chǎn)生的免疫副反應(yīng)。

純化疫苗是我們在現(xiàn)有疫苗的基礎(chǔ)上，采用先進(jìn)的純化工藝對抗原進(jìn)行純化，具有更高的截留率和更低的殘留，去除未溶解顆粒、細(xì)胞碎片等雜蛋白，去除率可以達(dá)到90%以上，減少臨床副反應(yīng)，使用更安全，并且可以提高疫苗中的病毒含量。

后記：在與徐博士的接觸過程中，了解到他不僅熱衷于科研，工作之余對運(yùn)動也情有獨(dú)鐘，夏季喜歡打乒乓球，冬季樂于滑冰，他說，只有身體更加強(qiáng)健，才能更好地投入事業(yè)和家庭。

2018年是新的開始，在新的里程起點(diǎn)，感受收獲的同時(shí)，也要迎接新的挑戰(zhàn)，承擔(dān)更大的責(zé)任，新的一年，蔚藍(lán)生物幾個重量級的新產(chǎn)品開發(fā)項(xiàng)目已經(jīng)展開，新的產(chǎn)品工藝將對現(xiàn)有疫苗行業(yè)形成顛覆，新的疫病組合的疫苗也是國內(nèi)前所未有，技術(shù)難度和工作量都極大，所以，2018年蔚藍(lán)生物必會實(shí)現(xiàn)疫苗產(chǎn)品研發(fā)技術(shù)上的重量級突破，為行業(yè)帶來更為優(yōu)質(zhì)、安全和有效的新產(chǎn)品！