生物制劑HY01對黃瓜苗期病害防治及生長的影響

忻雅+趙麗+裘劼人

摘要：研究了生物制劑HY01對黃瓜（Cucumis sativus L.）苗期猝倒病和立枯病的防治效果。結(jié)果表明，處理后黃瓜苗期猝倒病發(fā)病率降低94.8%，立枯病發(fā)病率降低92.7%，效果顯著高于農(nóng)藥處理；黃瓜苗植株和根系生長指標都高于清水對照和化學(xué)農(nóng)藥處理，其中株高、主根長度和根須數(shù)的增加達到了顯著水平。室內(nèi)毒力測定結(jié)果表明，生物制劑 HY01只有微弱的抑菌效果，不足以在田間產(chǎn)生殺菌作用。表明生物制劑HY01通過誘導(dǎo)植物抗性顯著提高黃瓜苗期的抗病性，同時也有明顯的促生長作用。

關(guān)鍵詞：生物制劑；黃瓜（Cucumis sativus L.）幼苗；猝倒?。涣⒖莶?；毒力測定

中圖分類號：S482.2+92 文獻標識碼：A 文章編號：0439-8114（2018）02-0061-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2018.02.015

Abstract： The effects of biological agent HY01 on seedling main diseases of cucumber（Cucumis sativus L.） was investigated. The results showed that the incidence of seedling damping-off and rhizoetonia rot was reduced by 94.8% and 92.7%，respectively，which were significantly higher than that of chemical fungicide treatment. Compared to the water control and chemical fungicide，some index including plant height，root length and root number of seedlings cucumber were significantly increased. Laboratory toxicity test showed that HY01 had only weak antibacterial effect and not enough to produce bactericidal effect in the field. it was suggested that biological agent HY01 significantly improved the disease resistance of cucumber seedling by inducing plant resistance，and also had obvious effect of promoting plant growth.

Key words： biological agent； cucumber（Cucumis sativus L.） seedling； damping-off； rhizoetonia rot； toxic test

黃瓜（Cucumis sativus L.）在整個生育過程中會遭受多種病原菌危害，其中猝倒病和立枯病為冬春季黃瓜苗期主要病害。引起黃瓜猝倒病的病原多為瓜果腐霉菌（Pythium aphanidermatum），屬鞭毛菌亞門。黃瓜立枯病病原為立枯絲核菌（Rhizoctonia solani），屬半知菌亞門。這兩種病原菌都可在土壤、病株殘體中長期存活或越冬。生產(chǎn)中大多采用種子和床土消毒等物理法或用多菌靈、代森錳鋅、惡霉靈、甲霜靈等化學(xué)農(nóng)藥來防治黃瓜猝倒病和立枯病。鑒于這些病菌已對某些化學(xué)農(nóng)藥（如瓜果腐霉菌對甲霜靈）產(chǎn)生了抗性[1]，造成用藥水平不斷提高，為免于化學(xué)殺菌劑的環(huán)境污染，篩選拮抗菌等生物防治藥劑勢在必行[2]。

研究表明，利用無毒無殘留的誘抗劑可誘使植物體內(nèi)產(chǎn)生抗病反應(yīng)，使植物獲得系統(tǒng)抗性從而免遭病害或減輕病害發(fā)生[3，4]。也有較多研究表明，各種化學(xué)或生物誘抗劑對黃瓜多種病害具有較好的防治效果[5-7]。本試驗在黃瓜育苗時用生物制劑HY01進行處理，隨后測定黃瓜苗期猝倒病、立枯病發(fā)病情況及幼苗生長情況，同時進行室內(nèi)毒力測定，從而評價分析HY01的使用效果。

1 材料與方法

1.1 材料

供試黃瓜品種為津春4號，由天津科潤農(nóng)業(yè)科技股份有限公司生產(chǎn)。生物制劑HY01為水劑，由杭州市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院生物所研制。30%多菌靈·福美雙可濕性粉劑（苗菌敵，CF）由齊齊哈爾四友化工有限公司生產(chǎn)。育苗試驗于杭州市植保土肥總站濱江試驗基地內(nèi)進行。育苗基質(zhì)為菜園土：泥炭：礱糠灰（體積比12∶15∶23），添加0.15%三元復(fù)合肥。每個育苗盤 （規(guī)格為54 cm×27 cm×6 cm）上鋪好基質(zhì)，均勻撒播100粒種子，設(shè)3次重復(fù)。

供試的瓜果腐霉菌和立枯絲核菌來自黃瓜立枯病和猝倒病發(fā)病組織，用常規(guī)組織分離法獲得，并經(jīng)過純化在PDA培養(yǎng)基上擴繁后備用。

1.2 方法

試驗設(shè)2個藥劑處理和1個清水對照（CK），藥劑為生物制劑HY01（水劑，300倍稀釋液，HY01）和化學(xué)農(nóng)藥30%多菌靈·福美雙（粉劑，600倍稀釋液，CF），每個處理設(shè)3次重復(fù)。

12月14日黃瓜播種，用上述藥劑進行澆灌后覆土蓋膜，2片真葉時再用上述藥劑噴施1次。12月23日調(diào)查猝倒病，同時測定植株株高、葉片長度、葉片寬度、根系長度、根須數(shù)等生長指標。將苗從出苗盤移至72孔穴盤（規(guī)格為54 cm×28 cm×4 cm），澆水，7 d后觀察立枯病發(fā)病情況，計算校正防效。

發(fā)病率=發(fā)病株數(shù)/總株數(shù)×100%

校正防效=（對照發(fā)病率–處理發(fā)病率）/對照發(fā)病率×100%endprint

1.3 室內(nèi)毒力測定

采用室內(nèi)離體平皿法測定生物制劑HY01和30%多菌靈·福美雙可濕性粉劑的抑菌毒力。將藥劑與PDA培養(yǎng)基配制成含有一定濃度藥液的毒性PDA平板（直徑9 cm），HY01配制成1 200、600、300、100、50倍稀釋液的培養(yǎng)基，水劑終濃度為833.3、1 666.7、3 333.3、10 000.0、20 000.0 μg/mL，30%多菌靈·福美雙可濕性粉劑的終濃度分別為10、50、100、200、400 μg/mL， 每種濃度重復(fù)3 次。采用生長速率抑制法，用打孔器在PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng)3 d的立枯絲核菌和培養(yǎng)1 d的瓜果腐霉菌菌落邊緣打取直徑0.6 cm的菌餅，接種到含不同藥劑濃度的PDA培養(yǎng)基上，每皿接一個菌餅。在25 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，立枯絲核菌培養(yǎng)5 d，瓜果腐霉菌培養(yǎng)24 h后，以十字交叉法測菌落直徑，與不添加藥液的清水對照比較計算出相對抑制百分率。用DPS軟件求出兩種藥劑對立枯絲核菌和瓜果腐霉菌的毒力回歸方程和EC50。抑制生長率=（對照菌落直徑-處理菌落直徑）/對照菌落直徑×100%。

1.4 數(shù)據(jù)分析

植株生長指標的統(tǒng)計分析、毒力回歸方程和EC50的計算用DPS軟件進行統(tǒng)計分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 生物制劑HY01對黃瓜幼苗生長的影響

從表1可以看出， 生物制劑HY01處理黃瓜幼苗后，植株和根系生長指標都高于清水對照和化學(xué)農(nóng)藥30%多菌靈·福美雙可濕性粉劑（CF）處理，其中株高、主根長和根須數(shù)的增長達到了顯著水平。葉長和葉寬也分別比清水對照提高14.7%和14.4%。表明生物制劑HY01處理能夠促進黃瓜苗植株和根系生長，從而提高苗的素質(zhì)。而化學(xué)農(nóng)藥30%多菌靈·福美雙可濕性粉劑處理效果與清水對照相當或略有提高，增加比例低于生物制劑HY01處理。

2.2 生物制劑HY01對黃瓜出苗和苗期主要病害的影響

由表2可知，生物制劑HY01處理后黃瓜的出苗率和成苗率分別比清水對照提高6.4%和12.6%，出苗和成苗能力顯著提高。而化學(xué)農(nóng)藥30%多菌靈·福美雙可濕性粉劑處理的出苗率和成苗率略高于清水對照，都低于生物制劑HY01處理。

與清水對照相比，生物制劑HY01處理后黃瓜猝倒病發(fā)病率降低了94.8%，立枯病發(fā)病率降低了92.7%，效果顯著。生物制劑HY01處理對黃瓜猝倒病和立枯病的校正防效分別為94.8%和92.7%，顯著高于化學(xué)農(nóng)藥30%多菌靈·福美雙可濕性粉劑處理的22.1%和4.2%。

2.3 室內(nèi)毒力測定

不同濃度的生物制劑HY01和化學(xué)農(nóng)藥30%多菌靈·福美雙可濕性粉劑對瓜果腐霉菌和立枯絲核菌的抑菌效果見表3。由表3可知，化學(xué)農(nóng)藥30%多菌靈·福美雙可濕性粉劑的抑菌效果好于生物制劑HY01。隨著各種藥劑濃度的增加，抑制率也隨之增加，藥劑濃度與抑制作用呈正相關(guān)。HY01田間使用濃度為3 333.3 μg/mL，該濃度下對瓜果腐霉菌和立枯絲核菌的室內(nèi)抑菌率只有37.7%和40.2%，田間噴施更沒有直接的抑菌效果。化學(xué)農(nóng)藥30%多菌靈·福美雙可濕性粉劑的田間使用濃度為1 666.7 μg/mL，而400 μg/mL的濃度下對瓜果腐霉菌和立枯絲核菌的室內(nèi)抑菌率分別為67.4%和100.0%，因此田間噴施有直接的殺菌效果。

室內(nèi)毒力測定結(jié)果見表4。由表4可知，對于瓜果腐霉菌，化學(xué)農(nóng)藥30%多菌靈·福美雙可濕性粉劑和生物制劑HY01的EC50分別為179.6和7 630.5 μg/mL，對立枯絲核菌則分別為22.9和3 347.7 μg/mL，因此化學(xué)農(nóng)藥30%多菌靈·福美雙可濕性粉劑的直接殺菌效果明顯好于生物制劑HY01。

3 小結(jié)與討論

HY01可以明顯提高黃瓜品種津研4號苗期的株高、葉長、葉寬、主根長和根須數(shù)，從而促進苗的生長。與清水和化學(xué)農(nóng)藥對照相比，HY01顯著提高了出苗率和成苗率，降低了黃瓜猝倒病和立枯病的發(fā)病率，對黃瓜猝倒病和立枯病的防效分別為94.8%和92.7%。室內(nèi)毒力測定結(jié)果表明，生物制劑HY01對瓜果腐霉菌和立枯絲核菌幾乎沒有直接的抑菌效果，而化學(xué)農(nóng)藥30%多菌靈·福美雙可濕性粉劑則有直接抑菌效果。

本研究中生物制劑HY01對黃瓜苗期猝倒病的防效高于殼聚糖[8]和生防菌株P(guān)EP66[1]，也高于生防細菌B579對黃瓜立枯病的防治效果[9]，其中生防細菌B579也有一定提高出苗率和促長的作用。與植物源誘抗劑對小麥赤霉病的抑制效果[10]相似，生物制劑HY01沒有明顯抑菌效果，但能明顯降低田間發(fā)病率。結(jié)合兩種處理的抑菌和防病效果，初步推斷生物制劑HY01的田間防效遠高于化學(xué)農(nóng)藥的主要原因在于提高了植株生長勢，同時誘導(dǎo)植物產(chǎn)生抗病的能力，而具體的作用機理則有待于進一步研究。

參考文獻：

[1] 樓兵干，張炳欣，RYDER M，等.黃瓜苗期猝倒病生物防治[J].植物保護學(xué)報，2002，29（2）：109-113.

[2] 梁建根，吳吉安，竺利紅，等.杭州地區(qū)黃瓜猝倒病菌產(chǎn)嗜鐵素拮抗菌的篩選與評價[J].中國農(nóng)學(xué)通報，2006，22（11）：318-322.

[3] 邱德文.植物免疫誘導(dǎo)劑的研究進展與應(yīng)用前景[J].中國農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報，2014，16（1）：39-45.

[4] 孫艷秋，李寶聚，陳 捷.寡聚糖與多糖混合誘導(dǎo)蔬菜抗病性的研究[J].農(nóng)藥，2005，44（2）：63-65.

[5] 于凌春，張乃琴.苯并噻二唑（BTH）誘導(dǎo)黃瓜抗蔓枯病的研究[J].江西農(nóng)業(yè)學(xué)報，2006，18（3）：119-121.

[6] 尚慶茂，張志剛.亞精胺對黃瓜幼苗灰霉病的誘抗作用[J].應(yīng)用生態(tài)學(xué)報，2008，19（4）：825-830.

[7] 劉 琴，吳毅歆，薛 原，等.一種生物誘抗劑防治黃瓜白粉病效果及對誘導(dǎo)酶的影響[J].中國農(nóng)學(xué)通報，2013，29（36）：367-371.

[8] 諶江華，陳若霞，李 斌.殼聚糖對黃瓜苗期猝倒病的防控效果[J].浙江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010（4）：846-849.

[9] 楊秀榮，王雪蓮，王 敏，等.生防細菌B579對土傳病害的防治效果及促長作用[J].中國生物防治學(xué)報，2008（增刊）：59-61.

[10] 王國平，潘川芝，任新國，等.植物源作物誘抗劑對小麥赤霉病的抑制效果[J].湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版），2001，27（1）：50-52.endprint