賈松濤,劉 煒,周婷婷,張 軍
(河南省鄭州市動物疫病預防控制中心,鄭州 450052)
豬副嗜血桿菌病是由副豬嗜血桿菌(Haemophilus parasuis,HPS)引起的一種以多發(fā)性漿膜炎和關節(jié)炎為特征的疾病。副嗜血桿菌屬革蘭氏陰性短小桿菌,形態(tài)多變,有15個以上血清型,其中血清型5、4、13最為常見(占70%以上)。該菌寄生在健康豬鼻腔等上呼吸道內(nèi),主要通過空氣直接接觸傳播,其他傳播途徑如消化道等亦可傳播。主要影響2~4周齡的豬,感染高峰為4~6周齡的豬,發(fā)病率在10%~15%,嚴重時病死率可達50%。隨著規(guī)?;B(yǎng)殖和養(yǎng)殖密度的增加,近年來,該病的發(fā)病率和死亡率均呈上升趨勢,成為危害規(guī)模化養(yǎng)豬場最嚴重的細菌性疾病之一,給養(yǎng)豬業(yè)造成巨大的經(jīng)濟損失。
2016年9月下旬,鄭州多家養(yǎng)豬場2~3月齡的豬陸續(xù)發(fā)病。通過流行病學調(diào)查發(fā)現(xiàn),急性病例多營養(yǎng)良好,發(fā)熱、體溫 41.0~42.5 ℃;精神沉郁、食欲下降或廢絕;眼結(jié)膜潮紅;痛性咳嗽;呼吸困難、呈腹式呼吸;體表皮膚發(fā)紅;耳尖、胸腹下和四肢內(nèi)側(cè)有紫斑,其中急性病例腕關節(jié)和跗關節(jié)腫脹、跛行,發(fā)病2~5 d死亡。慢性病例精神沉郁,被毛蓬亂,食欲下降,呼吸困難,腹式呼吸,臥地不愿站立,關節(jié)腫大、跛行,步態(tài)僵硬,弓腰,生長發(fā)育緩慢,有的腹瀉。
剖檢見肺臟呈纖維素性胸膜肺炎,胸腔內(nèi)有大量淡紅色液體、纖維素性滲出物及凝塊;腹腔內(nèi)有多量透明黃褐色漏出液,有的呈膠凍狀凝塊;心包膜上有奶酪樣壞死,并與心臟黏連;脾臟腫大,呈暗紅色。肝臟腫大,表面有灰白色小壞死灶。關節(jié)囊內(nèi)有黏膿性紅色滲出物,關節(jié)囊壁充血、水腫。全身淋巴結(jié)腫大,呈漿液性卡他性炎,顏色為暗紅色。
無菌取病豬肝、肺以及血液涂片,分別進行革蘭氏和美藍染色。顯微鏡下觀察有大小不等,短小桿狀、球桿形、絲狀等多種不同形態(tài)細菌。革蘭氏染色陰性,而美藍染色兩極濃染。
無菌處理病豬肺臟、淋巴結(jié)等組織,接種于含有NAD(煙酰胺酰嘌呤二核苷酸)或V因子的培養(yǎng)基上,經(jīng)37℃恒溫培養(yǎng)24~48 h后,可見一些小而透明的菌落。在鮮血瓊脂培養(yǎng)基上培養(yǎng)時沒有見到溶血環(huán)。將此菌落涂片鏡檢,形態(tài)和染色特征與直接涂片鏡檢結(jié)果相同。
處理病豬病料提取DNA,經(jīng)3次擴增,最后電泳鑒定。結(jié)果判定:陽性對照出現(xiàn)313 bp擴增帶,陰性對照無帶出現(xiàn)時,試驗結(jié)果成立。結(jié)果被檢樣品出現(xiàn)313 bp擴增帶,其中7條較亮,為陽性,有3條較弱,判定為弱陽性,其余沒有條帶定為陰性,見圖1。
圖1 NEST-PCR擴增結(jié)果
將分離純化的細菌接種于巧克力培養(yǎng)基上,劃均勻后貼藥敏紙片,37℃培養(yǎng)48 h。結(jié)果對頭孢唑啉鈉、氟苯尼考、丁胺卡那高敏;對環(huán)丙沙星、阿莫西林和氨芐西林中敏,詳見表1。
表1 HPS藥物敏感性試驗
立即隔離發(fā)病豬和疑似發(fā)病豬,肌肉注射組合藥物(干擾素+清開靈注射液+丁氨卡那+氨基比林+維生素C),連續(xù)使用5 d;對關節(jié)腫脹嚴重的豬用組合藥物(丁氨卡那+氨基比林+維生素C+地塞米松)直接注射到關節(jié)腔內(nèi),連用3 d。
在每噸飼料中添加藥物(金霉素300 g+枝原凈125 g+磺胺間甲氧嘧啶500 g+小蘇打500 g+黃芪多糖500 g),全群飼喂10 d。給豬清潔飲水,在水中加入電解多維等讓豬自由飲用。
在發(fā)病期間堅持使用復合醛消毒,1次/d,同時保持圈舍通風,適當降低飼養(yǎng)密度,減少應激。
采用以上治療措施的豬場,病豬經(jīng)治療處理后第3天明顯好轉(zhuǎn),1周后控制了疫情。
(1)豬呼吸道病綜合征(PRDC)是大中型養(yǎng)豬場臨床表現(xiàn)為肺炎的豬呼吸道疾病的總稱,在臨床上以咳嗽、呼吸困難、眼鼻分泌物增多、體溫升高、食欲不振為表征。其中副豬嗜血桿菌(HPS)作為PRDC主要的繼發(fā)細菌性病原,近年來引起的發(fā)病率越來越高,特別是在繁殖—呼吸綜合征病毒和圓環(huán)病毒2型感染后,幾乎總是伴隨著HPS的感染。長途運輸、飼料的更替、斷奶、飼養(yǎng)密度過大、圈舍潮濕等應激因素都是引起該病發(fā)病的主要原因。
(2)預防該病,一定要了解該病原菌的本質(zhì),由于該病通常是作為繼發(fā)或并發(fā)感染才發(fā)生的,常伴有支原體的混合感染。在飼料中添加針對支原體有特效的藥物組合才是預防該病的重要手段。如在仔豬斷奶后每噸飼料中添加枝原凈100 g+金霉素300 g+阿莫西250 g或枝原凈100 g+氟甲砜霉素80 g。
(3)疫苗的使用是預防副豬嗜血桿菌最為有效的方法之一。大量報道表明,通過商業(yè)疫苗接種或使用特異性滅活菌苗,可以成功地控制該病的發(fā)生,但也有使用滅活菌苗預防失敗的事例,這可能是由于病程中出現(xiàn)的菌株血清型不同而缺乏交叉保護。副豬嗜血桿菌具有明顯的地方性特征,疫苗免疫在不同的血清型之間所引起的交叉保護率很低。因此,在一個特定的地區(qū),清楚地知道流行的血清型對于有效控制該病至關重要。
副豬嗜血桿菌病的有效防制如同豬場其他任何一種疾病的防治一樣,是一項系統(tǒng)工程,需要加強主要病毒性疾病的免疫、選擇有效的藥物組合對豬群進行常規(guī)的預防保健、改善豬群飼養(yǎng)管理、重新思考并調(diào)整養(yǎng)殖模式,只有這樣,才能有使豬群穩(wěn)定生產(chǎn)并持續(xù)發(fā)展。