Betatrophin在妊娠期糖尿病血清中的表達及臨床意義

杜珂珂，徐峰，李喜梅

妊娠期糖尿病（GDM）是妊娠期間最常見的并發(fā)癥，是導(dǎo)致不良妊娠結(jié)局的主要原因之一，同時被認(rèn)為是2型糖尿病、高血壓和動脈粥樣硬化的先驅(qū)表現(xiàn)[1]。謝幸等[2]指出，隨著人們膳食結(jié)構(gòu)的變化及 GDM 診斷標(biāo)準(zhǔn)的重新設(shè)定，GDM的診斷率呈上升趨勢。目前GDM的發(fā)病機制不明，近年來發(fā)現(xiàn)脂肪、肌肉因子和肝細胞分泌因子在GDM的發(fā)生發(fā)展中起著關(guān)鍵作用，促代謝因子（Betatrophin）作為新近發(fā)現(xiàn)的在人體肝臟組織表達的因子，已有多項臨床研究表明其與代謝綜合征密切相關(guān)[3-5]，并有學(xué)者認(rèn)為Betatrophin參與了GDM的發(fā)生發(fā)展[6-7]。本研究擬選擇前瞻性病例對照研究的方法，觀察孕早期妊娠期糖尿病婦女、非糖尿病妊娠婦女及健康未孕育齡期婦女的血清Betatrophin水平，對Betatrophin與代謝指標(biāo)的相關(guān)性進行研究，并探討其對GDM的預(yù)測價值?，F(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2016年 1月至2016年12月在浙江省溫州市中心醫(yī)院產(chǎn)科門診進行定期的產(chǎn)前檢查并在本院進行分娩的孕婦作為研究對象，于孕7～13周行早期唐氏綜合征血清學(xué)篩查，同時預(yù)留空腹血標(biāo)本。根據(jù)妊娠24～28周糖耐量試驗（OGTT）的結(jié)果，孕婦的空腹，口服葡萄糖后1、2 h血糖結(jié)果中有一項超過上限值（上限值依次為5.1、10.0、8.5 mmol/L），則診斷為 GDM。采用電腦隨機數(shù)字法從診斷為GDM的孕婦的總數(shù)中選取43例作為GDM組，同時隨機選取同期匹配的糖耐量正常孕婦46例為糖耐量正常組（NGT），另外選取同期在本院體檢中心體檢的健康未孕育齡婦女37例為正常對照組（NC）組。多胎妊娠、妊娠期高血壓、糖尿病合并妊娠、患有心肝腎疾病，短期內(nèi)使用影響血糖、血脂藥物者均不納入本研究。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集 所有參與試驗的孕婦于孕7～13周清晨進行采血，要求試驗對象需空腹8～12 h，抽取肘靜脈外周血3 ml，在室溫下靜置后3 000 r/min離心20 min后，將血清置于EP管內(nèi)，保存于－80℃冰箱待檢。NC組婦女空腹8h以上體檢時抽取空腹血，血液樣本3 000 r/min離心20 min后，將血清置于EP管內(nèi),保存于－80℃冰箱備檢。

1.2.2 一般臨床資料的采集 對所有受試者首次入檢時詢問病史，記錄年齡，脫去鞋襪、身體直立測定身高、體質(zhì)量，身高精確至1 cm，體質(zhì)量精確至0.1 kg，計算體質(zhì)量指數(shù)（BMI）；GDM組與NGT組需記錄采樣孕周，孕晚期住院分娩前再次測量體質(zhì)量，計算孕期體質(zhì)量增加量，新生兒出生后記錄體質(zhì)量，精確至0.001 kg。

1.2.3 檢測方法 血清Betatrophin水平測定使用的ELISA法，試劑盒購于武漢EIAab生物科技有限公司（該試劑盒批內(nèi)和批間變異系數(shù)分別是 4.8%和7.2%）。血漿總膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、空腹血糖（FBG）采用德國西門子公司ADVIA 1650自動生化分析儀測定；空腹胰島素(FINS)采用美國雅培公司（ARCHITECT i2000SR）自動免疫分析儀測定；計算穩(wěn)態(tài)模型胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR）=FBG（mmol/L）×FINS（mU/L）/22.5。

1.3 統(tǒng)計方法 應(yīng)用SPSS18.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析。計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，多組比較采用單因素方差分析，多組間兩兩比較采用LSD-比較；兩組比較采用 檢驗。Betatrophin與糖脂代謝指標(biāo)的相關(guān)性采用Pearson相關(guān)分析。采用Logistic回歸分析方法對影響血清Betatrophin水平的相關(guān)因素進行分析測算，血清Betatrophin對GDM的發(fā)病預(yù)測分析采用曲線分析。＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 3組臨床資料比較 GDM組和NGT組年齡、BMI與NC組差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（均＞0.05）；GDM組與NGT組年齡、采樣孕周、BMI差異無統(tǒng)計學(xué)意義（均＞0.05）；GDM組孕期增加體質(zhì)量、新生兒出生體質(zhì)量高于NGT組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均＜ 0.05）。見表 1。

2.2 3組糖脂代謝指標(biāo)及血清 Betatrophin水平水平比較 GDM組及NGT組TG、TC、HDL-C及LDL-C水平均高于NC組（均＜0.05）；GDM組TG高于NGT組（＜ 0.05）；但兩組TC、HDL、LDL水平差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（均＞0.05）。GDM 組FINS、HOMA-IR高于NGT組及NC組，3組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均＜0.05），3組FBG水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義（＞ 0.05）。GDM組及NGT組血清Betatrophin水平均明顯高于NC組（均＜ 0.01）；GDM組血清Betatrophin水平顯著高于NGT組（＜0.01）。見表2。

2.3 血清Betatrophin水平與血糖、血脂、胰島素相關(guān)性分析 Betatrophin與孕期體質(zhì)量增加、TG、新生兒出生體質(zhì)量呈正相關(guān)（ =0.673、0.658、0.532，均＜0.05）；Betatrophin與 TC、HDL-C、LDL-C、FBG、FINS及HOMA-IR無明顯相關(guān)性（均＞ 0.05）。

2.4 Logistic回歸分析 以GDM為因變量，血清Betatrophin為自變量，GDM孕早期Betatrophin顯著高于非GDM孕婦，Logistic回歸分析校正孕期體質(zhì)量增加、TG、HOMA-IR、FINS的影響因素后，顯示血清Betatrophin水平是GDM獨立危險因素（：1.014；95%：1.002～1.026＜0.05）。見表3。

3 討論

表1 3組臨床資料比較

表2 3組糖脂代謝指標(biāo)及血清Betatrophin水平比較

表3 Logistic回歸分析各變量與GDM之間的相關(guān)性

圖 1 妊娠早期血清 Betatrophin水平對GDM發(fā)病預(yù)測的曲線

國內(nèi)外多項研究表明血清中 Betatrophin水平的升高與心血管疾病、糖尿病、肥胖、多囊卵巢綜合征等疾病的發(fā)病風(fēng)險增加有關(guān)[8-9]。有學(xué)者指出，與健康孕婦相比，GDM的Betatrophin水平明顯升高，產(chǎn)后Betatrophin濃度顯著下降，多變量統(tǒng)計分析GDM的狀態(tài)是Betatrophin的獨立正相關(guān)預(yù)測因素[7]。

以往關(guān)于孕期Betatrophin的研究，多選擇妊娠24～28周行糖耐量試驗同時抽取血標(biāo)本進行檢測，多項研究結(jié)果表明GDM患者外周血Betatrophin水平較糖耐量正常妊娠婦女明顯升高[7,10-12]。本研究采用前瞻性病例對照研究的方法，發(fā)現(xiàn)妊娠早期Betatrophin明顯高于非妊娠狀態(tài)，妊娠期糖尿病孕婦血清Betatrophin水平在孕7～13周已明顯高于糖耐量正常的孕婦，這表明GDM患者在妊娠早期階段血清 Betatrophin水平已顯著高于正常妊娠婦女，結(jié)合妊娠早期與妊娠中期研究結(jié)果，提示Betatrophin是GDM的重要血清標(biāo)記物。

本研究表明血清Betatrophin水平與TG呈正相關(guān)，但與其他脂代謝指標(biāo)TC、HDL、LDL無相關(guān)性。這與Trebotic等[10]及Wawrusiewicz-Kurylonek等[12]的研究結(jié)果一致，但與 Ebert等[7]及 Erol等[11]研究結(jié)論存在差異，可能與研究對象的種族、樣本的體質(zhì)量指數(shù)、樣本量大小及測定方法差異相關(guān)。本研究認(rèn)為Betatrophin水平上升與血脂變化關(guān)系密切，表明Betatrophin在脂代謝中存在一定的作用，推測 Betatrophin參與了脂代謝紊亂。Erol等[11]研究結(jié)果表明Betatrophin水平與FINS、HOMA-IR相關(guān)，但本研究未發(fā)現(xiàn)Betatrophin與FINS、HOMA-IR等指標(biāo)存在相關(guān)性。鑒于 FINS與HOMAIR僅能評價空腹?fàn)顟B(tài)下的胰島素水平和胰島素抵抗水平，故兩者無法全面地反映胰島素抵抗程度。所以需進一步采用多種及更優(yōu)指標(biāo)來評定胰島素抵抗，及其與Betatrophin的相關(guān)性，從而探討B(tài)etatrophin是否參與了胰島素抵抗。

臨床與研究資料表明即使在孕婦血糖控制良好的情況下，仍然有較高的機會分娩出大于胎齡兒及巨大兒，這說明在GDM孕婦中，除了血糖以外，胎兒的生長發(fā)育還可能與其他因素相關(guān)[13]。筆者發(fā)現(xiàn)GDM組血清Betatrophin水平明顯高于NGT組，且Betatrophin水平與新生兒出生體質(zhì)量呈正相關(guān)，提示Betatrophin與GDM發(fā)生以及子代的生長發(fā)育密切聯(lián)系，Betatrophin水平能夠間接反映胎兒生長發(fā)育狀況。

本文 Logistic回歸分析顯示血清Betatrophin水平是 GDM 獨立危險因素。本研究提示以妊娠早期血清 Betatrophin＞246.08 pg/ml作為GDM早期診斷的界點，具有一定的準(zhǔn)確性，且其靈敏度和特異度較高，陽性和陰性預(yù)測值較大，表明妊娠早期血清Betatrophin水平測定作為診斷試驗真實性較好。妊娠期婦女在臨床上診斷妊娠期糖尿病前其血清中Betatrophin水平已有變化，故通過對血清Betatrophin在孕早期的監(jiān)測，能夠?qū)DM發(fā)病的預(yù)測及預(yù)防提供有效的實驗室依據(jù)。但本文提出的參考值與陰性預(yù)測值僅通過一次的斷面研究得出，觀察對象樣本量較少，今后尚需要擴大樣本量，并進行動態(tài)觀察加以驗證。

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