腫瘤免疫細(xì)胞治療研究進(jìn)展

刁愛坡，趙 青

(天津科技大學(xué)生物工程學(xué)院，天津 300457)

惡性腫瘤是危害人類健康最嚴(yán)重的疾病之一.近年來，隨著生物技術(shù)的迅速發(fā)展，以調(diào)動機體的免疫功能來清除腫瘤微小殘留病灶或明顯抑制腫瘤細(xì)胞增殖為基礎(chǔ)的腫瘤免疫治療，已被廣泛研究和應(yīng)用于臨床并取得了一定療效，成為繼手術(shù)、放療和化療之后的又一重要的腫瘤治療手段．

腫瘤免疫治療按照治療的原理可分為非特異性免疫調(diào)節(jié)劑治療、腫瘤疫苗治療、免疫檢查點阻斷治療和免疫細(xì)胞治療．非特異性免疫調(diào)節(jié)劑治療是通過使用干擾素、白細(xì)胞介素–2(IL-2)、胸腺肽、胸腺肽α、香菇多糖、豬苓多糖、酵母多糖等增強機體免疫功能，激活機體的抗腫瘤免疫應(yīng)答[1–4]．腫瘤疫苗治療是利用腫瘤細(xì)胞或腫瘤抗原物質(zhì)誘導(dǎo)機體的特異性免疫和體液免疫，增強機體抗腫瘤能力，預(yù)防術(shù)后擴散和復(fù)發(fā)．治療腫瘤常用的腫瘤疫苗包括多肽疫苗、核酸疫苗、重組病毒疫苗、細(xì)菌疫苗、樹突細(xì)胞(dendritic cell，DC)疫苗等[5]．免疫檢查點阻斷治療是通過阻斷腫瘤微環(huán)境中的免疫抑制信號，即免疫檢查點，解除免疫細(xì)胞活性抑制，增強抗腫瘤活性．目前研究最為深入的免疫檢查點為細(xì)胞程序性死亡受體 1(programmed death 1，PD-1)/程序性死亡配體1(programmed death ligand 1，PD-L1)，以及細(xì)胞毒性淋巴T細(xì)胞抗原4(cytotoxic T-lymphocyte-associated protein 4，CTLA-4)[6–7]．免疫細(xì)胞治療(cell-mediated immunotherapy)則是通過采集人體自身免疫細(xì)胞，經(jīng)過體外修飾和培養(yǎng)，使其數(shù)量擴增成千倍增多，靶向性殺傷功能增強，然后再回輸?shù)交颊唧w內(nèi)，從而殺滅血液及組織中的腫瘤細(xì)胞．免疫細(xì)胞治療能夠靶向腫瘤細(xì)胞而不傷及正常組織細(xì)胞，并可產(chǎn)生免疫記憶，預(yù)防腫瘤復(fù)發(fā)．腫瘤免疫學(xué)研究及其臨床應(yīng)用已成為腫瘤治療研究中開展最廣泛、最深入的領(lǐng)域之一，本文僅就腫瘤免疫細(xì)胞治療中以嵌合抗原受體 T細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞以及巨噬細(xì)胞為核心的免疫細(xì)胞治療技術(shù)的研究情況進(jìn)行綜述．

1 嵌合抗原受體T細(xì)胞療法

嵌合抗原受體(chimeric antigen receptor，CAR)T細(xì)胞免疫療法是一種新型腫瘤免疫細(xì)胞療法，1989年由 Gross等[8]提出，近幾年被改良并應(yīng)用到臨床中．它是將抗原抗體的高親和性與 T淋巴細(xì)胞的殺傷作用相結(jié)合，通過構(gòu)建特異性嵌合抗原受體，經(jīng)基因轉(zhuǎn)導(dǎo)使 T淋巴細(xì)胞表達(dá)特異性嵌合抗原受體，特異性識別靶抗原從而殺傷靶細(xì)胞．目前，臨床上CAR技術(shù)在血液系統(tǒng)腫瘤和實體瘤的治療上均取得了明顯的效果．

CAR-T細(xì)胞的嵌合抗原受體的基礎(chǔ)結(jié)構(gòu)如圖 1所示，其基礎(chǔ)設(shè)計組成包括抗原結(jié)合區(qū)、跨膜區(qū)和胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)區(qū)．

圖1 嵌合抗原受體基礎(chǔ)結(jié)構(gòu)Fig. 1 Schema of chimeric antigen receptor structure

抗原結(jié)合區(qū)由單鏈抗體(single chain fragment variable，scFv)與鉸鏈區(qū)(spacer)連接形成．單鏈抗體由輕鏈可變區(qū)(VL)、重鏈可變區(qū)(VH)以及它們之間的 15個氨基酸((Gly4,Ser)3，linker)鏈接肽組成，鉸鏈區(qū)通常來源于CD8[9]或者IgG[10]．抗原結(jié)合區(qū)對特定腫瘤相關(guān)抗原(tumor associated antigen，TAA)有特異識別功能，其與 TAA間的親和力決定了 CAR-T細(xì)胞與靶細(xì)胞的結(jié)合能力[11]．跨膜區(qū)(transmembrane domain，TD)通常由同源或異源二聚體膜蛋白，如CD3、CD4、CD8、CD28組成，主要起著連接抗原結(jié)合區(qū)與胞內(nèi)信號區(qū)進(jìn)行信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的作用．胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)區(qū)主要由 T細(xì)胞受體 TCR/CD3ζ鏈、免疫球蛋白 Fc受體的 γ鏈或 CD3ε鏈構(gòu)成，通常包含免疫受體酪氨酸活化基序(immunoreceptor tyrosine_based activation motifs，ITAMs)，負(fù)責(zé)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)[12]．

自 1989年起，CAR結(jié)構(gòu)不斷改進(jìn)，目前已發(fā)展到第四代，如圖2所示．

圖2 四代CAR的嵌合受體組成Fig. 2 1st-4th generation of CARs

第一代 CAR胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)區(qū)只包含單一的TCR/CD3ζ鏈或Fc受體的γ鏈或CD3ε鏈結(jié)構(gòu)域，在體外實驗中可以識別靶抗原并有效殺傷腫瘤細(xì)胞，同時分泌 INF-γ，但是在臨床試驗中表現(xiàn)出體內(nèi)存活時間短，回輸 3周后，外周血中無法檢測到第一代CAR-T細(xì)胞[13]．第二代 CAR胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)區(qū)除了TCR/CD3ζ鏈結(jié)構(gòu)域外，串聯(lián)了一個協(xié)同刺激分子結(jié)構(gòu)域(co-simulation domain，CSD)，例如 CD27、CD28、CDl34(OX40)或 CDl37(4-1BB)等[14–15]．加入?yún)f(xié)同刺激分子后，第二代 CAR-T細(xì)胞可以分泌更多的 IL-2，細(xì)胞凋亡信號通路處于抑制狀態(tài)，抗原刺激后 CAR-T細(xì)胞大量擴增[15–16]，彌補了第一代 CAR-T細(xì)胞隨著時間延長數(shù)量減少的缺陷．其中，加入 CD28共刺激結(jié)構(gòu)域，除了增強細(xì)胞持續(xù)活化外，還有效解除了調(diào)節(jié)性 T細(xì)胞(regulatory T cells，Treg)對 CAR-T的抑制作用[17]，使第二代 CART細(xì)胞在腫瘤微環(huán)境中能夠更好地發(fā)揮殺傷功能．第三代CAR是在TCR/CD3ζ鏈結(jié)構(gòu)域的基礎(chǔ)上，同時串聯(lián)了兩個協(xié)同刺激分子結(jié)構(gòu)域，可使 T細(xì)胞持續(xù)活化增殖，細(xì)胞因子持續(xù)分泌，增強殺傷腫瘤細(xì)胞作用．體外分析二代與三代 CAR-T細(xì)胞的功能并無明顯區(qū)別，但在針對不同腫瘤類型的小鼠模型中，它們表現(xiàn)出不同的治療活性[15,18]．第四代 CAR (T cells redirected for universal cytokine killing，TRUCKs)除了嵌合抗原受體基因外，整合表達(dá)免疫因子、整合共刺激因子配體，如促炎性細(xì)胞因子白細(xì)胞介素–12(IL-12)等，成功激活 CAR的信號通路[19]. 這種被改造后的T細(xì)胞可以在CAR識別靶抗原后，通過激活下游轉(zhuǎn)錄因子 NFAT(nuclear factor activated T cells)來誘導(dǎo)表達(dá) IL-12，從而招募環(huán)境中的其他免疫細(xì)胞(樹突狀細(xì)胞、吞噬細(xì)胞和自然殺傷細(xì)胞等)，參與對不表達(dá)靶抗原的腫瘤細(xì)胞的清除．同時，被募集在腫瘤附近的免疫細(xì)胞還可以通過分泌某些細(xì)胞因子(如干擾素–γ、腫瘤壞死因子–α、IL-4和 IL-5等)來調(diào)節(jié)腫瘤附近的微環(huán)境，解除其免疫抑制性，通過調(diào)動機體自身免疫力參與對腫瘤細(xì)胞的殺傷作用．

CAR結(jié)構(gòu)基因需要借助特殊的方法整合到T細(xì)胞基因中以實現(xiàn)表達(dá)，如使用病毒載體、電穿孔、轉(zhuǎn)座子以及直接轉(zhuǎn)入 mRNA 或蛋白[20–23]．成功表達(dá)CAR的T細(xì)胞需要在體外擴增到足夠的數(shù)量才能輸入體內(nèi)產(chǎn)生治療效果．體外擴增的方法通常用抗CD3和抗 CD28抗體或是基因修飾過的表達(dá)靶抗原的抗原提呈細(xì)胞等激活 T細(xì)胞擴增．最近又有研究將一段編碼10個氨基酸的肽段基因序列作為表位標(biāo)簽添加到 CAR結(jié)合區(qū)，然后使用針對這個表位標(biāo)簽的單抗特異性選擇修飾CAR-T細(xì)胞擴增與純化[24]．

目前臨床應(yīng)用研究最為深入的代表性CAR-T療法為靶向 CD19的 CAR-T細(xì)胞免疫治療，該療法在治療兒童和成人復(fù)發(fā) B細(xì)胞急性淋巴細(xì)胞白血病(B-ALL)、慢性淋巴細(xì)胞白血病(CLL)和B細(xì)胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)方面表現(xiàn)出穩(wěn)定高效的抗腫瘤效果[25]．在各種臨床研究中，雖然 CAR的設(shè)計有所不同，但是從臨床響應(yīng)數(shù)據(jù)(表 1)中可以看出，靶向CD19的CAR-T細(xì)胞治療是復(fù)發(fā)/難治B細(xì)胞惡性腫瘤的一種非常有效的治療方法．

表1 靶向CD19的CAR-T細(xì)胞治療臨床研究情況Tab. 1 Clinical responses to CD19 CAR therapy

雖然 CAR-T療法的臨床試驗效果良好，但治療過程中也存在著潛在的毒副作用，如較為常見的發(fā)熱、皮疹、寒顫、低血壓等，嚴(yán)重時可引起細(xì)胞因子釋放綜合癥、腫瘤溶解綜合癥等[25]．因此，為提高CAR-T的有效性和安全性，一系列可控型CAR-T及其他新型基因修飾 T細(xì)胞技術(shù)應(yīng)運而生，包括嵌合共刺激受體(chimeric co-stimulating receptors，CCRs)T 細(xì)胞[34–35]、抗原特異性抑制受體(antigenspecific inhibitory receptors，iCARs)T 細(xì)胞[36]和基于Notch的合成受體(Notch-based receptors，synNotch)T細(xì)胞技術(shù)[37]等．如 Prosser等[35]將 PD-1胞外結(jié)構(gòu)域串聯(lián)CD28跨膜結(jié)構(gòu)域與胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)區(qū)，得到嵌合共刺激受體(CCR)，將T細(xì)胞中PD-1/PD-L1抑制性信號通路逆轉(zhuǎn)為共刺激信號通路，進(jìn)而加強 CCRT細(xì)胞的細(xì)胞毒性．Notch蛋白是一種參與多種有機體中細(xì)胞間通訊的蛋白質(zhì)，對正常發(fā)育至關(guān)重要，F(xiàn)edorov等[37]基于Notch蛋白研制出synNotch受體，synNotch受體一端伸出T細(xì)胞外，作為傳感器組件，特異性地識別多種不同類型的疾病信號；而另一端在細(xì)胞內(nèi)，作為效應(yīng)器組件，經(jīng)設(shè)計后能夠讓細(xì)胞執(zhí)行多種多樣的反應(yīng)．這些新技術(shù)可以更精確地調(diào)節(jié) T細(xì)胞的激活，從而降低治療風(fēng)險．

CAR-T細(xì)胞療法是當(dāng)今最先進(jìn)的腫瘤免疫細(xì)胞治療技術(shù)，在淋巴瘤中已經(jīng)取得了顯著的成果．它的出現(xiàn)使得腫瘤免疫治療進(jìn)入一個新階段，但是基于CAR的治療方法在技術(shù)和大規(guī)模臨床應(yīng)用方面仍然存在著巨大的挑戰(zhàn)．隨著對人體免疫系統(tǒng)和腫瘤免疫治療的研究更加深入，相關(guān)臨床數(shù)據(jù)不斷積累．其中：凱特制藥公司(Kite Pharma)的 CAR-T項目Axicabtagene Ciloleucel(KTE-C19)于2016年經(jīng)歐洲藥品管理局(EMA)人用醫(yī)藥產(chǎn)品委員會(CHMP)和先進(jìn)療法委員會(CAT)準(zhǔn)許，進(jìn)入新成立的重點藥物(PRIME)審批計劃．朱諾治療公司(Juno Therapeutics Inc.)CAR-T療法JCAR015在 2016年和 2017年的臨床試驗中分別導(dǎo)致 3位和 2位患者死亡，被迫叫停．2017年 8月 30日，美國 FDA批準(zhǔn)諾華(Novartis)旗下 CAR-T療法明星藥物 Tisagenlecleucel(曾用名 CTL019)上市，商品名為 Kymriah，用于治療復(fù)發(fā)/難治 25歲以下 B細(xì)胞急性淋巴性白血病(B-ALL)患者．相信 CAR-T細(xì)胞治療技術(shù)將日趨完善，并有望成為惡性腫瘤的克星，為醫(yī)學(xué)發(fā)展及人類健康作出貢獻(xiàn)．

2 自然殺傷細(xì)胞療法

自然殺傷(natural killer，NK)細(xì)胞是獨立于T、B細(xì)胞的第三類淋巴細(xì)胞亞群，屬于固有免疫細(xì)胞，是機體防御的第一道防線，不僅具有抗感染、免疫調(diào)節(jié)和抗腫瘤等多重作用，而且在某些情況下參與超敏反應(yīng)和自身免疫性疾病的發(fā)生．

NK細(xì)胞殺傷的靶細(xì)胞主要包括腫瘤細(xì)胞、病毒感染細(xì)胞、較大的病原體(如真菌和寄生蟲)、同種異體移植的器官與組織等．它無需抗原預(yù)先致敏，即可直接殺傷靶細(xì)胞，故在機體抗腫瘤、早期抗病毒或胞內(nèi)細(xì)菌感染的免疫應(yīng)答中有重要作用[38]．近幾年，隨著腫瘤分子機制的深入研究，NK細(xì)胞的抗腫瘤作用備受關(guān)注，已形成多種不同的研究方法，包括同種異體 NK細(xì)胞過繼免疫治療、清除 NK細(xì)胞的抑制因素、基因修飾NK細(xì)胞表達(dá)嵌合抗原受體(CAR)等．

NK 細(xì)胞的表型為 CD3-CD56+，主要分布于骨髓、外周血和脾臟當(dāng)中，占外周血淋巴細(xì)胞的 10%,～20%[39]．NK細(xì)胞殺傷腫瘤細(xì)胞的機制如圖 3所示.

圖3 NK細(xì)胞對腫瘤的殺傷機制Fig. 3 Mechanism of NK cell cytotoxicity

由圖 3可知，NK細(xì)胞殺傷腫瘤細(xì)胞機制包括：①穿孔素和顆粒酶介導(dǎo)的細(xì)胞毒性作用；②死亡受體介導(dǎo)的靶細(xì)胞凋亡；③分泌細(xì)胞因子促進(jìn)殺傷活性；④抗體依賴的細(xì)胞毒性作用(antibody-dependent cellmediated cytotoxicity，ADCC)[40]．NK 細(xì)胞的活性取決于其活化受體和抑制受體間的動態(tài)平衡[41–44]，其中活化受體 NKG2D(natural killer group 2,member D)、NKp30、NKp44和 NKp46為 NK 細(xì)胞的活化提供激活信號，最終引發(fā)細(xì)胞毒性和產(chǎn)生細(xì)胞因子；典型的抑制性受體為 KIR(killer inhibitory receptor，KIR)，KIR識別“自我”，隨后傳遞負(fù)調(diào)控信號，最終通過抑制信號通路來抑制 NK 細(xì)胞的活化[45]．此外，細(xì)胞因子對于 NK細(xì)胞的發(fā)育、存活和功能行駛也具有重要的調(diào)節(jié)作用，如IL-15在NK細(xì)胞發(fā)育和信號激活中發(fā)揮關(guān)鍵作用[46–47]，IL-12、IL-15和 IL-18促進(jìn) NK細(xì)胞壽命延長，且二次刺激可增強 NK細(xì)胞功能[48]．

在臨床應(yīng)用中，NK細(xì)胞過繼性治療腫瘤已取得一定的成果，但同時也存在一些缺陷，如 NK細(xì)胞的靶向性、自體移植 NK 細(xì)胞失活問題等[49]．為此，研究者開始嘗試將應(yīng)用于 T細(xì)胞的嵌合抗原受體(CAR)技術(shù)應(yīng)用于NK細(xì)胞，使NK細(xì)胞能夠特異地識別靶細(xì)胞，提高其殺傷靶細(xì)胞毒性作用，即 CARNK免疫療法．相比于 T細(xì)胞，NK細(xì)胞是一種安全的效應(yīng)細(xì)胞，它的使用能夠避免 CAR-T細(xì)胞治療中帶來的細(xì)胞因子風(fēng)暴、腫瘤溶解綜合癥等副作用，并且CAR修飾后的NK細(xì)胞與CAR-T細(xì)胞一樣，可以高效地實現(xiàn)對靶細(xì)胞的特異殺傷[50]．但研究[51]發(fā)現(xiàn)，CAR-NK細(xì)胞的轉(zhuǎn)導(dǎo)技術(shù)及其增殖能力均不及CAR-T細(xì)胞．因此，開發(fā)新一代的 CAR-NK細(xì)胞對NK細(xì)胞的過繼性治療具有重要意義．

3 巨噬細(xì)胞療法

巨噬細(xì)胞是機體固有免疫反應(yīng)的重要組分，是一類具有可塑性、異質(zhì)性的細(xì)胞群體，通過清除異常細(xì)胞保持正常組織的穩(wěn)態(tài)，在機體的非特異免疫功能中發(fā)揮重要作用[52]．

巨噬細(xì)胞可通過多途徑、多步驟發(fā)揮廣譜抗瘤作用．細(xì)菌細(xì)胞壁成分和細(xì)胞因子可以活化巨噬細(xì)胞，活化的巨噬細(xì)胞可以高效、專一地識別并裂解腫瘤細(xì)胞，包括那些對細(xì)胞毒性藥物有抗性的腫瘤細(xì)胞，但對正常細(xì)胞的損傷卻很少．巨噬細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞直接接觸 1～3,d后可分泌釋放一些細(xì)胞毒性物質(zhì)(如TNF-α、NO、絲氨酸蛋白酶、溶酶體酶、活性氧等)，可導(dǎo)致所結(jié)合的腫瘤細(xì)胞溶解或調(diào)亡，此過程緩慢并且需要細(xì)胞之間直接接觸[53]．巨噬細(xì)胞也可以通過抗體依賴的細(xì)胞毒性作用(antibody-dependent cellmediated cytotoxicity，ADCC)直接殺傷腫瘤細(xì)胞．巨噬細(xì)胞膜表面表達(dá) IgG Fc 受體(FcγRⅠ和 FcγRⅢ)，抗腫瘤抗體 Fab段與腫瘤表面抗原結(jié)合，F(xiàn)c段與巨噬細(xì)胞上IgG Fc受體結(jié)合，在與Fc受體交聯(lián)過程中巨噬細(xì)胞被活化并分泌 TNF-α、中性蛋白酶、活性氧和 IL-12等細(xì)胞溶解物質(zhì)，將腫瘤細(xì)胞溶解并吞噬[54]．活化的巨噬細(xì)胞可以處理和呈遞腫瘤抗原、激活 T細(xì)胞并刺激機體對腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生特異性免疫應(yīng)答．與T細(xì)胞相比，巨噬細(xì)胞殺傷腫瘤細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞的免疫原性、轉(zhuǎn)移潛能和對藥物的敏感性無關(guān)．因此，對于絕大多數(shù)腫瘤細(xì)胞，尤其是那些腫瘤抗原易發(fā)生變異的轉(zhuǎn)移腫瘤細(xì)胞，在體內(nèi)特異性 T細(xì)胞難以發(fā)揮效應(yīng)時，其對活化的巨噬細(xì)胞的殺傷作用卻極少出現(xiàn)抗性[55]．

在腫瘤發(fā)生初期，來自健康組織的巨噬細(xì)胞活化后可以抑制腫瘤細(xì)胞的生長，但是在腫瘤惡化階段，來自腫瘤微環(huán)境浸潤的巨噬細(xì)胞，即腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞(tumor associated macrophages，TAMs)卻促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的生長．實體腫瘤不僅包括腫瘤細(xì)胞成分，腫瘤組織當(dāng)中還有相當(dāng)多的其他非腫瘤細(xì)胞成分，這些細(xì)胞成分構(gòu)成了所謂腫瘤微環(huán)境，在腫瘤的浸潤、增殖和轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要的作用．腫瘤微環(huán)境中包含多樣細(xì)胞成分，有組織本身固有的脂肪細(xì)胞、成纖維細(xì)胞，也有血源性細(xì)胞成分，包括巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和肥大細(xì)胞等炎性細(xì)胞，這些血源性細(xì)胞在腫瘤的進(jìn)展、侵襲和轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用[56–57]．TAMs是腫瘤微環(huán)境當(dāng)中最豐富的細(xì)胞成分，在腫瘤微環(huán)境中發(fā)揮多項功能，包括分泌金屬基質(zhì)蛋白酶消化細(xì)胞外基質(zhì)促進(jìn)腫瘤細(xì)胞浸潤遷移、分泌多種生長因子及血管生成因子促進(jìn)腫瘤增殖、分泌抑制性細(xì)胞因子抑制機體腫瘤免疫等[58]．與腫瘤細(xì)胞不同的是，TAMs的基因表達(dá)更穩(wěn)定，所以采取針對巨噬細(xì)胞作為靶點治療腫瘤具有很大的可行性．此外，隨著研究的深入，研究者發(fā)現(xiàn)了 TAMs促進(jìn)腫瘤生長的調(diào)節(jié)機制，多種腫瘤細(xì)胞表面均表達(dá)一種膜糖蛋白 CD47．當(dāng) CD47與巨噬細(xì)胞的 SIRPα 和 TSP1受體分別結(jié)合后，巨噬細(xì)胞便會停止吞噬腫瘤細(xì)胞，反而促進(jìn)腫瘤的生長[59]．因此，目前研究者們正嘗試通過使用 CD47的特異性抗體激活巨噬細(xì)胞吞噬腫瘤細(xì)胞，相關(guān)研究已進(jìn)入臨床階段．

4 其他腫瘤免疫細(xì)胞療法

除了以上3種最受關(guān)注的療法外，腫瘤免疫細(xì)胞治療還涉及淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞(LAK)、腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞(tumor infiltrating lymphocyte，TIL)、樹突狀細(xì)胞(dendritic cells，DC)、細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(cytokine-induced killer，CIK)等．LAK細(xì)胞即淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞，是一類重要的細(xì)胞毒性淋巴細(xì)胞群，平時處于抑制狀態(tài)，在誘導(dǎo)因子IL-2刺激下激活增殖，對人體內(nèi)的腫瘤細(xì)胞具有很強的殺傷作用，具有廣譜高效的殺瘤效應(yīng)[60]．LAK細(xì)胞療法開發(fā)于20世紀(jì)80年代后期，經(jīng)過多年的臨床研究，目前僅作為腫瘤治療的輔助療法．

TIL細(xì)胞即腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞，是從腫瘤組織中分離出的 CD4+、CD8+,T細(xì)胞，在體外經(jīng) IL-2的刺激、活化、擴增后可應(yīng)用于臨床腫瘤過繼性細(xì)胞治療．臨床上進(jìn)行TIL 過繼性治療之前，需要對患者進(jìn)行全身放療，使患者體內(nèi)的淋巴細(xì)胞清除，同時聯(lián)合化療藥治療可提高療效[61]．

DC即樹突狀細(xì)胞，為體內(nèi)專職抗原提呈細(xì)胞，是抗微生物、腫瘤和自身抗原免疫應(yīng)答時重要的啟動子和調(diào)控子[62]．在 DC發(fā)育和發(fā)揮作用的過程中，未成熟DC具有較強的遷移能力，成熟DC能有效激活初始型 T細(xì)胞，是啟動、調(diào)控并維持免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié)．DC亞群在體內(nèi)抗腫瘤免疫應(yīng)答的動物模型中廣泛研究，DC通常在體外被分離出來，并負(fù)載腫瘤抗原，注射到同系動物中作為腫瘤疫苗[63]．

CIK細(xì)胞即細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞，是人體外周血中單個核細(xì)胞在體外經(jīng)多種細(xì)胞因子如 IL-2、CD3單抗、干擾素–1、重組人纖維蛋白等共同刺激后獲得的一群異質(zhì)細(xì)胞，具有識別、殺傷腫瘤的特性，增殖能力強，細(xì)胞毒作用強，同時也具有一定的免疫特性[64]．將CIK細(xì)胞與DC細(xì)胞在體外共同培養(yǎng)，在促進(jìn) DC細(xì)胞成熟的同時，更加強了 CIK細(xì)胞的抗腫瘤活性，即DC-CIK．DC-CIK既能凸顯出特異性的免疫殺傷，又能展現(xiàn)其強大的非特異性抗瘤效應(yīng)，除了殺瘤活性高及殺瘤范圍廣的特點外，還具有降低免疫耐受的特性，可以有效地預(yù)防某些自身免疫性疾病[65]．

5 結(jié) 語

腫瘤免疫細(xì)胞治療除了可直接發(fā)揮抗腫瘤的作用外，還可以通過糾正機體免疫功能低下，增強機體抗腫瘤細(xì)胞的免疫功能而兼顧治療與預(yù)防的雙重療效．近年來，腫瘤免疫療法研究取得了重要進(jìn)展，腫瘤免疫細(xì)胞治療受到越來越多的關(guān)注，預(yù)示著免疫細(xì)胞治療有望成為繼手術(shù)、化療、放療、靶向治療后惡性腫瘤治療領(lǐng)域的又一場革新．

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