潮霉素B預(yù)混劑的臨床驅(qū)蟲試驗(yàn)研究

費(fèi)陳忠，蘇世廣，李貴玉，許月英，吳昊，范超，肖文龍，薛飛群*

(1. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院上海獸醫(yī)研究所，上海 200241；2. 安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所，合肥 230031； 3. 浙江海正藥業(yè)有限公司，臺(tái)州 318000)

潮霉素B預(yù)混劑的臨床驅(qū)蟲試驗(yàn)研究

費(fèi)陳忠1，蘇世廣2，李貴玉3，許月英2，吳昊1，范超1，肖文龍1，薛飛群1*

(1. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院上海獸醫(yī)研究所，上海 200241；2. 安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所，合肥 230031； 3. 浙江海正藥業(yè)有限公司，臺(tái)州 318000)

為了解潮霉素B預(yù)混劑臨床驅(qū)除絳蟲線蟲的有效性和給藥時(shí)間的合理性，依據(jù)獸藥臨床試驗(yàn)規(guī)范，試驗(yàn)選擇了蠕蟲自然感染皖西麻黃雞824只，按要求隨機(jī)分為3組，分別為潮霉素B預(yù)混劑治療組284只，芬苯噠唑粉對(duì)照藥物組284只，不治療的感染對(duì)照組256只，試驗(yàn)周期根據(jù)臨床治療效果確定。結(jié)果顯示，潮霉素B預(yù)混劑，推薦劑量10 mg/kg混飼，連續(xù)飼喂21 d，對(duì)雞蛔蟲和絳蟲的粗計(jì)驅(qū)蟲率分別為63%和26%，表現(xiàn)明顯的驅(qū)除蛔蟲作用(P<0.05)，連續(xù)飼喂42 d，對(duì)雞蛔蟲和絳蟲的粗計(jì)驅(qū)蟲率分別為100%和-13%，驅(qū)蛔蟲效果極顯著(P<0.01)；對(duì)照藥物芬苯噠唑粉，50 mg/kg混飼，連續(xù)飼喂6 d，對(duì)雞蛔蟲和絳蟲的粗計(jì)驅(qū)蟲率分別為100%和44%，同樣具有極顯著的驅(qū)除蛔蟲作用(P<0.01)，本試驗(yàn)中2種藥物的驅(qū)蛔蟲效果相當(dāng)，對(duì)絳蟲的驅(qū)除作用不明顯(P>0.05)。潮霉素B預(yù)混劑10 mg/kg混飼，連續(xù)飼喂42 d，可以驅(qū)凈雞蛔蟲的感染，但對(duì)雞絳蟲感染無明顯的驅(qū)除作用。

雞蛔蟲；潮霉素B；臨床試驗(yàn)

潮霉素B 是20世紀(jì)50年代美國禮來公司研發(fā)的產(chǎn)品，美國FDA批準(zhǔn)其用于豬蛔蟲(Ascarissuum)、雞蛔蟲(Ascaridiagalli)、毛細(xì)科蠕蟲(Capillaria)、異刺線蟲(Heterakisgallinae)等的感染，其驅(qū)蟲作用機(jī)理獨(dú)特，具有療效高、殘留低、連續(xù)使用不產(chǎn)生抗藥性等優(yōu)點(diǎn)，我國曾于1993年批準(zhǔn)進(jìn)口上市，被收入99版獸藥進(jìn)口質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，其推薦使用劑量是混飼，每1000 kg飼料，雞8～12 g，肉雞和后備雞連用8周。

雞蛔蟲等感染引起的疾病是臨床常見的寄生蟲病，苯并咪唑類驅(qū)蟲藥物通常作為其一線的防治藥物[1-2]。潮霉素B預(yù)混劑是浙江海正藥業(yè)研制的新制劑，為考察該制劑在臨床使用中的驅(qū)蟲有效性和合理性，本臨床試驗(yàn)參照田間試驗(yàn)的一般要求，以糞便蠕蟲學(xué)檢查結(jié)合剖檢的方法，篩選了雞蛔蟲等自然感染嚴(yán)重的雞場(chǎng)，以芬苯噠唑粉為對(duì)照藥物，以潮霉素B驅(qū)凈蛔蟲為試驗(yàn)周期終點(diǎn)，以驗(yàn)證該制劑的臨床有效性和給藥合理性。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物和飼料 160日齡皖西麻黃雞824只，其中公雞392只，母雞432只，安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所試驗(yàn)場(chǎng)，試驗(yàn)前篩查糞樣36份，寄生蟲的蠕蟲學(xué)糞便檢查中陽性樣本34份，陽性率94%，其中蛔蟲卵陽性樣本16份，陽性率44%；現(xiàn)場(chǎng)隨機(jī)剖檢10只，確證蛔蟲感染5只，絳蟲感染4只(其中混合感染2只)，感染率70%。試驗(yàn)雞分別按皖西麻黃雞相應(yīng)生長階段的飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)飼養(yǎng)，各組試驗(yàn)雞的營養(yǎng)水平一致，飼料飼喂按照此階段平均日食量定量投放，其中公雞按每天采食125 g標(biāo)準(zhǔn)計(jì)算，母雞按每天采食100 g標(biāo)準(zhǔn)計(jì)算，試驗(yàn)過程中的全價(jià)配合飼料全部委托該試驗(yàn)場(chǎng)內(nèi)部飼料車間加工，不添加任何藥物。

1.2 試驗(yàn)藥物和分組 潮霉素B預(yù)混劑，規(guī)格：100 g∶1.76 g(176萬單位)，批號(hào)：HYGP130045；芬苯噠唑粉，規(guī)格：100 g∶5 g，批號(hào)：120802，浙江海正藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)。

試驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分成3組，潮霉素B預(yù)混劑治療組284只，其中公雞140只，母雞144只；芬苯噠唑粉對(duì)照藥物組284只，其中公雞140只，母雞144只，不作治療處理的感染對(duì)照組256只，其中公雞112只，母雞144只，見表1。

表1 臨床試驗(yàn)分組表

1.3 試驗(yàn)給藥 正式試驗(yàn)開始后，各試驗(yàn)組分別飼喂添加指定藥物的飼料，潮霉素B預(yù)混劑組，每1000 kg基礎(chǔ)全價(jià)飼料中添加該潮霉素B預(yù)混劑565 g(相當(dāng)于潮霉素B 10 g，推薦劑量范圍中值)，連續(xù)飼喂至試驗(yàn)結(jié)束；芬苯噠唑粉對(duì)照組，即每1000 kg基礎(chǔ)飼料中添加芬苯噠唑粉1 kg(相當(dāng)于芬苯噠唑50 g，推薦劑量范圍中值)，連續(xù)飼喂6 d；感染對(duì)照組，不作任何治療，正常飼養(yǎng)和管理。

1.4 試驗(yàn)方法 試驗(yàn)期間密切觀察各組試驗(yàn)動(dòng)物的飲食、糞便、藥物不良反應(yīng)及健康狀況，試驗(yàn)周期根據(jù)臨床治療效果確定；給藥后第21 d和試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，各組分別以圈舍為單位稱重，比較組間增重的變化和飼料報(bào)酬差異；潮霉素B和不給藥對(duì)照組于給藥前1 d，給藥后第14 d、21 d、35 d和42 d，分別抽檢各圈舍的新鮮糞樣，每圈3份，同時(shí)隨機(jī)剖檢試驗(yàn)雞，每圈2只；芬苯噠唑組于給藥前1 d，給藥后第14 d和21 d，分別抽檢各圈舍的新鮮糞樣，每圈3份，同時(shí)隨機(jī)剖檢試驗(yàn)雞，每圈2只。

糞便進(jìn)行蠕蟲學(xué)檢查[3]，用改良McMaster法，分別計(jì)數(shù)蛔蟲卵和絳蟲卵等，并將計(jì)數(shù)陰性的樣品轉(zhuǎn)入三角燒瓶中，用漂浮集卵法進(jìn)一步檢查并計(jì)數(shù)，結(jié)果用每1 g 糞便中蟲卵數(shù)(EPG) 表示；剖檢動(dòng)物進(jìn)行寄生蟲蠕蟲學(xué)檢查，計(jì)數(shù)胃腸道中的蟲體數(shù)并作必要的分類[4]，進(jìn)一步比較和驗(yàn)證各組寄生蟲感染的程度和臨床的驅(qū)蟲療效。

1.5 結(jié)果評(píng)價(jià) 比較試驗(yàn)期間的臨床表現(xiàn)和增重差異；比較糞檢蟲卵陽性率的變化、每1 g糞便中蟲卵數(shù)(EPG)的變化、剖檢蟲體的種類以及數(shù)量等的差異；計(jì)算給藥組的精計(jì)驅(qū)蟲率和粗計(jì)驅(qū)蟲率，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析說明藥物治療的有效性，計(jì)算公式如下：

精計(jì)驅(qū)蟲率×100%

2 結(jié) 果

試驗(yàn)期間各組試驗(yàn)雞采食、飲水、活動(dòng)和精神狀態(tài)等的臨床表現(xiàn)未見異常，定量飼喂過程各圈舍未見有明顯的飼料剩余出現(xiàn)，未觀察到毒副反應(yīng)，也未觀察到雞蛔蟲等寄生蟲感染蟲體的排除。

2.1 藥物對(duì)增重的影響 試驗(yàn)給藥前，各組動(dòng)物體重?zé)o顯著差異，第21 d和42 d各組平均體重以及增重結(jié)果顯示，公雞和母雞的體重和增重均存在明顯的差別(P<0.05)。試驗(yàn)過程中，母雞的平均增重在各組和各時(shí)間段的變化較小；芬苯噠唑組公雞21 d的平均增重高于其他各組，但第21 d到42 d的平均增重卻低于其他各組，試驗(yàn)藥物潮霉素B組在整個(gè)試驗(yàn)過程的累計(jì)增重高于芬苯噠唑組和感染對(duì)照組，但各組間的增重差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表2和表3。

表2 臨床試驗(yàn)公雞的平均體重和增重比較

表3 臨床試驗(yàn)?zāi)鸽u的平均體重和增重比較

2.2 試驗(yàn)不同階段糞便蠕蟲學(xué)檢查的結(jié)果 給藥前，各組之間的糞便檢查結(jié)果無明顯差異(P>0.05)，試驗(yàn)過程中，不給藥感染對(duì)照組的糞便卵囊的陽性率和平均EPG有一定的變化，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。潮霉素B連續(xù)給藥14 d和21 d后，糞便中蛔蟲卵囊的陽性率和平均EPG與同期不給藥組比較均出現(xiàn)明顯的下降(P<0.05)，連續(xù)給藥治療35 d和42 d后，糞便中蛔蟲卵囊的陽性率和平均EPG比同期不給藥組下降更顯著(P<0.01)。芬苯噠唑連續(xù)給藥6 d，第14 d和21 d的糞便檢查中，蛔蟲卵囊的陽性率和平均EPG均有顯著下降(P<0.01)。同時(shí)，絳蟲等卵囊的陽性率和平均EPG雖有一定的下降，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。潮霉素B對(duì)雞蛔蟲和絳蟲等的精計(jì)驅(qū)蟲率分別為100%和57%，連續(xù)飼喂14 d有顯著治療效果(P<0.05)，連續(xù)飼喂35 d后的驅(qū)蟲效果極顯著(P<0.01)，潮霉素B與芬苯噠唑?qū)紫x的長期治療效果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，詳見表4。

表4 臨床試驗(yàn)各階段的蠕蟲學(xué)糞便檢查結(jié)果

*表示與同期的不給藥感染對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；**表示與同期的不給藥感染對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；/表示未檢查

2.3 寄生蟲蠕蟲學(xué)剖檢檢查結(jié)果和驅(qū)蟲率比較 試驗(yàn)雞剖檢寄生蟲蠕蟲學(xué)檢查過程中，各臟器肉眼未見病理變化，給藥前剖檢蛔蟲感染率為39%，絳蟲等其他感染率為49%，給藥后21 d和42 d，潮霉素B組的剖檢蛔蟲感染率分別為5%和0，絳蟲等其他感染率為36%和23%；芬苯噠唑組治療后的蛔蟲感染率均為0，絳蟲等其他感染率為18%，潮霉素B和芬苯噠唑組治療后的蛔蟲陽性率明顯低于同期的不給藥感染對(duì)照組(P<0.01)，但絳蟲等的陽性率與不給藥對(duì)照組之間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具體見下表5。

潮霉素B預(yù)混劑連續(xù)飼喂21 d和42 d，對(duì)雞蛔蟲的粗計(jì)驅(qū)蟲率分別為63%和100%，試驗(yàn)過程未發(fā)現(xiàn)對(duì)雞絳蟲的驅(qū)除作用，對(duì)照藥物芬苯噠唑粉連續(xù)飼喂6 d，對(duì)雞蛔蟲和絳蟲等的粗計(jì)驅(qū)蟲率分別為100%和44%，詳見表6。

表5 試驗(yàn)雞的剖檢結(jié)果

*表示與同期的不給藥感染對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；**表示與同期的不給藥感染對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；/表示未檢查

表6 潮霉素B和芬苯噠唑治療的粗計(jì)驅(qū)蟲率比較

3 討 論

寄生蟲病生前診斷和判定治療效果的主要方法是糞便的蠕蟲學(xué)檢查[3],本試驗(yàn)過程中的卵囊計(jì)數(shù)采用改良的McMaster氏法，并將麥?zhǔn)戏z測(cè)結(jié)果陰性樣品進(jìn)一步用漂浮集卵法進(jìn)行篩查和計(jì)數(shù)，提高了部分檢出率。前期篩查發(fā)現(xiàn)，生長周期短的商品肉雞的蠕蟲感染率很低，本試驗(yàn)中的皖西麻黃雞屬于肉蛋兼用型優(yōu)質(zhì)地方品種，具有獨(dú)特風(fēng)味，其特點(diǎn)是生長相對(duì)緩慢，飼養(yǎng)周期較長，試驗(yàn)前篩查的蠕蟲感染陽性率達(dá)94%，其中蛔蟲感染的陽性率44%，現(xiàn)場(chǎng)隨機(jī)剖檢確證蠕蟲感染率70%，蛔蟲感染率50%，屬于寄生蟲自然感染嚴(yán)重的雞群，可以滿足臨床試驗(yàn)的要求[5-6]。

本試驗(yàn)過程未見雞群有明顯的臨床異常，也未觀察到雞蛔蟲等寄生蟲感染蟲體的排除，原因可能是該土雞本身有采食蟲體的嗜好。從試驗(yàn)雞的體重增重變化來看，由于160日齡以上的成年雞已過了快速生長期，因此，雖然試驗(yàn)藥物潮霉素B組在整個(gè)試驗(yàn)過程的累計(jì)增重高于芬苯噠唑組和感染對(duì)照組，但各組間的增重差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。從糞便的蠕蟲學(xué)檢查結(jié)果可見，使用潮霉素B與芬苯噠唑治療后，雞群的糞便蛔蟲卵的陽性率和數(shù)量均有明顯的下降(P<0.01)，但對(duì)絳蟲等卵囊的陽性率和數(shù)量的影響不明顯(P>0.05)，潮霉素B對(duì)雞蛔蟲和絳蟲的精計(jì)驅(qū)蟲率分別為100%和57%，芬苯噠唑?qū)﹄u蛔蟲和絳蟲的精計(jì)驅(qū)蟲率分別為100%和41%，說明潮霉素B與芬苯噠唑同樣具有良好的驅(qū)蛔蟲作用，2種藥物的療效果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

試驗(yàn)動(dòng)物的剖檢是對(duì)糞便蠕蟲學(xué)檢查的補(bǔ)充和驗(yàn)證，結(jié)果顯示，潮霉素B連續(xù)飼喂21 d和試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，對(duì)雞蛔蟲的粗計(jì)驅(qū)蟲率分別為63%和100%，對(duì)照藥物芬苯噠唑連續(xù)飼喂6 d，對(duì)雞蛔蟲和絳蟲等的粗計(jì)驅(qū)蟲率分別為100%和44%，2種藥物都具有良好的驅(qū)除蛔蟲功效，但對(duì)于絳蟲的驅(qū)除作用不明顯，與以上糞便蠕蟲學(xué)檢查的結(jié)果一致，但與其他文獻(xiàn)報(bào)道中芬苯噠唑可以同時(shí)驅(qū)除大部分的線蟲和絳蟲的結(jié)果不一致，原因可能與藥物的使用劑量有關(guān)[7-9]，本試驗(yàn)使用推薦劑量中值，雖然可以很好的驅(qū)除蛔蟲的感染，但對(duì)于雞絳蟲的效果有限。

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(編輯：李文平)

Study on Clinical Deworming Trial of Hygromycin B Premixes

FEI Chen-zhong1，SU Shi-guang2，LI Gui-yu3，XU Yue-ying2，WU Hao1， FAN Chao1，XIAO Wen-long1，XUE Fei-qun1*

(1.ShanghaiVeterinaryResearchInstitute,ChineseAcademyofAgriculturalSciences,Shanghai200241,China; 2.InstituteofAnimalScience,AnhuiAcademyofAgriculturalSciences,Hefei230031,China; 3.ZhejiangHisunPharmaceuticalCo.,Ltd.,Taizhou,Zhejiang318000,China)

To understand the clinical effect and rational administration time of hygromycin B premixs expelling theTaeniaandNematodes, 824 Wanxi partridge chicken naturally infected by worms were selected and randomly assigned to three groups: the hygromycin B premixes treatment group (n=284), the fenbendazole powder control drug group (n=284) and the no treatment and infected control group (n=256). The test period is determined according to the clinical effect. The results showed that when 10 mg/kg hygromycin B premixes was fed continuously for 21 days, the deworming rate in chicken roundworms and tapeworms was about 63% and 26%, respectively, showing a significant effect on expelling roundworms (P<0.05). When fed continuously for 42 days, the rough deworming rate in chicken roundworms and tapeworms was 100% and -13%, respectively, showing an extremely significant effect on expelling roundworms (P<0.01). The coarse deworming rate in chicken roundworms and tapeworms with 50 mg/kg control drug fenbendazole powder feeding continuously for six days was 100% and 44%, respectively, also showing an extremely significant role in expelling roundworms (P<0.01). In the test, the effect of these two drugs driving out roundworms was similar, while their role in expelling tapeworms was not obvious (P>0.05). 10 mg/kg hygromycin B premixs with feeding continuously for 42 days can dispel chicken roundworms completely, but has no obvious effect on expelling chicken tapeworms.

Ascaridiagalli; hygromycin B; clinical trial

國家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃專項(xiàng)(2016YFD0501303)；國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31272607)

費(fèi)陳忠，碩士，研究員，從事新獸藥和獸醫(yī)藥理學(xué)相關(guān)研究。

薛飛群。E-mail: fqxue@shvri.ac.cn

2016-09-18

A

1002-1280 (2017) 01-0030-05

S859.795