寧夏銀北地區(qū)慢性HBV感染者病毒基因型的分布與臨床的關(guān)系

王小紅 程玉娥 李露露

753200寧夏石嘴山市第一人民醫(yī)院，石嘴山市

近年來(lái)的研究發(fā)現(xiàn)，HBV的復(fù)制、HBeAg血清學(xué)狀態(tài)、病毒基因型及基因變異在CHB疾病進(jìn)展中發(fā)揮重要作用。

本研究對(duì)81例慢性HBV感染者的標(biāo)本進(jìn)行基因分型測(cè)定及乙肝病毒DNA定量、乙肝兩對(duì)半定量、肝功能以及肝臟纖維化程度檢測(cè)，分析慢性HBV感染者病毒基因型在寧夏銀北地區(qū)的分布情況以及與各檢測(cè)指標(biāo)之間的聯(lián)系，現(xiàn)報(bào)告如下。

資料與方法

2017年1月-2018年11月收治慢性HBV感染患者81例，診斷均符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)2015年修訂《慢性乙型肝炎防治指南》的診斷標(biāo)準(zhǔn)[1]，并排除合并甲、丙、丁、戊型等其他肝炎病毒感染以及自身免疫性肝病、藥物性肝損害、酒精性肝病等。其中男61例，年齡20～76歲；女20例，年齡25～76歲。其中慢性乙肝42例，乙肝后肝硬化27例，原發(fā)性肝癌12例。

方法：采用熒光PCR法對(duì)入選病例標(biāo)本進(jìn)行基因分型測(cè)定及乙肝病毒DNA定量檢測(cè)，用免疫分析法定量檢測(cè)HBV血清學(xué)標(biāo)志物，血清學(xué)檢查肝功能，F(xiàn)ibroscan無(wú)創(chuàng)性超聲診斷儀檢測(cè)肝臟纖維化程度，并對(duì)結(jié)果進(jìn)行相關(guān)性分析。

觀察指標(biāo)：觀察慢性HBV感染者病毒基因型在寧夏銀北地區(qū)的分布情況；觀察入選慢性HBV感染者乙肝病毒DNA定量、乙肝病毒e抗原、ALT、AST以及肝臟纖維化程度與乙肝病毒基因分型的相關(guān)性；以及探討分析乙肝病毒基因型與入選慢性乙型肝炎組、乙肝后肝硬化組、原發(fā)性肝癌組3組臨床患者之間的關(guān)系。

結(jié) 果

研究病例納入情況：收集病例81例，男61例，平均年齡(48.54±12.43)歲；女20例，平均年齡(52.7±12.81)歲；慢性乙型肝炎42例(51.9%)，乙肝后肝硬化27例(33.3%)，原發(fā)性肝癌12例(14.8%)。

寧夏銀北地區(qū)慢性HBV感染者病毒基因型分布情況：81例寧夏銀北地區(qū)的慢性HBV感染者中共檢測(cè)出B、C、D、C/D重組型4種基因型，其中B型3例(3.7%)，C 型 64例(79%)，D 型 3例(3.7%)，C/D重組型3例(3.7%)，未檢測(cè)出基因型8例(9.9%)。本結(jié)果表明，寧夏銀北地區(qū)的慢性HBV感染者中病毒基因型分布主要以C型為主。經(jīng)Fisher確切概率法統(tǒng)計(jì)分析，B、C、D、C/D重組4組基因型在不同性別人群中的分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。見(jiàn)表1。

寧夏銀北地區(qū)慢性HBV感染者病毒基因型分布與疾病程度的關(guān)系：寧夏銀北地區(qū)慢性HBV感染者基因型中C型在肝癌組中100%、肝硬化組中96%，均高于慢性乙型肝炎組78.4%及其他基因型組，但組間分布差異經(jīng)Fisher確切概率法統(tǒng)計(jì)分析差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。見(jiàn)表2。

寧夏銀北地區(qū)慢性HBV感染者病毒基因分型與臨床指標(biāo)的關(guān)系：4種基因型組中平均年齡、ALT、AST、HBV DNA、肝臟纖維化程度及乙肝病毒e抗原的情況。對(duì)乙肝病毒載量進(jìn)行Log對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換，以Log10(HBV DNA)copies/mL表示，除乙肝病毒e抗原組外其他臨床指標(biāo)組經(jīng)正態(tài)性及方差齊性檢驗(yàn)，均為非正態(tài)分布或方差不齊，故差異比較采用秩和檢驗(yàn)進(jìn)行，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析寧夏銀北地區(qū)慢性HBV感染者4種基因型與ALT、AST、HBVDNA、肝臟纖維化程度指標(biāo)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，基因分型與年齡組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。乙肝病毒e抗原組在4種基因型中經(jīng)Fisher確切概率法分析差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

討 論

近年研究發(fā)現(xiàn)，HBV基因型的類別與HBV的感染途徑、自然史、臨床表現(xiàn)、藥物療效、病毒變異以及疾病進(jìn)展有關(guān)。到目前為止，根據(jù)HBV核苷酸全序列異質(zhì)≥8%或表面抗原S基因序列核苷酸差異度≥4%，已將乙肝病毒株分為A到H8種基因型。大量研究表明乙肝病毒基因型具有一定的地域分布特點(diǎn)，并且乙肝病毒的傳播方式、臨床疾病譜、預(yù)后判斷、疫苗預(yù)防及抗病毒治療效果與其關(guān)系密切，因此了解HBV基因型具有重要的臨床意義。

表1 患者基因分型情況[n(%)]

表2 慢性HBV感染者病毒基因型在相關(guān)疾病中的分布情況(n)

LI等在中國(guó)收集了1 148個(gè)HBV基因組序列[2]，統(tǒng)計(jì)分析顯示中國(guó)東北地區(qū)以C型為主，華南地區(qū)以B型為主，西南地區(qū)以B型和C型為主，西北地區(qū)以C/D型為主。因此，基因型B和C是中國(guó)大陸地區(qū)流行的主要HBV基因型，在漢族人中常見(jiàn)。其中北方以C型為主，南方以B型為主，而少數(shù)民族不同于漢族，藏族和彝族以C型為主，維吾爾族人群以D型為主。本研究發(fā)現(xiàn)，寧夏銀北地區(qū)慢性HBV感染者基因型主要為C型，分布與全國(guó)一致，但與報(bào)道的寧夏地區(qū)HBV感染者基因型以B基因型為主，其次為C基因型不符，這是否與寧夏銀北地區(qū)為老工業(yè)基地，人口構(gòu)成以外地移民人口為主，寧夏本地人口不占優(yōu)勢(shì)有關(guān)，需進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量來(lái)研究證實(shí)。同時(shí)發(fā)現(xiàn)4種基因型在不同性別人群中的分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但在年齡組分布差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，這就預(yù)示在以后工作中需重點(diǎn)關(guān)注年齡化問(wèn)題。鑒于本研究納入的病例樣本量偏少，不足以明顯劃分出不同年齡段之間的差異，需以后擴(kuò)大樣本量進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

有研究表明：在以B、C為優(yōu)勢(shì)的地區(qū)，C型具有較強(qiáng)的致病能力，預(yù)后差；C型基因和高病毒載量已被證明是肝癌發(fā)展的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。本研究顯示，HCC組、LC組C基因型的比例均明顯高于CHB組及其他基因型組，證實(shí)了C基因型與肝癌的進(jìn)展密切相關(guān)[3]。

有研究報(bào)道，C基因型引起的肝臟疾病臨床表現(xiàn)的嚴(yán)重程度較B型高，包括較高的肝癌術(shù)后復(fù)發(fā)率、延遲的血清轉(zhuǎn)換、較高的DNA拷貝數(shù)、較高的ALT水平[4]。通過(guò)對(duì)81例患者乙肝兩對(duì)半的檢測(cè)顯示，C型、C/D重組型乙肝病毒e抗原陽(yáng)性率明顯高于其他基因型，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，提示C型、C/D重組型乙肝病毒復(fù)制較活躍，易形成持續(xù)的病毒血癥，免疫清除期較長(zhǎng)，從而導(dǎo)致持續(xù)的炎癥損傷加重病情。

本研究顯示4種HBV基因型在ALT、AST、HBV DNA及肝臟纖維化程度均無(wú)顯著性差別，此結(jié)果可能與研究樣本量相對(duì)較小有關(guān)，需以后擴(kuò)大樣本量分析以明確。

綜上所述，寧夏銀北地區(qū)慢性HBV感染者基因分型以C型為主，且C型與較嚴(yán)重的HBV感染相關(guān)性肝病病情有關(guān)，乙肝病毒基因分型結(jié)果與ALT、AST、HBV DNA及肝臟纖維化程度是否存在聯(lián)系，還需進(jìn)一步統(tǒng)計(jì)研究。